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1.
乙型肝炎病毒前S2蛋白下调胰岛素受体启动子的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
纪冬  韩萍  张健  邵清  刘妍  王琳  陈国凤 《中华医学杂志》2009,89(43):3069-3073
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S2蛋白对胰岛素受体(INSR)启动子转录的下调作用.方法 HBV前S2蛋白真核表达质粒pcDNA3.1(-)-preS2及INSR启动子真核报告质粒pCAT3-INSRp使用常规分子生物学方法进行构建,并经酶切、测序证实.接下来,将构建好的pcDNA3.1(-)-preS2质粒以1.0、1.5、2.0μg转染HepG_2细胞,提取总RNA后进行相对实时荧光定量PCR检测以明确前S2蛋白mRNA的表达量.然后,分别将pCAT3-INSRp质粒以0.2μg递增量(0~2.0μg)转染HepG_2、Huh7细胞系,CAT-ELISA法检测转染细胞的氯霉素乙酰转移酶(CAT)表达量以制作pCAT3-INSRp的量-效曲线.最后,根据量一效曲线选择合适的pCAT3-INSRp转染剂量(1.0μg)与不同剂量的pcDNA3.1(-)-preS2(1.0、1.5、2.0、2.5、3.0μg)共转染HepG_2及Huh7细胞,同时使用抗前S2蛋白单克隆抗体以阻断前S2蛋白的作用,使用CAT-ELISA方法检测转染细胞的CAT表达量,以观察前S2蛋白对于INSR启动子的调节作用.结果 转染了pcDNA3.1(-)-preS2的细胞可以正确表达HBV前S2蛋白的mRNA.pCAT3-INSRp质粒转染细胞后CAT的表达随着转染剂量的增加而增加,量-效曲线为S形.转染不同剂量pcDNA3.1(-)-preS2后,HepG_2细胞内CAT基因的表达水平分别为对照的69.8%、60.1%、19.7%、10.3%、5.6%(转染后36 h)和68.6%、56.0%、10.3%、8.6%、3.2%(转染后72 h).同时,在转染2.0μg pcDNA3.1(-)-preS2的细胞培养上清中加入前S2单抗后,其CAT的表达量恢复为对照的55.4%(36 h)和69.7%(72 h).Huh7细胞的结果同HepG_2细胞结果相似.结论 克隆的INSR启动子有顺式激活下游基因的活性;HBV的前S2蛋白对INSR启动子转录具有下调作用,可以在分子水平解释肝源性糖尿病发病机制的一部分.  相似文献
2.
基底动脉尖综合征(Top of the hasilar artery syndrome,TOB)是由Caplan于1980年首先提出,并作为一种特殊类型椎基底动脉系血管病列出。随着辅助检查头Cr及MRI的广泛应用,确诊为TOB的患者越来越多,现将我科2002年以来所收治的11例TOB患者分析如下。  相似文献
3.
乙型肝炎(HepatitisB)是一种致命性的肝脏疾病。系感染乙肝病毒(Hepatis Bvirus or HBV)所致,是世界上最常见的传染病之一。在我国HBV感染率非常之高,因此乙型肝炎的抗病毒治疗成为国内,外专家的研究热点,且其进展很快,但由于单一药物治疗效果不佳。抗乙肝病毒的联合治疗(Combined Therapy)已得到了专家们的共识,目前最常见的抗病毒药物仍为干扰素以及核苷类似物(如拉米夫定),它们之间的联合应用可以取得较好的效果。  相似文献
4.
丹奥(注射用奥扎格雷钠)是一种高效强力的血栓素(TXA2)合成酶抑制剂,近年来被广泛应用于急性缺血性脑血管病的治疗。我院对2003年8月—2003年12月住院的80例急性脑梗塞患者分别给予丹奥药物治疗和丹参等其它药物治疗,现对比观察如下。  相似文献
5.
2003年3月至2003年11月,我科对100例急性脑梗塞患者分别给予金纳多和丹参治疗,对比观察治疗前后神经功能缺失和全血粘度的变化。结果表明,金纳多治疗急性脑梗塞的总有效率为93%,并能降低全血粘度,明显优于对照组,且无明显不良反应。  相似文献
6.
基底动脉尖综合征(TOB)作为一种特殊类型椎基底动脉系血管病列出。随着辅助检查头CT及MR1的广泛应用,确诊为TOB的患者越来越多,现将我科2002年以来收治的11例TOB患者分析如下。  相似文献
7.
丹红注射液是由中药丹参和红花科学提取精制而成,目前被广泛应用于急性缺血性脑血管病的治疗。我院对2010年8~12月住院的80例急性脑梗死患者分别给予丹红和灯盏花素药物治疗,现对比观察如下。1资料与方法  相似文献
8.
目的应用基因表达谱芯片技术及生物信息学技术筛选并克隆乙型肝炎病毒(HBV)前-S2蛋白反式激活新型靶基因,进一步阐明HBV感染相关性疾病的发病机制。方法以HBV前-S2蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-PreS2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取总RNA进行基因表达谱芯片分析。并克隆HBV前-S2反式激活作用的新的靶基因。结果获得该新基因的全长序列,并测序证实,因其可以被前-S2蛋白反式激活,故命名为前S2反式激活蛋白1(PS2TP1),已在GenBank中注册,注册号:AY561706。PS2TP1基因的编码序列全长为1113个核苷酸(nt),编码产物由370个氨基酸残基(aa)组成。结论HBV前-S2蛋白具有反式激活功能,调节宿主细胞某些基因的表达,从而改变宿主正常的应答水平,引起病变。  相似文献
9.
端粒/端粒酶系统可以调节细胞的增殖。通过抑制端粒酶的活性而抑制细胞的增殖,是一种肿瘤治疗的策略;通过激活端粒酶的表达而促进细胞增殖,可以治疗某些退形性疾病。近年来对此系统的研究成为热点,本文就端粒酶的作用、调节及其与肿瘤、细胞永生化方面进行综述。  相似文献
10.
目的探讨联合使用阿德福韦酯与拉米夫定在乙型肝炎肝硬化失代偿期病人中抗病毒治疗的安全性与疗效,从而寻找更加有效的治疗方法。方法应用前瞻性随机分组的方法,对64例乙型肝炎肝硬化失代偿期患者随机分成两组。A组予阿德福韦酯(10mg/d)联合拉米夫定(100mg/d)治疗;B组予阿德福韦酯(10mg/d)治疗;直至治疗结束。以上两组的疗程均为48周, 分别在治疗的12、24、36和48周抽血,检测各组血清ALT、HBeAg、HBV DNA及child分级变化。结果治疗结束后,两组患者HBV DNA阴转率为87.1%及78.8%,有效率分别为96.8%及87.9%;HBeAg阴转率分别为83.9%及57.6%;HBeAg/抗- HBe血清转换率分别为41.9%及24.2%;血清ALT复常率分别为96.8%及97.0%。结论联合用药可减少耐药的发生,并可增加抗病毒效果,且其安全性良好,但需扩大样本进一步研究。  相似文献
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