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1.
昆明种系小鼠胚胎干细胞的分离培养及特性鉴定   总被引:18,自引:0,他引:18  
目的 提高昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)建株的成功率。方法 收集小鼠3.5d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,经两次亚克隆分离培养ES细胞;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴定。结果 获得两个稳定ES细胞集落,传至第11代。ES细胞呈集落样生长,碱性磷酸酶染色强阳性,体外分化的细胞沿拟胚体外向性生长,形态多样,在体分化可形成来源于3个胚层的组织。结论 两次亚克地获得的细胞具有ES细胞主要的生物学性状,有助于提高昆明小鼠ES细胞建株的能力。  相似文献
2.
单味黄芪红花丹参注射液对神经干细胞分化影响的初步研究   总被引:11,自引:1,他引:10  
目的寻找对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的增殖、分化和存活有促进作用的单味中药成分,进而确定对NSCs的增殖和分化有影响的中药有效成分。方法本研究筛选了黄芪、红花、丹参3种中药注射液分别刺激培养的NSCs,观察NSCs的分化状态。结果发现黄芪、红花有明显的促进NSCs分化的作用,其中黄芪效果最佳,而丹参却有促进NSCs凋亡的作用,这种作用随着其浓度的升高而加强。结论黄芪、红花对NSCs的分化起积极作用,丹参对NSCs的分化有毒性作用,也可能促进NSCs的凋亡,为进一步从细胞水平和分子水平研究中药的作用机制和NSCs的分化机制提供了依据。  相似文献
3.
体外培养神经干细胞分化为类胰岛样组织的研究   总被引:10,自引:1,他引:9  
目的:观察体外培养的神经干细胞是否可以被诱导分化为类胰岛样组织。方法:体外培养神经干细胞,在胰岛素等外源性复合成分(ITS)诱导分化后,分别进行胰腺上皮干细胞特异性标志物CK-19、胰腺β细胞特异性成分胰岛素和胰腺α细胞特异性成分胰高糖素等的免疫细胞化学染色鉴定。结果:体外培养的神经干细胞经诱导分化3d后,在神经干细胞集落附近可见散在或成群分布的上皮样细胞,并呈CK-19免疫阳性反应。继续培养2-4周后,上皮样细胞增多,细胞圆形或呈鹅卵石样排列,进一步增生形成类胰岛样组织,其中大多数细胞呈胰岛素免疫反应阳性,少数细胞呈胰高糖素免疫反应阳性。结论:体外培养的神经干细胞具有向类胰岛样组织分化的潜能,它能分化为胰岛的α细胞和β细胞。  相似文献
4.
人胰腺干细胞的体外分离培养、鉴定和分化特性   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的:体外分离培养人胰腺干细胞,进行鉴定并初步观察其分化为胰岛内分泌细胞的能力。方法:用酶消化法从人胎儿胰腺分离胰腺干细胞,培养并传代,应用胰腺干细胞特异性标志物CK-19、胰岛β细胞特异性成分胰岛素和α细胞特异性成分胰高血糖素的抗体进行免疫细胞化学染色鉴定细胞种类和分化特性。结果:分离培养的人胎儿胰腺干细胞呈梭形,最初1周生长较慢,以后增殖较快,约培养3周后即可传代培养。传代细胞约生长2周即可再次传代,免疫细胞化学染色显示细胞呈CK-19免疫阳性反应。经诱导分化后,细胞形成类胰岛样组织,此时免疫细胞化学染色显示部分细胞呈随岛素免疫阳性反应,少数细胞呈胰高糖素免疫阳性反应。结论:人胰腺干细胞能在体外培养条件下快速增殖,并具有多向分化潜能,能分化形成胰岛β细胞和α细胞。  相似文献
5.
昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特性鉴定   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:分离培养昆明小鼠胰腺干细胞并进行鉴定和观察其分化胰岛细胞的能力。方法:用酶消化法分离生后不同时期昆明小鼠胰腺干细胞,用细胞角质蛋白19(Cytokeratin19,CK19)、胰岛素(Insulin)和胰高血糖素(Glucagon)抗体进行免疫细胞化学染色,鉴定细胞各类和分化特性。结果:分离初,可见少量上皮样细胞存活,更换含有生长因子的培养基后,可见细胞分裂增殖,呈长梭形,逐渐形成集落。传代后鉴定呈CK19阳性。高糖诱导分化后,细胞形成胰岛样结构,免疫细胞化学染色显示大部分细胞胰岛素阳性,少数细胞呈胰高血糖素阳性。结论:昆明小鼠胰腺干细胞能在体外培养条件下增殖,具有分化形成胰岛β细胞和α细胞的能力。  相似文献
6.
ES-NT3细胞的神经定向诱导分化   总被引:3,自引:0,他引:3  
秦茂林  李成仁  姚忠祥  刘建军 《重庆医学》2005,34(5):732-733,737
目的了解维甲酸(retinoic acid,RA)对ES-NT3细胞的神经诱导分化的影响.方法转染NT3基因后的MESPU35胚胎干细胞(ES-NT3细胞),4-/4 法诱导其神经定向分化.结果相差显微镜观察ES-NT3细胞诱导分化的神经样细胞拟胚体百分率随分化时相点延长而升高;免疫细胞化学观察ES-NT3细胞诱导分化形成的NF200阳性细胞和GFAP阳性细胞的比例随分化时相点延长而升高,二者总和可以达到75%.结论RA诱导ES-NT3细胞神经定向分化能够产生高比例神经细胞,提示其可以作为移植治疗神经损伤的供体.  相似文献
7.
瘀证实质的探讨   总被引:2,自引:0,他引:2  
中医所说“(?)证”,一般是指“血液郁滞、血行痹阻,血液妄行,污血内结而成血瘀”的病理现象。故凡外伤、食滞、疫毒、衰老、精神刺激等因素引起脏腑、组织、器官出现有血瘀的复杂多样的临床病象,多称为瘀症。在临床上,中医认为面色暗黑、瘀斑、肌肤甲错、青筋暴露,月经不调,(?)腹积聚、出血、痈疮、紫舌、发黄、痹痛等作为诊断瘀症的主要依据,甚至把惊悸、健忘、癫狂、红鼻头、白癜风、紫印脸等亦归于瘀症的表现范畴。目前活血化瘀治则已广泛应用于临床各科,如血液、心血管、泌尿、生殖、消化、呼吸、妇产、五官、精神、神经、烧伤、多种炎症、结缔组织病、免疫异常疾病和肿瘤等疾患都在不同程度上应用它。  相似文献
8.
运用多媒体课件讲授医学本科人体胚胎学   总被引:2,自引:0,他引:2  
多媒体课件将图、结合在一起,并具有动态三维效果,可以将人体胚胎发生中连续、复杂的形态变化过程清晰地呈现出来。我们教研室制作了人体胚胎学的多媒体课件,并将其用于医学本科学员的人体胚胎学教学,通过教学评估表明该多媒体课件对人体胚胎学教学有很大帮助,在一定程度上促进了学员们对人体发生过程的认识和理解,提高了学员学习胚胎学的兴趣。  相似文献
9.
维甲酸对MESPU35胚胎干细胞系神经定向分化的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 了解维甲酸(Retinoic acid,RA)对MESPU35胚胎干细胞系诱导分化的影响。方法小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,培养MESPU35细胞系,4—/4 法诱导其神经定向分化。结果 相差显微镜观察RA诱导MESPU35细胞系出现神经样细胞拟胚体百分率随分化时相点和RA浓度升高而升高,免疫细胞化学观察分化的NF200和GFAP阳性细胞随分化时相点和RA浓度升高而增加,NF200阳性细胞由无突起变为多极细胞,GFAP阳性细胞突起由短变长,最后联结成网状。流式细胞仪检测分化的GFAP、NF200阳性细胞比例变化与免疫细胞化学结果相符。结论 RA诱导MESPU35细胞系神经定向分化的调节以浓度和时间依赖模式进行,提示其神经定向分化产生的高比例神经细胞可以用于移植治疗。  相似文献
10.
NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU35细胞株.方法RT-PCR扩增目的基因,克隆入穿梭载体pExchange-1neo,酶切及测序鉴定.重组载体转染MESPU35胚胎干细胞株,G418长期筛选,RT-PCR检测转染细胞NT3水平.结果RT-PCR得到长度为777bp的基因片段,克隆后酶切鉴定正确,测序结果经BLAST对比,与GenBank中小鼠NT-3序列完全一致.成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株.结论从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因,所获得的NT3稳定表达MESPU35-NT3细胞株为后续相关实验提供了保证.  相似文献
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