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1.
【目的】观察黄芪甲苷体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为心肌样细胞的作用。【方法】采用密度梯度离心和贴壁培养法分离大鼠MSCs,反复传代及纯化后,取第3代MSCs,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34和CD44;取第8代MSCs进行分组诱导:黄芪甲苷组(终浓度为250 mg/L)、5-氮胞苷(5-aza,终浓度为10μmol/L)、黄芪甲苷加5-aza组(终浓度分别为250 mg/L与10μmol/L),并设空白对照组,诱导后继续培养4周;计算心肌样细胞诱导率,采用免疫组化法鉴定诱导后MSCs中结蛋白(Desmin)和心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法鉴定诱导后MSCs中心肌特异性蛋白α-心肌肌球蛋白重链(-αMHC)和β-心肌肌球蛋白重链(-βMHC)信使核糖核酸(mRNA)的表达。【结果】原代培养的MSCs首先形成集落,传代细胞体积变大,诱导后细胞呈梭形,并出现肌管;MSCs表面抗原CD44表达阳性,而骨髓造血干细胞表面抗原CD34表达阴性,表明本实验方法所得细胞为均一的MSCs细胞群;各组在不同时间的心肌样细胞诱导率无明显差异;免疫组化结果显示诱导后MSCs表达心肌特异性蛋白Desmin和cTnI;RT-PCR结果显示诱导后MSCs表达成熟的心肌特异性蛋白-αMHC和-βMHC。【结论】黄芪甲苷可在体外诱导大鼠MSCs定向分化为心肌样细胞,但诱导率仍有待提高。  相似文献
2.
【目的】观察人参总皂甙(GS)对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。【方法】取成年SD大鼠骨髓细胞,采用密度梯度分离法与贴壁法结合获取MSCs,进行原代培养和克隆培养;采用流式细胞仪检测细胞表面抗原 CD34和CD44以鉴定该法所获细胞是否为MSCs;对传至第8代的MSCs进行分组诱导,分别为GS组(终末浓度为 250 mg/L)、5-氮胞苷(5-aza)组(终末浓度为10μmoL/L)、GS 5-aza组(终末浓度分别为250 mg/L、10μmol/L),每组再分 3个亚组,分别对MSCs进行24、48、72 h诱导,并设空白对照组;采用共聚焦荧光显微镜观察细胞数及阳性细胞数,计算心肌样细胞转化率;采用免疫组化法检测分化的心肌样细胞的特异性蛋白结蛋白(Desmin)和肌钙蛋白(cTnI),采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测诱导前后心肌细胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重链(α-MHC)和β-心肌肌球蛋白重链(β- MHC)的表达。【结果】分离培养后的细胞生长密集,形态呈纺锤状,表面抗原鉴定为CD44表达阳性,表明所获细胞为 MSCs;经GS、5-aza诱导后,MSCs分化成类心肌细胞,3组的心肌样细胞转化率无显著性差异(分别为38%、35%、39%); 免疫组化和RT-PCR检测结果显示Desmin、cTnI和MHC表达均阳性,阳性细胞呈梭形和成纤维细胞样形态,表明MSCs在 GS体外诱导下已向心肌样细胞转化,并具有心肌样细胞的特性。【结论】GS可体外诱导MSCs分化为心肌样细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了实验依据。  相似文献
3.
【目的】观察三七总皂苷(PNS)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和体外诱导其分化为心肌样细胞的作用。【方法】采用骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面标志;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察PNS对MSCs增殖的影响;采用第8代MSCs进行体外心肌细胞诱导分化;采用相差显微镜、免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果鉴定心肌细胞。【结果】大鼠MSCs细胞表面抗原CD44阳性,CD34阴性;经PNS作用后MSCs增长速度比空白对照组明显加快,体外诱导后细胞形态发生变化,其细胞免疫组化鉴定呈结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白(cTnI)阳性;RT-PCR结果显示诱导后细胞转录肌球蛋白重链mRNA水平增加。【结论】PNS能促进大鼠MSCs体外增殖并可诱导MSCs分化为心肌样细胞,这为细胞移植治疗心肌梗死提供了实验依据。  相似文献
4.
牛磺酸对大鼠肝线粒体氧自由基损伤的保护作用   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的 观察氧自由基对线粒体的损伤以及牛磺酸的保护作用。方法 采用氧自由基发生系统FeSO4/VitC损伤线粒体,分离的肝线粒体分为3组:对照组(A组),损伤组(B组),牛磺酸保护组(C组)。分别测定线粒体呼吸功能、3种氧化酶活性、丙二醛含量。结果 B组线粒体状态3速率、呼吸控制率、磷/氧比、氧化磷酸化效率降低,说明线粒体呼吸功能和氧化磷酸化功能受损;B组线粒体电子传递链的琥珀酸氧化酶1、NADH氧  相似文献
5.
Myosin-Induced Autoimmune Myocarditis in BALB/C Mice   总被引:11,自引:0,他引:11  
Myocarditisandcardiomyopathyarediseasesofunknownpathogenesisandre-centstudieshavedemonstratedthatviralmyocarditis(VMC)anddila...  相似文献
6.
谈药物临床试验中研究者依从性的管理   总被引:6,自引:0,他引:6  
在药物临床试验中,研究的质量不但与受试者的依从性有关,更与研究者的依从性密切相关.研究者在整个临床试验中处主导地位,所以加强研究者依从性管理已引起越来越广泛的重视,并已成为当代医学界亟待解决的重要课题.就研究者依从性存在的问题、不依从的原因和提高依从性的管理方法等进行了探讨,以期在药物临床试验中,为提高受试者依从性提供理论和实践依据.  相似文献
7.
自身免疫性心肌病小鼠免疫球蛋白G亚类和Th细胞亚群分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:探讨Th细胞介导的免疫应答在自身免疫性扩张型心肌病(DCM)发生中的作用趋势。方法:应用 线粒体ADP/ATP载体肽(免疫应答组)和不含肽的免疫液(对照组)免疫Balb/c小鼠,试验期内(6个月)光镜和电 镜观察心肌组织病理学变化,ELISA法检测其血清抗ADP/ATP载体自身抗体及IgG亚类水平,三色荧光标记的流 式细胞术测其脾细胞中Th细胞亚群分布。结果:免疫应答组小鼠自身抗体均为阳性,且在免疫过程中其抗体水平、 血清IgG1及IgG2a亚类、Th1/Th2细胞亚群含量均持续高于对照组(P均<0.01)。免疫的第1个月末,免疫应答 组小鼠心脏形态及病理学变化类似心肌炎,IgG2a亚类与Th1细胞亚群在体内占优势;第6个月末,心脏改变类似 扩张型心肌病,且以IgG1与Th2亚群为主,对照组均正常。结论:线粒体ADP/ATP载体肽可诱导小鼠血清IgG2a 向IgG1优势的转化,此转化与Th1、Th2免疫应答分别在自身免疫性DCM发生的早期和后期阶段起优势作用有关。  相似文献
8.
桂枝茯苓胶囊治疗乳腺增生病(瘀血阻络证)临床研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
[目的] 评价桂枝茯苓胶囊治疗乳腺增生病(瘀血阻络证)的有效性和安全性.[方法]240例乳腺增生病(瘀血阻络证)患者采用随机、双盲、阳性药平行对照、多中心临床试验设计方法分为试验组和对照组2组.试验组口服桂枝茯苓胶囊,5粒/次(含桂枝茯苓模拟剂胶囊2粒),每天3次;对照组口服乳癖消胶囊,5粒次,每天3次.两组疗程均为3个月.观察两组临床疗效和主要症状体征积分的变化情况,并作安全性评价. [结果] 两组治疗后总有效率试验组为84.07%.对照组为71.43%.两组比较差异有显著性意义(JP<0.05),说明试验组疗效优于对照组.治疗3个月后两组中医主症积分下降比较,试验组下降值大于对照组(P<0.05).治疗期间,两组均未出现明显不良反应.[结论] 桂枝茯苓胶囊治疗乳腺增生病(瘀血阻络证)有良好的疗效.而且具有较高的安全性.  相似文献
9.
心肌梗死患者抗肌球蛋白轻链抗体检测的临床意义   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的;观察急性心肌梗死(AMI)患者血清中是否存在抗心肌肌球蛋白链抗体,探讨该抗体与AMI患者心功能和预后的关系。方法:67例AMI患者分别于发病第1周末和6个月进行免疫印迹法检测血清中的抗肌球蛋白轻链抗体和超声心动图检查。根据抗体结果分为抗体阳性组和阴性组,比较两组的心功能指标和预后,结果:67例AMI患者血清抗肌球蛋白轻链抗体阳性有17例,阳性率为25.4%,30例健康对照均为阴性;抗体阳性组和阴性组的梗死部位和范围相似,但抗体阳性组Killip分级心功能明显差于抗体阴性组(P<0.05),而室壁运动减弱,室壁瘤形成和死亡率均明显高于阴性组(P<0.05)。结论:急性心肌梗死患者血清中可检测到抗肌球蛋白轻链的自身抗体,自身免疫反应可能参与心肌损伤和心室重构,影响心肌梗死患者的心功能和预后。  相似文献
10.
药物临床试验的伦理审查几个要点   总被引:2,自引:1,他引:1  
药物临床试验中,为充分保护受试者权益,在伦理审查中要特别重视受试者参加风险和受益,力求风险最小和受益最大,保证受试者充分了解临床试验后知情同意,注意特殊受试人群保护,避免发生利益冲突。  相似文献
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