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1.
目的:构建甲型H3N2流感病毒非结构蛋白-1( nonstructal-1,NS1)真核表达载体并表达其编码蛋白;探讨NS1对细胞增殖的影响?方法:从江苏省甲型H3N2流感病毒毒株提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T/NS1质粒,双酶切pMD18-T/NS1与pXJ40-HA后,构建真核表达载体pXJ40-HA-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过免疫印迹法鉴定NS1蛋白的表达?3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测NS1转染细胞后对细胞增殖的影响? 结果:经双酶切?测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功;免疫印迹法证实NS1蛋白的表达?MTT法证实转染NS1质粒后对细胞增殖有抑制作用?结论:成功克隆了NS1全长基因,构建了其真核表达载体,并初步验证了NS1蛋白过表达后能抑制细胞的增殖,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1的细胞模型和NS1蛋白对细胞增殖和凋亡作用机制的进一步研究提供了基础?  相似文献
2.
目的:评价乙肝疫苗联合不同剂量乙型肝炎免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)对HBV母婴阻断的效果,探讨有效经济的联合免疫阻断方法?方法:将HBsAg阳性母亲的新生儿随机分为100 IU HBIG免疫组和200 IU HBIG免疫组,分别在出生12 h内注射100 IU或200 IU HBIG,同时新生儿都按0?1?6的程序接种10 μg乙肝疫苗,在婴儿7个月龄时观察HBV母婴阻断效果?结果:100 IU?200 IU组母婴阻断成功率分别为98.3%?98.0%,两组的阻断效果无明显差异,结合母亲HBV感染状态分析,两组的阻断效果亦无明显差异?结论:在新生儿HBV母婴阻断中,100 IU HBIG或200 IU HBIG联合10 μg乙肝疫苗的主被动联合免疫可获相似的阻断效果?  相似文献
3.
目的了解江苏部分地区动物中发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)携带状况,探讨其可能的传播媒介和自然宿主。方法 2012年3月~12月在江苏省发现发热伴血小板减少综合征病例的7个市/县,采集鼠、牛、羊、刺猬、鸟类和蜱等动物标本,提取总核酸后,应用实时荧光RT-PCR法对标本进行布尼亚病毒S基因核酸的检测,阳性标本采用Vero细胞进行病毒分离。结果采集761只(管)动物,43只(管)检出SFTSV核酸阳性,阳性率为5.65%。采集3 728份标本,阳性49份,阳性率为1.31%。鼠的病毒携带率最高(6.84%),蜱标本阳性率最高(4.94%)。除蜱标本外的3 647份标本中检出阳性45份,阳性率为1.23%,不同器官阳性率分别为淋巴结(50.00%)、血清(2.34%)、脾(1.64%)、心(1.64%)、肝(1.28%)、肺(1.09%)、脑(0.94%)、肾(0.73%)、血块(0.41%)。5月标本阳性率最高(4.01%)。从1份羊血清及其体表1份蜱标本中各分离出1株SFTSV病毒。结论鼠、牛、羊和蜱均可携带SFTSV,可能是其自然宿主或传播媒介。  相似文献
4.
目的:调查分析人群中乙肝病毒(HBV)慢性感染者e抗原(HBeAg)?丙氨酸氨基转移酶(ALT)的分布特征及影响因素,以指导慢性HBV感染者的人群防治?方法:对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性者开展调查问卷和HBeAg?ALT实验室检测,分析HBeAg?ALT水平分布特征及其影响因素?结果:共调查3 815例HBsAg阳性者,HBeAg阳性率为11.7%,ALT大于40 U/L和80 U/L的比例分别为15.6%?5.7%?男性ALT异常率高于女性,低年龄组HBeAg阳性率高?ALT异常率低,在有抗病毒治疗史人群中,ALT异常率仍达34.9%,无抗病毒治疗史者中有3.4%ALT大于 80 U/L?结论:不同性别?年龄人群HBV慢性感染后临床特征有明显差别,需加强慢性HBV感染者的随访工作并探索提高抗病毒治疗效果的药物和方法?  相似文献
5.
目的:构建人源性去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)基因真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞)。方法:利用包含ADAM9全长编码核酸序列的质粒PCR4-TOPO作为模板,用PCR扩增其核心编码区,将其克隆至PMD18-TVector中构建PMD18-T-ADAM9质粒,同时双酶切PMD18-T-ADAM9及PXJ40-HA后构建PXJ40-HA-ADAM9真核表达载体,经酶切鉴定及测序后将载体转染至293T细胞中,通过免疫印记法检测ADAM9蛋白的表达。结果:经过双酶切和测序结果鉴定PXJ40-HA-ADAM9载体构建成功,经过West-ern blot法证实ADAM9基因表达。结论:成功克隆ADAM9基因并构建其真核表达载体,该载体的构建为后期建立稳定表达ADAM9细胞模型,并稳定表达ADAM9蛋白,为进行ADAM9功能研究提供可能。  相似文献
6.
目的:筛选与不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion, URSA)相关的微小RNA(miRNA),探讨其在URSA发生中的作用及其可能机制。方法:通过对URSA绒毛组织进行miRNAs测序,初步筛选差异表达的miRNAs;利用实时荧光定量PCR,验证筛选所得miRNAs表达水平;利用DAVID软件对靶基因进行Pathway分析;利用实时荧光定量PCR,检测p53通路中靶基因及其下游基因的表达水平。结果:let-7f-5p在URSA绒毛组织中表达水平显著上升;let-7f-5p的靶基因富集于p53通路,通路中靶基因MDM-X和其下游靶标促生长基因MDM2水平显著下降,促凋亡基因p53表达水平显著上升。结论:let-7f-5p可能调控p53信号通路中MDM-X/MDM2/p53基因,促进细胞凋亡,最终导致URSA发生发展。  相似文献
7.
目的:了解盐城市盐都区农村居民当前主要慢性病及其主要危险因素流行状况,为制定慢性病防治政策提供科学依据?方法:问卷调查结合现场测量身高?体重?血压等指标?结果:盐城市盐都区18岁及以上农村居民中6种慢性病患病率分别为:高血压16.97%?脑卒中2.20%?糖尿病1.90%?冠心病1.47%?慢性阻塞性肺疾病1.33%?恶性肿瘤1.09%,其中高血压?脑卒中?糖尿病?冠心病患病率性别差异有统计学意义(P值分别为<0.001?0.038?<0.001?0.017)?调查人群每日人均食盐量为9.25 g,嗜盐率32.59%;吸烟者占26.13%,其中男性46.87%,女性7.67%,性别间差异有统计学意义(P < 0.001);饮酒率7.56%,其中男性14.75%,女性1.16%,性别间差异有统计学意义(P < 0.001);日行6 000步标准达到率36.31%,其中男性36.82%?女性35.85%,两者差异无统计学意义(P=0.475);经常锻炼的比例为4.69%,其中男性5.09%,女性4.34%,两者差异无统计学意义(P=0.211);BMI指数分布情况为消瘦人群占3.13%?正常人群占57.21%?超重人群占33.75%和肥胖人群占6.69%;肥胖人群中高血压?脑卒中?糖尿病患病率高于其他人群(P值分别为<0.001?0.029?<0.001),消瘦人群中恶性肿瘤和慢性阻塞性肺病患病率高于其他人群(P值分别为<0.001?0.023)?结论:盐都区农村居民高血压?糖尿病等慢性病患病形势不容乐观,吸烟?饮酒?嗜盐?缺乏运动等危险因素有较高的流行强度,应从戒烟限酒?减盐?控制体重等方面做起,开展社区慢性病综合防控?  相似文献
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