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1.
【目的】观察黄芪甲苷体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为心肌样细胞的作用。【方法】采用密度梯度离心和贴壁培养法分离大鼠MSCs,反复传代及纯化后,取第3代MSCs,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34和CD44;取第8代MSCs进行分组诱导:黄芪甲苷组(终浓度为250 mg/L)、5-氮胞苷(5-aza,终浓度为10μmol/L)、黄芪甲苷加5-aza组(终浓度分别为250 mg/L与10μmol/L),并设空白对照组,诱导后继续培养4周;计算心肌样细胞诱导率,采用免疫组化法鉴定诱导后MSCs中结蛋白(Desmin)和心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法鉴定诱导后MSCs中心肌特异性蛋白α-心肌肌球蛋白重链(-αMHC)和β-心肌肌球蛋白重链(-βMHC)信使核糖核酸(mRNA)的表达。【结果】原代培养的MSCs首先形成集落,传代细胞体积变大,诱导后细胞呈梭形,并出现肌管;MSCs表面抗原CD44表达阳性,而骨髓造血干细胞表面抗原CD34表达阴性,表明本实验方法所得细胞为均一的MSCs细胞群;各组在不同时间的心肌样细胞诱导率无明显差异;免疫组化结果显示诱导后MSCs表达心肌特异性蛋白Desmin和cTnI;RT-PCR结果显示诱导后MSCs表达成熟的心肌特异性蛋白-αMHC和-βMHC。【结论】黄芪甲苷可在体外诱导大鼠MSCs定向分化为心肌样细胞,但诱导率仍有待提高。  相似文献
2.
【目的】观察人参总皂甙(GS)对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。【方法】取成年SD大鼠骨髓细胞,采用密度梯度分离法与贴壁法结合获取MSCs,进行原代培养和克隆培养;采用流式细胞仪检测细胞表面抗原 CD34和CD44以鉴定该法所获细胞是否为MSCs;对传至第8代的MSCs进行分组诱导,分别为GS组(终末浓度为 250 mg/L)、5-氮胞苷(5-aza)组(终末浓度为10μmoL/L)、GS 5-aza组(终末浓度分别为250 mg/L、10μmol/L),每组再分 3个亚组,分别对MSCs进行24、48、72 h诱导,并设空白对照组;采用共聚焦荧光显微镜观察细胞数及阳性细胞数,计算心肌样细胞转化率;采用免疫组化法检测分化的心肌样细胞的特异性蛋白结蛋白(Desmin)和肌钙蛋白(cTnI),采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测诱导前后心肌细胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重链(α-MHC)和β-心肌肌球蛋白重链(β- MHC)的表达。【结果】分离培养后的细胞生长密集,形态呈纺锤状,表面抗原鉴定为CD44表达阳性,表明所获细胞为 MSCs;经GS、5-aza诱导后,MSCs分化成类心肌细胞,3组的心肌样细胞转化率无显著性差异(分别为38%、35%、39%); 免疫组化和RT-PCR检测结果显示Desmin、cTnI和MHC表达均阳性,阳性细胞呈梭形和成纤维细胞样形态,表明MSCs在 GS体外诱导下已向心肌样细胞转化,并具有心肌样细胞的特性。【结论】GS可体外诱导MSCs分化为心肌样细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了实验依据。  相似文献
3.
【目的】观察三七总皂苷(PNS)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和体外诱导其分化为心肌样细胞的作用。【方法】采用骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面标志;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察PNS对MSCs增殖的影响;采用第8代MSCs进行体外心肌细胞诱导分化;采用相差显微镜、免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果鉴定心肌细胞。【结果】大鼠MSCs细胞表面抗原CD44阳性,CD34阴性;经PNS作用后MSCs增长速度比空白对照组明显加快,体外诱导后细胞形态发生变化,其细胞免疫组化鉴定呈结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白(cTnI)阳性;RT-PCR结果显示诱导后细胞转录肌球蛋白重链mRNA水平增加。【结论】PNS能促进大鼠MSCs体外增殖并可诱导MSCs分化为心肌样细胞,这为细胞移植治疗心肌梗死提供了实验依据。  相似文献
4.
养心康对心肌肥大型心力衰竭大鼠血浆ET、CGRP含量的影响   总被引:12,自引:0,他引:12  
目的:探讨心肌肥大型心力衰竭大鼠血浆内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平的变化及养心康(由人参、麦冬、毛 冬青等组成)的作用机理。方法:大鼠皮下注射异丙肾上腺素共13d以制备心肌肥大型心力衰竭模型,采用放射免疫分析法观察各组动物血浆ET、CGRP水平的变化。结果:模型组大鼠血浆ET含量比正常对照组显著升高(P<0.01),CGRP含量则比正常对照组显著降低(P<0.01),而养心康能降低ET(P<0.01)和升高CGRP含量(P<0.01),其大剂量组的疗效接近地高辛。结论:ET、CGRP是参与心力衰竭发病的重要体液因素,二者之间的失衡是心力衰竭发生、发展的重要原因。而养心康的作用机理与纠正失衡的ET/CGRP比值有关。  相似文献
5.
中医药治疗心力衰竭的临床研究进展   总被引:7,自引:0,他引:7  
综述了近5年来中医药治疗心衰的概况,主要从病因病机辨证分型治疗,特殊剂型开发,治法等方面进行了较详细的归纳整理。  相似文献
6.
谈药物临床试验中研究者依从性的管理   总被引:6,自引:0,他引:6  
在药物临床试验中,研究的质量不但与受试者的依从性有关,更与研究者的依从性密切相关.研究者在整个临床试验中处主导地位,所以加强研究者依从性管理已引起越来越广泛的重视,并已成为当代医学界亟待解决的重要课题.就研究者依从性存在的问题、不依从的原因和提高依从性的管理方法等进行了探讨,以期在药物临床试验中,为提高受试者依从性提供理论和实践依据.  相似文献
7.
气虚、气滞在冠心病心血瘀阻证的发病作用研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 探讨在冠心病心血瘀阻证的发病中,气病致瘀的气滞心血瘀阻证和气虚心血瘀阻证的异同。方法 在冠心病心血瘀阻证的患者中分别对气滞心血瘀阻证、气虚心血阻证间的内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-FGF1α)、血液流变学、血小板聚集率、心钠素(ANF)、高频心电图和心功能等指标进行了观测比较。结果 气滞心血瘀阻证。结论 气滞心血阻证病情相对较轻,是冠心病心血瘀阻证的初发阶段,气虚心轿瘀阻证的病情重,是气滞心血瘀阻证的进一步发展。  相似文献
8.
毛冬青甲素对心衰模型兔心功能的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
9.
目的:探讨冠心病心血瘀阻证与纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)基因启动子区4G/5G多态性的关系。方法:把36例冠心病患者分为两组:心血瘀阻证组与非心血瘀阻证组,另外收集16例健康者作为正常对照组。分别测定各组病例的PAI-1启动子区4G/5G基因型,同时测定血浆PAI-1活性、血脂、血糖及凝血功能等指标。结果与结论:心血瘀阻证患者4G/4G基因型(50.00%)高于正常对照组(31.25%)及非心血瘀阻证组(25.00%),提示PAI-1基因4G/4G多态性可能与冠心病心血瘀阻证相关,结论有待于进一步扩大样本量证实。还发现血浆PAI-1活性、纤维蛋白原与PAI-1基因4G/5G多态性相关,提示PAI-1活性升高与纤维蛋白原增高是PAI-1启动子区4G/5G基因型易致冠心病心血瘀阻证的可能机制。  相似文献
10.
目的:探讨保心康(由人参、附子、毛冬青等组成)对心肌肥大型心力衰竭大鼠血管平滑肌环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平的影响及其作用机理。方法:大鼠皮下注射异丙肾上腺素共13d以制备心肌肥大型心力衰竭模型,采用放射免疫分析法观察各组动物血管平滑肌cAMP和cGMP水平的变化,同时对大鼠体重和心、肝、肺分别称重,并对心、肝、肺脏器进行组织形态学观察。结果:模型组大鼠血管平滑肌cAMP、cGMP含量及心脏和肝脏的指数均比正常对照组显著升高(P<0.01)。而中药保心康能明显降低cAMP和cGMP含量及心脏和肝脏的指数(P<0.05或P<0.01)。组织形态学观察显示保心康能改善病理状态下大鼠心、肝脏形态结构。结论:保心康对实验性心肌肥大型心力衰竭有较好的防治作用,其作用机理与cAMP、cGMP的调节有关。  相似文献
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