南京市学龄前儿童视觉运动整合发育测验评估及相关因素分析

目的 对南京市学龄前儿童视觉运动整合能力发育情况进行调查,分析相关影响因素,为学龄前儿童的视觉运动整合临床工作提供参考。方法 2017年3—5月采用分层随机抽样的方法抽取南京市主城区6所幼儿园483名学龄前儿童,调查基本情况并进行视觉-运动整合发育测验评估。结果 1)随着儿童年龄增长,视觉运动整合能力原始得分呈上升趋势;2)各年龄组标准分性别间差异无统计学意义(P>0.05);3)除6岁8月~6岁9月组除外,各年龄组标准分均高于美国常模,差异有统计学意义(P<0.01);4)儿童学习舞蹈、乐器、父母文化水平因素与儿童视觉运动整合能力之间相关系数均在0.11~0.13之间,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 视觉运动整合能力随年龄增长而提高,无性别差异,且与儿童学习舞蹈、乐器、父母文化水平因素存在一定的相关性。     

维生素D缺乏与儿童肥胖

维生素D(VD)缺乏和儿童肥胖已成为两大公共卫生问题。随着人们对VD骨外效应的逐渐认识,VD与儿童肥胖的关系已成为研究热点。近年来大量国内外研究表明VD缺乏与肥胖及其相关代谢性疾病存在相关性;肥胖人群血清VD水平明显低于正常体重人群,且孕期母体VD缺乏与子代体重超重密切相关;对肥胖人群进行VD的补充治疗有助于降低体重指数,但VD与肥胖之间的因果关系仍不明确,且相关机制仍未完全阐明。本文就VD缺乏与儿童肥胖的流行病学特征、两者之间的关系及其可能的相关机制进行阐述。     

注意缺陷障碍动物模型的行为学特征检测

目的：以国外常用的注意缺陷障碍动物模型SHR大鼠为观察对象，观察注意缺陷障碍动物模型的行为学特征。 方法：实验于2003—12／2004-01在南京医科大学动物实验中心完成，清洁级SHR大鼠（注意缺陷障碍组）和WKY大鼠（对照组）各10只，鼠龄4周，均为雄性，体质量70-90g，两组之间差异不显著。利用开场试验观察记录大鼠穿越的格子数、大鼠直立次数、理毛次数，以及粪便数，lat迷宫观察大鼠穿越角落的频数及直立和斜搭在墙上的频率，跳台试验记录每只大鼠受到电击后跳上平台的次数，以此作为学习成绩。24h后重新测试，在铜栅通电的情况下，直接将大鼠置于橡皮台上，记录第1次跳下橡皮台的潜伏期和5min内的错误次数作为记忆的成绩。 结果：10只SHR大鼠和10只WKY大鼠均进入结果分析。①白天及夜晚开场中SHR大鼠穿越格数及直立次数均较对照组WKY大鼠显著增多（白天：72．10&;#177;15．44，37．50&;#177;9．59，29．40&;#177;15．19，10．30&;#177;8．55；夜晚：83．70&;#177;11．78．49．00&;#177;7．94,42．00&;#177;18．12，14．10&;#177;10．45，P〈0．001）。②SHR大鼠在Lat迷宫中30min内，穿越角落频数、直立次数、理毛次数均较对照组WKY大鼠显著增加（128．30&;#177;29．38，151．90&;#177;46．51，14．00&;#177;5．03；46．10&;#177;22．97，36．00&;#177;26．31，7．90&;#177;4．12，P〈0．001或P〈0．05）；将其分为0～10min。10—20min、20～30min3个时间段来分析，发现随着时间的延续，SHR和WKY大鼠穿越角落频数逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠穿越角落频数仍较对照组WKY大鼠显著增加（63．80&;#177;15．5，36．10&;#177;13．34，28．40&;#177;8．34：26．40&;#177;11．01，13．30&;#177;12．18，6．40&;#177;4．97，t=6．13，3．99，7．15，P均〈0．01）。SHR和WKY大鼠直立次数随着时间的延续也逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠直立次数仍较对照组WKY大鼠多（67．30&;#177;20．49，46．60&;#177;21．58．38．00&;#177;14．31；18．80&;#177;12．04，11．60&;#177;12．21，5．60&;#177;4．38，t或t’=6．41，4．46。6．85，P均〈0．01）。③跳台实验结果显示，SHR和WKY的学习能力差异无显著性，记忆测试时SHR大鼠的潜伏期与WKY大鼠也未见显著差别，但SHR大鼠的错误次数显著高于WKY大鼠（1．42&;#177;1．00．0．56&;#177;0．73．t=2．19。P〈0．05）。 结论：利用开场实验、Lat迷宫及跳台实验等多方法结合，可以简单有效的从多动、注意障碍、学习记忆等方面对注意缺陷障碍模型进行行为学检测。     

神经肽Y2受体促进大鼠学习记忆的机制

目的:观察双侧海马插管注射神经肽Y2受体的反义寡核苷酸对大鼠海马c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响,探讨Y2受体在学习记忆中可能的作用机制。方法:双侧海马插管注射Y2受体的反义、错义寡核苷酸或生理盐水,应用RT-PCR和免疫组化方法检测大鼠海马中c-fos基因在跳台法训练后的表达水平变化。结果:①反义组大鼠海马c-fos基因mRNA表达水平23.40±8.87明显低于生理盐水组60.38±15.52和错义组53.14±11.71,差异有显著性意义(F=22.54,P<0.001)。但错义组与生理盐水组之间大鼠海马c-fos基因的mRNA表达水平差异无显著性意义,(P>0.05)。②反义组大鼠海马c-Fos蛋白阳性细胞数在海马CA1,CA3和齿状回分别为16.33±6.18,27.00±9.72和109.67±23.44,均低于生理盐水组和错义组,而错义组与生理盐水组之间c-Fos蛋白表达水平差异无显著性意义。结论:神经肽Y2受体可能是通过调节c-fos基因的表达参与大鼠的记忆形成过程。     

NYGGF4(PID1)基因过表达对脂肪细胞线粒体代谢的影响

【目的】 观察NYGGF4(PID1)基因过表达对脂肪细胞线粒体代谢的影响。 【方法】 以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,体外培养稳定转染NYGGF4(PID1)基因(NYGGF4-pcDNA3.1 (+)/myc-His B)的3T3-L1前体脂肪细胞,以转染空载体[pcDNA3.1(+)/myc-His B]的3T3-L1前体脂肪细胞为对照,经1-甲基-3异丁基黄嘌呤(MIX)加地塞米松、胰岛素方案诱导分化为成熟脂肪细胞,采用Real-time PCR检测线粒体代谢酶指标:己糖激酶(Hexokinase,HKI)、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA,ACC)、柠檬酸合成酶( citrate synthase,CS)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(Carnitine palmitoyl-transferase 1,CPT1)、细胞色素C(Cytochrome c,Cyc-c)基因表达水平。 【结果】 NYGGF4(PID1)过表达显著降低3T3-L1脂肪细胞己糖激酶、乙酰辅酶A羧化酶、柠檬酸合成酶、肉毒碱棕榈酰转移酶1、细胞色素C基因表达水平,差异有统计学意义。 【结论】 NYGGF4(PID1)基因过表达,下调3T3-L1脂肪细胞中定位于线粒体的代谢关键酶,提示NYGGF4(PID1)基因过表达能影响3T3-L1脂肪细胞的线粒体代谢。     

MMP-9及TIMP-1在支气管哮喘发病中作用及雷公藤多甙干预研究

目的观察支气管哮喘（简称哮喘）大鼠肺组织中细胞外基质（ECM）代谢相关因子基质金属蛋白酶9（MMP-9）及其抑制剂组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）的表达，研究雷公藤多甙在哮喘肺组织ECM重塑中可能的作用及其机制。方法建立大鼠哮喘模型，采用逆转录-聚合酶链反应技术（RT-PCR）测定肺组织中MMP-9、TIMP-1mRNA的表达。结果哮喘组MMP-9、TIMP-1在肺组织中的蛋白表达明显高于对照组（P〈0．01），应用药物雷公藤多甙干预后，MMP-9、TIMP-1蛋白表达明显低于哮喘组（P〈0．05）。哮喘组MMP-9、TIMP-1在肺组织的mRNA表达也高于对照组（P〈0．01），应用雷公藤多甙药物干预后，MMP-9、TIMP．1在肺组织的mRNA表达明显低于哮喘组（P〈0．01）。哮喘组肺组织中MMP-9／TIMP-1〉1，明显高于对照组（P〈0．05），应用药物雷公藤多甙干预后，MMP-9／TIMP．1〈1，明显低于对照组（P〈0．05）和哮喘组（P〈0．01）。结论雷公藤多甙可能下调MMP-9的表达，调节MMP-9／TIMP-1的平衡，干预细胞外基质重塑。     

新生儿经皮小时胆红素百分位曲线预测新生儿高胆红素血症价值的系统评价

目的 对不同国家新生儿经皮小时胆红素百分位曲线预测新生儿高胆红素血症价值的文献进行系统评价,为新生儿高胆红素血症的诊治提供依据。方法检索Cochrane 图书馆、PubMed、OVID、Springer数据库、中国期刊全文数据库、维普数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库,检索时间均从1990年1月至2011年3月。由2名系统评价员进行资料提取和质量评价。结果 10项研究进入分析,偏倚评价为B级6项、C级4项。不同国家制备的新生儿小时胆红素百分位曲线值有一定的差异,印度的小时胆红素百分位曲线值最高,希腊、以色列、中国次之,美国最低。在高度危险区（P95）,胆红素上升速度在生后24 h内最快;中度（P75）和低度（P40或P50）危险区,生后36 h内胆红素上升速度最快,其中印度上升速度最快最高,中国、美国、以色列次之,希腊上升速度最低。新生儿经皮小时胆红素百分位曲线预测高胆红素血症,高度危险区的敏感度为26.9%～75.0%,特异度为89.4%～97.3%;中度危险区的敏感度为78.7%～100.0%,特异度为48.3%～82.3%;低度危险区的敏感度为98.7%～100.0%,特异度为24.4%～56.1%;曲线下面积为0.766～0.990,其中泰国预测的准确性最高,印度、中国次之,美国最低。结论 经皮小时胆红素百分位曲线图预测新生儿高胆红素血症有较高的准确性,具有临床推广应用价值。不同国家经皮小时胆红素百分位曲线有一定的差异,各国应根据本国新生儿小时总胆红素的变化趋势制备各自相对应的曲线图作为新生儿高胆红素血症的干预参考标准。     

NYGGF4基因过表达对成熟脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响

目的 探讨NYGGF4基因过表达对成熟3T3-L1脂肪细胞线粒体形态及动力学的影响.方法 以3T3-L1前体脂肪细胞为载体,建立NYGGF4基因稳定过表达细胞株,以空载质粒转染的细胞为对照,将前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞.采用透射电镜观察成熟脂肪细胞的线粒体形态,采用荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中线粒体融合基因(Mfn)1 mRNA、Mfn2 mRNA、线粒体动态相关基因(Drp)1 mRNA的表达水平.采用Western blot方法检测Mfn1蛋白、Mfn2蛋白、Drp1蛋白的表达水平.结果 1.电镜观察发现NYGGF4基因过表达的成熟脂肪细胞线粒体体积变小、数量明显减少,线粒体嵴断裂、减少、消失,部分线粒体肿胀,甚至呈空泡状;对照组成熟脂肪细胞的线粒体形态基本正常,线粒体嵴清晰可见,线粒体无明显肿胀、皱缩.2.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞Mfn1 mRNA及Mfn1蛋白表达水平均显著高于对照组.3.NYGGF4基因过表达成熟脂肪细胞的Mfn2 mRNA、Drp1 mRNA及相应蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义.结论 在3T3-L1成熟脂肪细胞中,NYGGF4基因过表达可导致线粒体形态发生变化、数量减少,同时上调Mfn1 mRNA和Mfn1蛋白表达水平,提示NYGGF4基因在成熟脂肪细胞中过表达能影响细胞线粒体形态及动力学.     

肿瘤坏死因子-α对人脂肪细胞STEAP4蛋白膜转位的影响及其机制

目的 探讨肿瘤坏死因子-α (TNF-α)对人脂肪细胞STEAP4蛋白膜转位的影响,并分析其可能的机制.方法 应用1-甲基3-异丁基黄嘌呤(MIX)、地塞米松、胰岛素、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化,以人重组TNF-α或加用细胞外信号调节蛋白激酶( ERK)抑制剂PD-98059干预人成熟脂肪细胞24 h,采用Western blot技术检测细胞膜蛋白与总蛋白中STEAP4蛋白的表达.结果TNF-α干预能显著促进人成熟脂肪细胞中STEAP4蛋白向细胞膜转位;ERK抑制剂PD-98059联合TNF-α与单独应用TNF-α诱导人成熟脂肪细胞的细胞膜蛋白和总蛋白中STEAP4蛋白的表达水平比较均无显著差异.结论 TNF-α干预显著促进人成熟脂肪细胞中STEAP4蛋白的膜转位,初步排除丝裂原活化蛋白激酶信号途径参与这一调控机制.     

PCB1254暴露致幼年斑马鱼视动反应异常及感光细胞发育相关基因表达变化

目的:研究受精后暴露PCB1254对斑马鱼幼鱼视动反应及视网膜感光细胞发育相关基因表达的影响。方法:对受精后斑马鱼胚胎进行不同质量浓度的PCB1254(0.125、0.25、0.5、1 mg·L-1)暴露处理,同时设立空白对照和0.01%甲醇对照组。暴露7 d后,观察幼年期斑马鱼视动反应及感光细胞发育相关基因CRX、RHO、SWS1、SWS2表达的变化。结果:(1)当条栅空间频率为0.20线·mm-1,移动速度为25 cm·s-1时,0.5 mg·L-1和1 mg·L-1组的幼鱼视动反应敏感比例明显降低(P<0.05)。(2)各实验浓度组的SWS2基因表达均明显下调(P<0.05),0.5 mg·L-1和1 mg·L-1组的CRX、RHO、SWS1基因表达均明显下调(P<0.05)。结论:0.5 mg·L-1和1 mg·L-1多氯联苯导致幼年期斑马鱼视动反应行为异常及感光细胞发育相关基因表达变化,提示须加强监测和控制环境毒物对儿童眼发育带来的不利影响。