针刺及光照等不同授时因子对金黄地鼠视交叉上核一氧化氮合酶表达的影响

目的：通过观察针刺及光信息等不同授时因子导引对金黄地鼠视交叉上核一氧化氮合酶表达的影响。方法：实验于2002-08／2004-10在成都中医药大学针灸推拿学院和四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室完成。实验动物为健康雄性叙利亚金黄地鼠90只，体质量110～140g，随机分为电针组、光脉冲导引组、8-羟基-丙胺-四氢柰组、捆绑对照组、电针+光脉冲导引组、电针+8-羟基-丙胺-四氢柰组。每组15只。金黄地鼠经驯化后进入自由运行状态，在恒定黑暗第3天于近似昼夜时间9：00，15：00，21：00分别给予电针、光脉冲、8-羟基-丙胺-四氢柰、捆绑、电针+光脉冲导引、电针+8-羟基-丙胺-四氢柰刺激，每个时间点5只动物。各方法治疗2h后用免疫组织化学方法和图像分析技术，检测各组金黄地鼠视交叉上核中一氧化氮合酶的吸光度值，并采用q检验方法进行统计学分析结果：90只金黄地鼠全部进入结果分析。各组各时间点视交叉上核一氧化氮合酶表达情况；在近似昼夜时间15：00光脉冲导引组比捆绑对照组视交叉上核内一氧化氮合酶的表达显著增加（116.600&;#177;8.678，109.600&;#177;8.735,q=54.00,P&;lt;0.05),近似昼夜时间21：00光脉冲导引组且捆绑对照组视交叉上核内一氧化氮合酶的表达显著增加（130.800&;#177;5.762,101.000&;#177;9.407,q=35.80，P&;lt;0．05)；而在近似昼夜时间9：00电针组和电针+8-羟基-丙胺-四氢柰组较捆绑对照组视交叉上核内一氧化氮合酶的表达显著增加(115．833&;#177;9．641，110．667&;#177;0．210，79．833&;#177;17．600，q=36．00，30．83，P&;lt;0．05)。结论：光信息在近似昼夜时间15：00和21：00可以增加视交叉上核的一氧化氮合酶活性，说明光照对一氧化氮的影响只在主观晚上。针刺在近似昼夜时间9：00可以增加视交叉上核内一氧化氮合酶的表达，说明针刺对一氧化氮的影响只在主观白天。     

大鼠下丘脑室旁核对神经免疫调节的基因调控研究

下丘脑室旁核(paraventricular nucleus of hypothalamus,PVN)是神经免疫调节的整合性中枢 ,为了探讨 PVN内肽能神经元对免疫调节的基因调控 ,本研究采用 SD大鼠 10 0只 ,随机分为免疫增强、免疫抑制及其对照组各 2 5只 ,分别用皮下注射牛血清白蛋白 (BSA)或腹腔注射环磷酰胺建立免疫增强和免疫抑制动物模型 ,观察血清 Ig G及 IL - 2动态变化 ,以了解免疫应答过程。在免疫反应开始增强 (E1组 ) /或开始抑制 (I1 组 )及免疫反应达高峰(E2 组 ) /或抑制最低 (I2 组 )时灌注取脑 ,冰冻切片 (30μm ) ,以地高辛标记的 AVPc DNA寡核苷…     

IL-1β(白细胞介素1β)在大鼠外周血中的节律变化研究

研究证实白细胞介素 1β(interleukin- 1β,IL- 1β)在细胞免疫激活、抗肿瘤、减轻机体炎症反应中发挥重要作用。此外 ,还有导致厌食、体温升高、活动能力降低、激活下丘脑 -垂体 -肾上腺轴以及引起一氧化氮合酶含量增加等作用。而有关 IL - 1β在外周血中的节律报道甚少 ,仅 Zabel P等报道过健康人外周血中 IL- 1β具有节律性 ,但对常用作实验动物的大鼠其 IL - 1β在外周血中的节律却未见报道。鉴此 ,本研究就 IL - 1β在大鼠外周血中的节律作初步探讨 ,为进一步了解 IL - 1β的生理及病理学作用提供时间生物学资料。成年健康雄性 S…     

大鼠脾脏的神经支配——荧光金及PRV追踪研究

本实验采用荧光金(FG)神经追踪及假狂犬病毒(PRV)跨神经元追踪方法研究了中枢神经系统与免疫器官之间的直接神经通路联系,为调节网络的深入研究提供形态学基础。成年雄性SD大鼠7只(体重250～300g)分为对照组1只,实验组6只,其中2只脾脏内注射FG10μl,另4只脾脏内注射PRV35～60μl。动物分别存活72h、96h后灌注固定,恒冷箱冰冻切片。注射荧光金大鼠的组织切片用Nikon荧光显微镜观察,注射PRV大鼠的切片用抗PRV血清为一抗的ABC法免疫染色,DAB呈色后观察。结果显示:1所有实验组大鼠脾被膜及实质内均见到被FG或PRV标记的呈患珠状的神…     

复方甲地孕酮微囊注射液对大鼠垂体前叶超微结构的影响

用不同剂量的复方甲地孕酮微囊注射液注射大鼠,观察垂体前叶催乳激素细胞和促性腺激素细胞的超微结构变化,结果在一定剂量下,对催乳激素细胞有促进作用,促性腺激素细胞在0.2ml和0.4ml组出现抑制性改变。各实验组催乳激素细胞的内质网呈现同心圆排列,同心圆数目与对照组相比,差异有高度显著性(P<0.005)。随着剂量增加,出现髓样变结构的细胞增多,其0.4ml组与对照组相比,差异有高度显著性(P<0.005)。     

精氨酸血管加压素 mRNA在不同免疫应答期大鼠下丘脑室旁核的表达变化

目的研究大鼠下丘脑室旁核(PVN)内精氨酸血管加压素(AVP)mRNA的表达与免疫应答反应间的动态关系.方法建立免疫增强及免疫抑制大鼠模型,应用原位杂交组织化学及图像分析技术检测免疫反应不同时期大鼠PVN内AVP mRNA的动态变化.结果①免疫抑制组大鼠PVN单个细胞内AVP mRNA阳性杂交信号的平均面积明显低于免疫增强组及对照组(P＜0.05).②PVN单个细胞内AVP mRNA阳性杂交信号的平均灰度值在免疫反应高峰时显著低于免疫反应开始增强时(P＜0.05),在免疫抑制最低时却明显高于免疫反应开始受抑制时(P＜0.05).③AVP mRNA阳性杂交信号在PVN内所占的总面积在免疫反应高峰时显著大于免疫反应开始增强时和对照组(P＜0.05),在免疫抑制最低时则明显小于免疫反应开始受抑制时(P＜0.05).④AVP mRNA阳性杂交信号在整个PVN内的平均灰度值在免疫反应高峰时明显低于免疫反应开始增强时(P＜0.05),在免疫抑制最低时却明显高于免疫反应开始受抑制时(P＜0.05).结论 PVN内AVP mRNA的含量与免疫应答反应的强度成正比,AVP基因的转录随免疫应答反应的变化而变化.     

针刺对金黄地鼠视交叉上核c-Fos表达的影响

目的观察针刺导引对金黄地鼠视交叉上核内c-Fos表达的影响。方法实验动物为雄性叙利亚金黄地鼠,共30只,随机分为电针组和捆绑对照组,每组15只。金黄地鼠经驯化后进入自由运行状态,在恒定黑暗第3天于近似昼夜时间(CT)9:00,15:00,21:00分别给予电针、捆绑刺激,每个时间点5只动物。各方法治疗2小时后用免疫组织化学方法检测各组金黄地鼠视交叉上核中c-Fos的免疫反应阳性细胞并对此进行计数,采用q检验方法进行统计学分析。结果30只金黄地鼠全部进入结果分析。针刺组与捆绑对照组比较在CT9:00和CT21:00可使视交叉上核内c-Fos表达显著增加(85.50±11.21,42.50±5.32,q=43.00,p<0.01;52.00±2.94,38.50±3.87,q=13.50,p<0.01)。结论针刺在CT9:00及CT21:00可使c-Fos表达增加,说明针刺对c-Fos表达的影响在主观白天及主观夜间的后半期。     

大鼠下丘脑室旁核一氧化氮和外周血白细胞介素1β含量的昼夜节律变化及相关性的探讨

目的:探讨大鼠外周血白细胞介素1β(IL-β)和下丘脑室旁核中的一氧化氮是否具有昼夜节律以及两者的相关性。材料和方法:成年雄性SD大鼠24只随机分为4组,分别在16:00、22:00、4:00和10:00时腹腔注射细菌脂多糖。两小时后,分别麻醉采血及灌注取脑。采用放射免疫分析法测定外周血IL-1β的含量,运用β-NADPH-酶组化和计算机图像分析技术对室旁核中NADPH-d阳性神经元的切面面积和平均灰度值进行分析。结果:1.6:00时组外周血IL-1β含量最高,12:00时组最低,显示出明显的昼夜节律性。2.四组大鼠室旁核内NADPH-d阳性神经元的切面面积12:00时组最大,18:00时组最小,差异有显著性。3.外周血IL-1β含量昼夜节律变化的时相比室旁核一氧化氮产生量昼夜节律变化的时相早6小时。结论:大鼠外周血中IL-1β和室旁核一氧化氮的产生量均有昼夜节律性变化,外周血中IL-1β可能对室旁核一氧化氮的产生有促进作用。     

不同禁水时间老龄大鼠下丘脑大细胞分泌神经元的免疫电镜观察

电镜观察了不同禁水时间老龄大鼠下丘脑视上核和室旁核分泌神经元，即加压素和催产素神经元及胶质细胞的超微结构变化，结果显示，禁水6与12h后，上述两核团中的分泌神经元胞体增大，胞质中粗面内质网（RER）排列紧密且规则，高尔基（Golgi)器的未成熟分泌颗粒及神经分泌颗粒增多，轴突内神经分泌颗粒少见，胶质细胞成份减少，突起回缩；相邻两神经元胞膜直接接触，质膜并列现象及突触增多，而在禁水24h后，神经元胞体内的神经分泌颗粒有减少，轴突中的神经分泌颗粒却增多并聚集成膨大区域，以上结果提示老龄大鼠视上核和室旁核的分泌神经元在禁水时其合成激素的功能是活跃的，而且催产素神经元的结构变化与加压素神经元结构变化是相似的，胶质细胞的结构变化为神经元质膜并列及突触的形式提供了有利条件。