胰腺导管癌中血管生成、细胞增殖指数、DNA倍性检测的临床意义

目的:探讨血管生成、细胞增殖指数、DNA倍性在胰腺导管癌发生、发展中的作用及临床意义。方法:对29例胰腺导管癌和7例慢性胰腺炎患者的石蜡包埋标本作苏木精鄄伊红(HE)染色,CD34、Ki67免疫组织化学染色,镜下计算微血管密度(MVD)及Ki67阳性细胞比例,同时用流式细胞仪(FCM)检测细胞核DNA倍性,计算异倍体出现率及S期比例,并结合临床病理资料对各项指标作相关分析。结果:胰腺导管癌和慢性胰腺炎都有较多的新生血管。MVD值在胰腺导管癌高、中、低分化3组之间差异无显著性。按肿瘤直径分为≤1.5cm、1.6～2.9cm、≥3cm3组,此3组间MVD值、Ki67阳性细胞百分率、DNA异倍体出现率及肿瘤周围有无浸润的差异都非常显著(P<0.01)。肿瘤越大,MVD值、Ki67阳性细胞百分率及DNA异倍体出现率越高。结论:胰腺导管癌的发生、发展伴血管生成和DNA合成增加,联合测定MVD、Ki67阳性细胞百分率、DNA倍型可能为胰腺导管癌临床预后预测提供辅助参考指标。     

AS_2O_3对消化道肿瘤细胞凋亡作用的研究

目的研究AS3O3对10种消化道肿瘤细胞株的致凋亡作用。方法采用形态学观察、流式细胞仪检测及DNA电泳分析。结果发现两株细胞经AS2O3作用后有明显凋亡,三株细胞无凋亡,其余有少量凋亡。结论AS2O3对不同的消化道肿瘤细胞有不同的作用,提示AS2O3对不同细胞的致凋亡作用可能存在不同的机理。     

食管癌、胃癌细胞对氧化砷促凋亡的敏感性与固有活性氧水平有关

目的 探讨食管癌，胃癌细胞的固有活性氧（reactive oxygen species,ROS)水平与细胞对三氧化二砷（As2O3)促凋亡敏感性之间的关系。方法 用小剂量（2μmol/L)As2O3作用于人胃癌细胞和食管癌细胞株各一对（SGC7901、MKN45和EC/CUHK1、EC1867），证实As2O3促凋亡敏感性在SGC7901和MKN45之间及EC/CUHK1和EC1867之间均有差异。然后在不加As2O3的情况下，用活性氧捕获剂双氢罗丹明123（DHR123）卵育细胞（DHR123在细胞内被ROS氧化为发出荧光的罗丹明123），通过流式细胞仪检测细胞内罗丹明123的荧光而测得细胞内固有ROS水平。结果 对As2O3敏感的SGC7901细胞的固有活性氧水平比As2O3不敏感的MKN45细胞高，对As2O3敏感的EC/CUHK1细胞的固有活性氧水平比As2O3不敏感的EC1867细胞高。结论 食管癌，胃癌细胞固有ROS水平的差异与细胞对As2O3诱导凋亡的敏感性差异有关。     

卡介菌多糖核酸对哮喘儿童TH1/TH2细胞平衡的单细胞水平调节研究

辅助性Ｔ淋巴细胞 (ＴＨ 或ＣＤ+ 4 淋巴细胞 )亚群比例失调或功能紊乱是支气管哮喘的一个重要的免疫学特征 ,ＴＨ2型ＣＤ+ 4 淋巴细胞在哮喘发病过程中起重要作用。本研究采用流式细胞术检测卡介菌多糖核酸 (ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＢａｃｉｌｌｅＣａｌｍｅｔｔｅ Ｇｕ啨ｒｉｎ ,ＢＣＧ ＰＳＮ)治疗对哮喘患儿ＴＨ1/ＴＨ2细胞的平衡和转换 ,评价ＢＣＧ ＰＳＮ对支气管哮喘气道炎症的非特异性调节作用。对象和方法1.支气管哮喘患者 2 4例 ,男 18例 ,女 6例 ,年龄 2～ 12(6 7± 1 9)岁 …     

涂片免疫组化法及流式细胞术观察性激素对子宫内膜脱落细胞PCNA的影响

目的 探索反映子宫内膜增殖状态的细胞学检测方法,评价其在激素替代治疗(HRT)时子宫内膜监测中的可行性.方法 对象为正常月经周期妇女(增殖中晚期组10例,分泌中晚期组9例)、绝经期组妇女(13例)、绝经后短期序贯使用17-β雌二醇和安宫黄体酮妇女(HRT组10例).内膜吸管获取宫腔收集液制成细胞悬液,经流式细胞术(FCM)测定增殖细胞核抗原(PCNA),以及制成涂片进行免疫组化染色测定PCNA.比较两种方法所反映的性激素对子宫内膜PCNA的影响与传统的内膜组织免疫组化法所反映的性激素对子宫内膜PCNA的影响是否一致.结果 三种方法显示一致的变化趋势:月经周期增殖中晚期组PCNA指数高于月经周期分泌中晚期组及绝经期组(P＜0.01);月经周期分泌中晚期组PCNA指数最低,与绝经期组接近(P＞0.05);HRT组PCNA指数介于绝经期组和月经周期增殖中晚期组之间.结论 经内膜吸管获取宫腔收集液,用涂片免疫组化法及FCM测定子宫内膜脱落细胞的PCNA,均可反映性激素对子宫内膜增殖状态的影响,在HRT时子宫内膜监测中是可行的.     

P选择素在原发性高血压伴腔隙性脑梗死患者发病机制中的作用

目的观察血小板活化的标志———P-选择素在原发性高血压伴腔隙性脑梗死患者发病机制中的作用。方法利用FITC标记的抗CD42a单抗(鼠IgG1),PE标记的抗CD62P单抗(鼠IgG1),CY标记的抗CD45单抗(鼠IgG1),FITC标记的鼠IgG1同种型对照免疫球蛋白,PE标记的鼠IgG1同种型对照免疫球蛋白,上述单抗分别标记全血中血小板及白细胞的相关抗原;同时利用流式细胞仪,采取全血三色法流式细胞术方法,检测全血血小板上P-选择素阳性表达:全血标本中分别加入3种荧光标记的单克隆抗体FITC-CD42a,PE-62P及CY-CD45,室温避光反应20min,10g/L多聚甲醛固定10min,用PBS洗2次,上机分析。结果原发性高血压伴腔隙性脑梗死患者血小板P-选择素阳性表达犤(23.0±4.0)%犦明显高于原发性高血压无腔隙性脑梗死患者犤(16.9±1.8%)犦及正常人组犤(5.2±0.7)%犦,三者之间相比差异有显著性意义(t=137.4,28.4,P<0.05)。结论P-选择素在原发性高血压伴腔隙性脑梗死发病中起重要作用P-选择素与血管渐进损伤有关。     

氧化砷诱导早幼粒细胞白血病细胞凋亡的体外研究

目的：阐明氧化砷治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的机制。方法：以原代ＡＰＬ细胞为模型，将不同浓度的氧化砷作用于ＡＰＬ细胞，并对其作用机制进行研究。结果：高浓度氧化砷选择性诱导ＡＰＬ细胞凋亡，低浓度氧化砷诱导新鲜ＡＰＬ细胞部分分化。进一步研究发现，不同浓度的氧化砷均能快速调变和降解ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白。结论：氧化砷对ＡＰＬ细胞存在双重效应，即诱导凋亡和部分分化。     

9-顺式-维甲酸联合8-cl-cAMP对人肺癌细胞生长和凋亡的影响

目的:探讨9-顺式-维甲酸(9-cis-RA)联合8-cl-cAMP对H460和H292细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。方法:应用MTT法检测9-cis-RA和8-cl-cAMP分别以及联合对H460和H292细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术分析9-cis-RA和8-cl-cAMP对H460和H292细胞的凋亡诱导作用;应用RT-PCR法检测Fas、FasL基因的表达以及应用比色法测定caspase-3的活性。结果:9-cis-RA明显抑制H460细胞的生长并诱导其凋亡,H292细胞对9-cis-RA不敏感。9-cis-RA联合8-cl-cAMP明显抑制H292细胞生长,且诱导其凋亡。9-cis-RA联合8-cl-cAMP作用后,H460细胞FasmRNA表达水平较单药组提高;H292细胞FasmRNA的表达也有提高,说明二者联合对Fas的转录具有协同作用。在FasmRNA表达水平提高时,caspase-3的活性明显提高,二者具有显著相关性。结论:H460和H292细胞对9-cis-RA的敏感性不同,9-cis-RA联合8-cl-cAMP对H460和H292细胞的生长抑制和凋亡诱导具有协同作用;且Fas参与了...     

老年急腹症的超声诊断及误诊分析

急腹症是老年人的常见病或多见症,临床上病因诊断对不少医生有一定的困难.超声波的应用为老年急腹症的病因诊断和鉴别诊断提供了可靠的依据.现将近几年来我科就诊的老年急腹症患者超声检查结果及误诊原因报告如下:     

人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长和凋亡的影响

目的 研究人参皂甙Rg3在体外对低、中分化胃腺癌细胞株MKN-45和SGC-7901生长及凋亡的影响.方法 取处于对数生长期的MKN-45和SGC-7901细胞,加入不同终浓度(20、30、40、50 μg/mL)的人参皂甙Rg3分别培养24、48 h或24、48和72 h,以不加药细胞作为阴性对照.MTT法检测MKN-45和SGC-7901细胞生长抑制率;流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测SGC-7901细胞凋亡率;流式细胞仪分析SGC-7901细胞周期;透射电子显微镜观察50 μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞的形态学改变.结果 人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901和MKN-45细胞生长抑制率均明显高于对照组(P<0.05),且随药物浓度的增加和作用时间的延长而上升(P<0.05).与对照组比较,人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901细胞凋亡率和G0/G1期细胞百分比均明显上升,且呈浓度和时间依赖性.透射电子显微镜观察50 μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞,可见典型的凋亡细胞结构.结论 人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长具有抑制作用,且呈现一定的时效和量效关系,其机制可能与诱导胃癌细胞凋亡有关.