虎眼万年青多糖对小鼠T细胞及其细胞因子IL-2 mRNA表达的影响

目的：探讨天然产物虎眼万年青多糖（S₃）对T细胞及其细胞因子IL-2 mRNA表达的影响,进一步从细胞和分子水平探讨其免疫调节作用机制,为开发这一天然产物提供理论依据。 方法：利用流式细胞术,检测S₃对T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8阳性细胞百分率的影响,并采用RT-PCR方法检测IL-2 mRNA的表达水平。 结果：各剂量组CD3、CD4阳性细胞百分率均有上升趋势,极高剂量组CD3、CD4与对照组比较差异有显著性（P<0.001）,CD8有下降趋势,各剂量组均能显著提高CD4/CD8阳性细胞百分率（P<0.001）;极高剂量组和高剂量组可明显促进脾细胞中细胞因子IL-2的mRNA表达,使表达量增加（P<0.01,P<0.05）。 结论：S₃具有较强的增强机体多种免疫功能的作用。     

虎眼万年青多糖对小鼠免疫功能的调节作用

目的 :依据虎眼万年青组分中多糖对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 ,筛选并优化出 6 0 %醇浓度中性多糖活性组分S3,进而研究其对体液免疫、细胞免疫及细胞因子变化的影响 ,并从细胞和分子水平探讨其作用的机理。方法 :采用溶血素测定方法 ,测定S3对小鼠脾细胞溶血素抗体的诱导作用 ;采用3H TdR渗入法 ,测定S3对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞的增殖作用 ;采用3H TdR后标记法 ,测定S3对NK细胞细胞毒活性的影响 ;以ELISA法测定S3对小鼠脾细胞IL 2产生的影响 ;利用流式细胞术 ,检测S3对T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4 CD8阳性细胞百分率的影响 ;采用RT PCR方法检测IL 2mRNA的表达水平。结果 :S3高、中剂量组能明显增强小鼠脾细胞溶血素抗体的形成 (P <0 0 5 ) ;各剂量组均能明显增强ConA诱导的淋巴细胞增殖能力 (P <0 0 0 1) ;各剂量组均能增强NK细胞的细胞毒活性并促进IL 2的产生 (P <0 0 0 1,P <0 0 1) ;高、中剂量组CD8阳性细胞百分率明显降低 (P <0 0 0 1) ,各剂量组均能显著地提高CD4 CD8阳性细胞百分率 (P <0 0 0 1) ;高剂量组可明显促进脾细胞中细胞因子IL 2的mRNA表达 ,使表达量增加 (P <0 0 5 )。结论 :S3具有较强的增强机体多种免疫功能的作用 ,可利用开发为一种免疫增强药物。     

四逆汤煎煮过程中乌头类生物碱的溶出和水解平衡

目的 研究四逆汤中乌头类生物碱的溶出平衡和水解平衡。方法 利用电喷雾质谱分析，比较了制附子、四逆汤、四逆汤药渣和含有3种双酯型生物碱的混合对照品体系中的乌头碱类二萜生物碱。结果 在煎煮过程中双酯型生物碱溶解并发生水解反应，而脂类生物碱则难溶于水。乌头碱、中乌头碱、次乌头碱水溶性相近，但是次乌头碱在水中的热稳定性更高，C19二萜骨架上C3取代基(—OH或—H)的变化影响生物碱的稳定性。结论四逆汤中的乌头碱类生物碱的种类及含量由其溶解性和化学稳定性共同决定。     

虎眼万年青和其他3种抗癌中草药的微量元素含量及其溶出特性

目的对虎眼万年青和其他3种抗癌中草药(白花蛇舌草、半枝莲和山豆根)中16种常量和微量元素及溶出率进行比较,为阐明虎眼万年青抗癌作用提供依据。方法采用等离子体原子发射光谱法,辅以原子吸收光谱法和原子荧光光谱法进行有关检测。结果1)虎眼万年青含有多种人体必需的常量和微量元素,特别是Ca、Mg、Fe、Zn含量较高;2)虎眼万年青和其他3种中草药水煎液中Cu/Zn比值比较低;3)4种中草药水煎液中Se含量较低,差异无统计学意义。Ge在4种中草药的原生药或水煎液中的含量均较低。结论虎眼万年青可能通过调节肿瘤患者体内Cu、Zn及Ca等元素的平衡发挥其抗癌、抗炎性反应作用。     

高效液相色谱-电喷雾质谱联用分析红参与五味子配伍机制

目的研究红参与五味子配伍过程中人参皂苷类化合物的变化机制。方法采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术对红参与五味子5种配伍比例水煎液中人参皂苷的变化进行了研究。结果在五味子量较少的条件下,红参与五味子水煎液中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd发生水解。随着五味子量的增加,人参皂苷Ro的量发生减少,而人参微量次级皂苷F2的量显著增加。结论红参与五味子配伍后产生的特殊药效可能与两者配伍过程中人参皂苷F2的量显著增加有关。     

侧柏果实挥发油化学成分的研究

 目的:研究侧柏果实挥发油的化学成分。方法:采用水蒸汽蒸馏法提取侧柏果实挥发油;以气相色语-质谱( GC-MS)联用技术，对化学成分进行分离和鉴定。通过标准图谱对照确定化合物名称。以总离子流图归一化法测定其百分含量。结果:共分离出40多个峰，确证了其中34种成分，其含量占总离子流的92%以上。结论:侧柏果实挥发油的主要化学成分为a-雪松酯。     

高效液相色谱法测定山茱萸与五味子配伍前后马钱苷、没食子酸及五味子醇甲的含量

目的 考察山茱萸与五味子配伍前后两药主要组分的含量变化规律.方法 利用高效液相色谱(HPLC)方法,比较了配伍前后单煎液、合煎液和单煎合并液中两药主要组分马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量变化.结果 在配伍比例较低(≤44)时,五味子促进了山茱萸中马钱苷的溶出.合煎液中的没食子酸、五味子醇甲组分的百分含量随着五味子配伍比例的增大呈线性减小,且均低于单煎液.单煎合并液中这3种组分的含量均高于同比例合煎液.结论 山茱萸五味子配伍对两药主要组分溶出有较大影响,该影响主要在煎煮过程中发生.     

八味地黄汤各药味对附子生物碱影响的电喷雾质谱研究

目的以八味地黄汤为研究对象,考察各药味对附子生物碱的影响规律,揭示附子配伍组方的科学内涵,为科学阐释八味地黄汤配伍规律提供化学依据。方法利用电喷雾质谱技术分别对八味地黄汤,附子加山茱萸、山药、肉桂、丹皮、泽泻、地黄、茯苓共煎液以及次乌头碱加山茱萸、山药共煎液进行系统考察。结果次乌头碱加山药、山茱萸,附子加山药等共煎液中次乌头碱含量较高;八味地黄汤、附子加山茱萸共煎液中次乌头碱含量较低;肉桂、丹皮、泽泻、地黄、茯苓等对附子生物碱的影响不明显。结论八味地黄汤中乌头碱和中乌头碱水解和溶出比较完全,次乌头碱的含量较少,次乌头碱的减少是由于水解以及溶出受到抑制导致。其中山茱萸对制附子起减毒作用,其减毒机制主要是抑制了制附子中次乌头碱的溶出。而山药则能导致附子毒性增加。     

四逆汤中脂类生物碱来源于酯交换反应的研究

目的研究附子中脂类生物碱(脂碱)的溶解性,确定四逆汤中脂碱的来源。方法利用电喷雾离子阱质谱分析比较生附子、四逆汤、煎煮后生附子药渣、生附子与半夏共煎液中的生物碱。结果在四逆汤中检测到少量脂碱,在生附子与半夏共煎液中未检测到脂碱,脂碱成为煎煮过生附子中的主要生物碱。结论脂碱在加热条件下也不溶于水,在四逆汤中检测到的脂碱来源于双酯型生物碱的酯交换反应。     

不同来源西洋参药材及产品皂苷成分评价研究

目的 建立测定不同产地西洋参药材及其产品中10 种皂苷成分含量的方法,比较不同来源西洋参中总皂苷及单体皂苷的含量差异,评价品质优劣。方法 采用高效液相色谱法,色谱条件为Thermo Scientific Syncronis C₁₈ 色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7 μm),流动相为乙腈-水,二元梯度洗脱,体积流量为0.2 mL/min,检测波长为203 nm,柱温为35 ℃。结果 人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rc、Rb₂、Rd、F₁、R₀、F₂、Rk₁ 分别在线性范围内存在良好的线性关系,48 h 内稳定性试验RSD 值均小于5%,平均加样回收率为96%～102%,RSD 值均< 2.21%。结论 该方法准确、快速、灵敏,重复性好,可用于西洋参药材、饮片及相关产品中皂苷的定量分析。不同来源西洋参及其产品中皂苷成分的种类相似,但单体皂苷的含量差异显著,所测样品均不含有人参皂苷Rf,排除掺假。