Indian Hedgehog信号通路在软骨细胞成熟及转分化过程中的调控作用

目的 探究Indian Hedgehog（IHH）信号通路对软骨内成骨过程中软骨细胞成熟以及转分化的影响。方法 取10日龄野生型小鼠的胫骨组织,采用原位杂交和免疫组织化学染色检测生长板区域IHH信号通路相关分子Ihh、Ptch1和Gli1的表达水平。构建肥大软骨细胞特异性Ihh基因敲除小鼠（Col10a1^Cre/+; Ihh^null/C）,并采用影像学检查和阿利新蓝染色评估该小鼠的骨骼发育状况。构建肥大软骨细胞IHH信号通路持续激活小鼠（Col10a1^Cre/+; R26Smo^M2/M2和 Col10a1^Cre/+; Ptch1^LacZ/C）,采用HE染色、原位杂交和TUNEL染色分别对受精15.5天胎鼠胫骨组织形态结构、Ihh（肥大软骨细胞分子标志物）和Col1a1（成骨细胞分子标志物）以及肥大软骨细胞凋亡水平进行检测;另外应用HE染色对10日龄小鼠的胫骨组织进行组织学分析。结果 肥大软骨细胞合成分泌IHH,但不表达Ptch1和Gli1。抑制肥大软骨细胞合成IHH蛋白会导致出生后小鼠出现侏儒症;X线检查结果显示小鼠出现严重的骨骼发育不良,包括胸廓狭小、球形头骨以及椎骨发育异常等表现。持续启动IHH信号通路时,胚胎早期软骨细胞成熟分化过程虽未见异常,但是出生后小鼠的骨小梁、骨内膜以及皮质骨等结构均出现一定的异常表现。结论 IHH信号通路虽然不参与肥大软骨细胞的终末分化过程,但在软骨细胞转分化的过程中起到了重要的调控作用。     

大气压冷等离子体对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:探讨大气压冷等离子体（CAP）对人肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:将处于对数生长期的人神经胶质瘤细胞（U87）和宫颈癌细胞（Hela）接种于培养板或培养皿中，待细胞贴壁生长后，将其随机分为正常对照（control）组、氦气（He）组和CAP不同时间处理组，细胞在接受不同时间CAP处理后，采用CCK-8方法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白caspase3和氧化应激相关蛋白Nrf2的表达水平。结果:He处理对U87和Hela细胞的增殖能力和自发凋亡无明显影响，CAP处理后两种肿瘤细胞的细胞活力均显著降低，凋亡水平明显上升，caspase3蛋白和Nrf2蛋白的表达显著增加，CAP处理时间越长，效应越明显。结论:本实验条件下的CAP处理可抑制人肿瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡，其机制可能与CAP导致的氧化应激有关。