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1.
[目的]制备抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因,为基因治疗重症肌无力奠定基础.[方法]构建含有抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因的重组原核表达载体pHEN 2-单链抗体A 7,将其转化至大肠杆菌HB 2151中,以异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)为诱导剂,在外周质中进行表达,以硼酸钠裂解细菌细胞壁,制备含有单链抗体的裂解液,应用鼠抗c-myc单克隆抗体的斑点杂交试验检测表达的单链抗体A 7基因.[结果]在大肠杆菌的外周质中可见单链抗体A 7基因表达,培养上清液中未见单链抗体A 7基因表达.[结论]抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因在原核细胞成功表达.  相似文献   
2.
目的:探讨M型磷脂酶A2受体( M-type phospholipase A2 receptor, PLA2R)与Nephrin在特发性膜性肾病(idiopath-ic membranous nephropathy, IMN)发病中的作用及对预后的影响。方法采用免疫组化EliVision法检测IMN及正常对照组中PLA2R及Nephrin的表达,应用Image Pro-Plus软件半定量分析并判断其对预后的影响。结果 IMN 组织中Nephrin表达较对照组明显减低(P<0.01),而PLA2R表达升高(P<0.05),IMN中PLA2R与Nephrin表达量呈负相关(P<0.01),Nephrin表达与24 h尿蛋白定量呈负相关(P<0.01),PLA2R的表达量与尿蛋白定量无相关性。各预后组PLA2R及Nephrin相对表达量差异无统计学意义。结论PLA2R、Nephrin均表达于IMN肾小球毛细血管袢,二者表达量呈负相关。二者表达与患者预后无明显相关性,但存在PLA2R表达越高,患者完全缓解率越高的趋势。  相似文献   
3.
目的:制备抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,提高scFv637的稳定性。方法:用PCR扩增人HSA基因,并克隆到含有抗人乙酰胆碱受体scFv637基因的载体pHEN2中构建重组载体pHEN2-scFv637-HSA。以重组载体转化E.coliHB2151,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE和Westernblot鉴定其融合蛋白的相对分子质量(Mr)。结果:琼脂糖凝胶电泳显示,扩增的人HSA基因和融合基因的大小分别为1770bp和7054bp。构建的scFv637-HSA经测序证实核苷酸序列正确,并且正确克隆至载体的开放读码框架内。表达产物仅存在于pHEN2-scFv637-HSA转化的E.coliHB2151外周质裂解液中。表达的融合蛋白的Mr约为95900。结论:在E.coli中成功地表达scFv637-HSA融合蛋白,为进一步对其进行功能研究和应用奠定了基础。  相似文献   
4.
陈丽明  齐栋  初晓霞 《山东医药》2008,48(25):44-45
测定尿毒症患者的血小板聚集功能及血小板参数[血小板数(PET)、平均血小板体积(MPV)及血小板分布宽度(PDW)],并与正常对照组进行比较.结果与对照组比较,大多数尿毒症患者血小板聚集功能降低(P<0.01),PLT、MPV及PDW减少(P均<0.05).提示尿毒症患者存在血小板功能障碍及血小板参数异常,可为其病情监测、疗效判定提供一定的参考价值.  相似文献   
5.
目的 通过观察维持性血液透析(MHD)患者血浆完整甲状旁腺激素(wPTH)与慢性肾脏病矿物质和骨异常(CKD-MBD)及营养不良炎症评分(MIS)的相关性,研究当35 pg/mL150 pg/mL)124例。比较两组患者CKD-MBD临床表现、临床指标及MIS等指标。结果 与B组比较,A组患者的血浆CREA、UREA、P、Ca×P、PALB水平偏低;MIS评分偏高;平均年龄较高;平均透析龄偏低;骨痛、皮肤瘙痒、不宁腿综合征等并发症发生率较低;wPTH/iPTH比值偏高,两组指标差别均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。A组患者的wPTH和iPTH与ALP均无相关性(P>0.05),B组患者的wPTH和iPTH与ALP均为正相关(P<0.05),且B组患者wPTH与ALP相关性高于iPTH与ALP相关性。...  相似文献   
6.
目的:检测不同类型膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾组织PLA2R、Nephrin及血清anti-PLA2R的表达量,判断它们之间是否存在相关性及其意义。方法:收集MN患者37例为实验组,包括特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者23例、HBV相关性MN(HBV-MN)患者8例、V型狼疮性肾炎(stage V lupus nephritis,LN-V)患者6例,选取10例肾肿瘤行一侧肾切术患者为对照组。应用免疫组织化学法检测各组肾组织中PLA2R及Nephrin的表达,通过专业图像处理软件对其表达进行半定量分析,并应用ELISA检测各组血清anti-PLA2R的表达量。结果:1)各实验组及对照组均可见PLA2R及Nephrin沿肾小球毛细血管袢沉积。IMN组PLA2R较其余各组表达量明显升高,差异有统计学意义,而剩余三组比较无统计学差异。各组Nephrin相对表达量,对照组>LN-V>HBV-MN>IMN,差异有统计学意义;2)IMN组肾组织Nephrin相对表达量同肾组织PLA2R及血清anti-PLA2R浓度间均负相关,肾组织PLA2R相对表达量同血清anti-PLA2R浓度呈正相关;3)IMN组中血清anti-PLA2R阳性者其肾组织PLA2R均表达升高。结论:IMN患者肾组织中PLA2R的表达较继发性膜性肾病(secondary membranous nephropathy,SMN)及正常对照组高,IMN组中血清anti-PL A2R阳性者其肾组织PL A2R均表达升高,临床上可联合二者共同鉴别MN是否原发,结合肾组织中Nephrin的检测,可增强其敏感性。PLA2R同足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin于IMN患者肾组织表达量呈负相关,为IMN的发病机制的研究提供进一步支持。  相似文献   
7.
目的测定肾病综合征患者血清脂联素水平,分析其与白蛋白、血脂及尿蛋白的关系。方法肾病综合征无并发症患者20例(A组),肾病综合征并发血栓、栓塞组(B组)及正常对照组20例(C组),用ELISA方法测定脂联素,同时测定肾功、白蛋白、血脂、尿蛋白。结果①A组血清脂联素水平明显高于C组,而B组明显低于A组,差异有统计学意义(P〈0.05)。②脂联素水平与白蛋自呈负相关,与尿蛋白、血清胆固醇呈正相关。结论肾病综合征患者血清脂联素水平显著高于正常人,并与尿蛋白量正相关,并发血栓、栓塞后明显下降。  相似文献   
8.
目的:评价贝那普利联合丹参多酚酸盐对链脲佐菌素(STZ)致大鼠糖尿病肾病的肾脏保护作用。方法:SD大鼠32只,分为正常组(A组)、糖尿病模型组(B组)、贝那普利组(C组)、贝那普利联合丹参多酚酸盐组(D组)。B组及C组、D组大鼠单次腹腔注射STZ,制备大鼠糖尿病模型;A组注射等量生理盐水。血糖稳定1周后C组给予贝那普利(10 mg/kg,ig),D组给予贝那普利(10 mg/kg,ig)联合丹参多酚酸盐(18 mg/kg,静脉注射)。给药3个月后处理。结果:比较大鼠血肌酐、肌酐清除率、肾组织乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶等生化指标,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。光镜下观察肾脏病理形态的改变,联合治疗比单用贝那普利效果更好。结论:贝那普利联合丹参多酚酸盐组对糖尿病肾病大鼠肾脏具有更好的保护作用。  相似文献   
9.
糖尿病肾病是糖尿病患者最常见的慢性并发症之一,也是导致终末期肾衰竭的重要原因。近年研究发现,作为肾小球滤过屏障结构成分的足细胞在糖尿病肾病发生发展过程中起重要作用。多种因素如糖脂毒性、血管紧张素、糖基化终末产物等可引起足细胞的凋亡,促使糖尿病肾病的发生。  相似文献   
10.
目的:从人免疫球蛋白(Ig)转基因小鼠制备人源性抗乙酰胆碱受体(AChR)单克隆抗体。方法:以电鳐(Torpedo)AChR(tAChR)作为基础免疫原,分别以tAChR或人AChR(hAChR)α亚单位1~210位氨基酸(Hα1-210)与thioredoxin(Trx)融合制备的融合蛋白Trx-Hα1-210作为加强免疫原,注射人Ig转基因小鼠。应用ELISA检查由该小鼠制备的杂交瘤细胞培养上清液中人源性抗tAChR或抗Trz-Hα1-210单克隆抗体的分泌,应用放射免疫测定法(RIA)测定抗tAChR或抗Trx-Hα1-210单克隆抗体与hAChR的交叉反应性。结果:从tAChR作为加强免疫原组小鼠得到433株分泌人源性抗tAChR单克隆抗体的细胞株,从抗Trx-Hα1-210作为加强免疫原组小鼠得到20株分泌人源性抗Trx-Hα1-210单克隆抗体的细胞株。但这些人源性抗体均不能与hAChR起交叉反应。结论:由人Ig转基因小鼠制备人源性抗AChR单克隆抗体是可行的。  相似文献   
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