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1.
目的:设计同时靶向B淋巴细胞表面CD20 和CD19 两个抗原蛋白的双特异嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)并制备BiCAR-T 细胞,检测其对B淋巴细胞肿瘤细胞的杀伤作用以及对免疫缺陷B-NSG 小鼠白血病模型的治疗效果。方法:构建基于鼠源CD19 和人源化CD20 scFv 的双靶点CAR分子,将CAR基因装载于慢病毒载体中,在293T细胞中包装慢病毒,感染健康人T 细胞制备BiCAR-T 细胞。构建表达CD19 和CD20 的K562-CD19-GFP、K562-CD20-GFP 以及表达Luciferase 的Nalm6-Luc-GFP 细胞作为靶细胞,将BiCAR-T 细胞与靶细胞共同孵育,检测其对靶细胞杀伤能力及释放IFN-γ 水平。使用Nalm6-Luc-GFP 细胞构建白血病小鼠模型,尾静脉注射BiCAR-T细胞,通过小动物成像方法观察BiCAR-T细胞对荷瘤小鼠的治疗作用。结果:健康人来源的BiCAR-T 细胞经7 d 培养后扩增良好,扩增倍数为20~50 倍,阳性率为10%~92%,显示成功制备BiCAR-T细胞。在效靶比为10∶1 时,BiCAR-T细胞对Nalm-6、K562-CD19-GFP 和K562-CD20-GFP 的杀伤率显著高于对照组细胞[ (76.7±7.4)% vs(8.7±2.4)%、(93.3±5.2)% vs(46.7±6.2)、(51.0±0.8)vs(30.7±0.5)%,均P<0.01];与对照组相比,与Nalm-6细胞共孵育后BiCAR-T 细胞分泌IFN- γ 量显著增加[(872.7±7.7)vs(101.0±5.3)pg/ml ,P<0.01]。动物实验表明,BiCAR-T细胞对B-NSG小鼠白血病模型治疗效果明显,注射BiCAR-T细胞后白血病细胞逐渐减少,第50 天时基本消失,小鼠全部存活至第70 天被安乐死;PBS和对照T细胞组小鼠分别在(19±3)和(20±1)d 全部死亡。结论:成功设计了表达CD19 和CD20 的双靶点CAR分子后成功制备了BiCAR-T 细胞,该细胞能够有效杀伤表达CD19 和/或CD20 的B淋巴细胞肿瘤细胞,与靶细胞共同孵育后能够分泌大量IFN-γ,对B-NSG免疫缺陷小鼠白血病模型具有明显的治疗效果。 相似文献
2.
苏州科技城医院坐落于苏州高新区太湖之滨,由苏州高新区政府投资新建,是一所集医疗、科研、康复、预防于一体的三级综合性公立医院。医院占地面积140亩,总建筑面积180000m~2,总投资额16亿,设计床位1200张。医院于2013年9月29日奠基,2014年12月28日主体封顶,2016年4月正式投入使用,比预定日期提前了将近1年! 相似文献
3.
目的:研究脑梗死患者失语症临床特点及其相关因素。方法:用汉语失语症检查法检查76例脑梗死失语症患者失语的类型及特点。结果:病灶位于皮质25%,皮质下67%,皮质及皮质下8%。完全性失语10%,运动性失语57%,感觉性失语5%,不完全混合性失语8%,皮层下失语综合征7%。结论:研究脑梗死失语症,除考虑病灶因素外,还要注意分析梗死所致的临床特征及病理生理改变的影响。 相似文献
4.
免疫毒素清除人骨髓中克隆化白血病细胞的研究——Ⅰ.抗CD_7免疫毒素的制备及其细胞毒性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本实验采用优化的方法通过SPDP交联抗CD_7单克隆抗体与蓖麻毒素制成免疫毒素。经MTT方法检测其对表达CD_7抗原的Molt-4及HPB-ALL细胞系均有显著特异性杀伤作用。克隆杀伤实验结果表明,该免疫毒素在10~(-10)mol/L浓度时达3个杀伤log(即清除99.9%的molt-4细胞),而在此浓度时,其只抑制21.6%的粗-单系造血祖细胞生长,从而初步证明其在自体骨髓移植中可用于清除骨髓中残留白血病细胞。 相似文献
5.
目的 探讨Centaur钉板系统在胸腰椎骨折前路减压中的复位、固定效果。方法 本组 4 7例 ,均为胸腰椎骨折前方压迫 ,其中屈曲压缩Ⅲ型 9例 ,暴裂骨折 2 9例 ,骨折脱位 9例 ,采用前路减压、植骨、Centaur钉板系统复位、固定。结果 均获随访 3月以上 ,无术中、术后并发症 ,未见钢板和螺钉断裂及松动现象。骨折椎体固定稳定 ,高度和生理曲度得以恢复。结论 胸腰椎骨折前路减压、植骨 ,采用Centaur钉板系统复位、固定有助于在手法复位的基础上提供更为客观、满意的复位效果 ,达到更为准确地重建脊柱的解剖功能。 相似文献
6.
目的 采用碳离子注入对硅橡胶进行表面改性,得到碳-硅橡胶,评价碳-硅橡胶的机械性能和生物安全性.方法 按照国家标准,采用邵氏硬度计(A型)和电子万能实验机,测量其邵氏硬度、抗拉强度、断裂伸长率以及断裂强度等机械性能参数;采用红细胞溶血实验、全身毒性实验、皮下植入实验、过敏与刺激实验、热源实验对其生物安全性进行评价.结果 邵氏硬度计和电子万能实验机测量结果表明碳离子注入法未改变硅橡胶机械性能;红细胞溶血实验显示材料溶血率小于国家标准,说明材料植入体内后不会引起溶血反应;全身毒性实验的结果表明材料不具有毒性;皮下植入实验结果表明有良好的体内安全性和相容性;刺激实验:刺激率为0;致敏实验:致敏率为0;热源反应中家兔平均体温升高为0.1℃,其不具有致热源作用,初步符合生物医用材料的要求.结论 碳离子注入硅橡胶表面未改变硅橡胶的机械性能,并具有良好的生物安全性. 相似文献
7.
绿脓假单胞菌超广谱β内酰胺酶基因型分布 总被引:30,自引:4,他引:30
目的:检测绿脓假单胞菌(PA)超广谱β内酰胺酶(ESBLs)基因型分布。方法:采集本院2001年3月--12月临床分离PA株,用三维试验法进行表型检测。对表型阳性菌株,用碱裂解法提取质粒,聚合酶链反应(PCR)方法检测质粒的酶基因型别,检测较常见的SHV、PER及OXA-2型,对阳性株进行测序。结果:126株中,43株产ESBLs(34.1%)表型阳性。耐药酶基因型分别为PER-1型有14株,占32.6%;未检出SHV和OXA-2型阳性株。结论:我院产ESBLs的PA临床分离株耐药质粒携带的酶基因主要检出了PER型。 相似文献
8.
目的:通过对正常与退行性变(简称退变)椎间盘组织细胞凋亡的观察,探讨细胞凋亡和凋亡相关基因Bcl-2及Bax蛋白在腰椎间盘退变中的作用。方法:采用原位DNA片段末端标记和免疫组织化学方法,检测开鲁县医院2002-12/2003-12经手术切除的人退变椎间盘12例及正常椎间盘10例组织细胞的凋亡状态及凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达。①凋亡指数判定:以平均100个细胞核中含凋亡细胞个数为凋亡指数。②形态学变化判定:计算阳性细胞百分比。③平均吸光度值测定。结果:①椎间盘髓核细胞凋亡指数:正常组为24.897±3.620,退变组为49.232±3.440。②椎间盘髓核阳性细胞百分比:正常组Bcl-2为(31.440±4.150)%,Bax为(29.372±2.588)%;退变组Bcl-2为(18.239±2.470)%,Bax为(52.349±3.764)%。③椎间盘髓核细胞内免疫反应产物的平均吸光度值:正常组分别为0.183±0.010,0.203±0.012,0.169±0.005;退变组分别为0.152±0.003,0.310±0.008,0.262±0.014。④两组间凋亡指数均值,Bcl-2和Bax蛋白表达均有显著性差异(P<0.05)。结论:在椎间盘退变过程中,椎间盘髓核细胞的减少是通过凋亡的形式实现的,凋亡相关基因Bax表达增高,Bcl-2表达降低。Bcl-2和Bax参与了髓核细胞凋亡的过程并在促进和抑制凋亡的发生中发挥重要作用。 相似文献
9.
目的比较三联检(AFP,HCG,uE3)与二联检(AFP,HCG)在产前筛查中的临床实用价值。方法对用化学发光法进行检查的109例三联检较异常者(接近或达到阳性报警线)同时进行二联检分析,同时用德普公司PRISCA3.5软件评估DS、18—三体、NTD风险值,并将结果进行比较。结果三联检中唐氏综合症(DS)阳性41例,占38.3%,而二联检为31例,占29.0%,两者比较有显著性差异(P<0.05);三联检中18—三体阳性36例,占33.6%,二联检为4例,占3.7%,两者有显著性差异(P<0.01);而神经管缺陷(NTD),两者均为6例,占5.6%。结论在产前胎儿异常筛查中三联检比二联检更具临床实用价值,效用值得参考。 相似文献
10.
Objective To investigate the influence of simvastatin on inflammatory indices in nasal lavage,sputum and blood and clinical index in patients with chronic obstructive pulmonary diseases (COPD). Methods Thirty-seven stable COPD patients were randomly divided into simvastatin-treatment group (n=17),orally given simvastatin tablets for 4 weeks in addition to basic therapy,40 mg,qd) and control group (n=20),given usual med-ication). Total cell counts,percentage of leukocytes (N%) and levels of interleukin IL-8,IL-6 in nasal lavage and sputum at pre-post-treatment were compared;Serum C-reactive protein (CRP),total cholesterol (TC),low-density lipoprotein-cholesterol (LDL-C) as well as IL-8,IL-6 concentrations were measured,the variation of lung function,Sino-Nasal Outcome Test 20(SNOT-20) and St George's Respiratory Questionnaire(SGRQ) score were analyzed. Results After the treatment,the nasal lavage and sputum total cell counts,N%,IL-8 and IL-6 levels[nasal lavage: (0.7±0.3)×107/L,(41.1±10.9)%,(105.8±74.5) ng/L,(3.8±1.6) ng/L;sputum: (0.8±0.3)×109/L,(56.6±9.6) %,(2565.5±831.9) ng/L,(109.8±42.3) ng/L] dropped slightly in the simvastatin group com-pared with that at pretreatment [nasal lavage: (0.8±0.3)×107/L,(43.2±10.8) %,(107.6±86.3) ng/L,(4.1±1.9)ng/L;sputum: (0.8±0.3)×109/L,(58.1±9.3)% ,(2659.4±885.2) ng/L,(111.8±46.6) ng/L] (P>0.05) ;There were significant decreases in serum CRP [(4.3±3.7) mg/L vs (2.6±1.8) mg/L],IL-6 [(4.8±2.0)ng/L vs(4.7±1.9)ng/L] ,TC[(4.2±1.0) mmol/L vs(3.7±0.8)mmol/L] ,LDL-C[(2.4±0.5) mmol/L vs (2.2±0.5)mmol/L] (P>0.05) ;IL-8 concentrations in serum were lower gently[(6.2±1.8) ng/L vs (6.4±1.9) ng/L] (P>0.05). Significant change of simvastatin treatment on SGRQ was only reflected in the symp-tom score [pre-post-treatment:39.6±10. 8 vs 32.3±11.6,P<0.05,respectively],while other observation items (SNOT-20,FEV1%,FEV1/FVC) changed not notably (P>0.05). No marked changes in inflammatory markers and quality of life scores,lung function were observed in control group (P>0.05). Conclusion Simvastatin may be as-sociated with the potential to alleviate systemic inflammation and relieve symptoms in COPD patients. 相似文献