甲型副伤寒杆菌鞭毛蛋白H1a基因原核表达系统构建及其表达产物的免疫原性和保护作用

目的 构建甲型副伤寒杆菌（Salmonella paratyphi A）H1a基因原核表达系统，确定表达产物rH1a免疫原性和保护作用，检测甲型副伤寒杆菌临床菌株H1a基因携带和表达情况。方法 采用高保真PCR从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中扩增H1a基因，T-A克隆后测序，构建H1a基因原核表达系统pET32a-H1a-E．coli B121DE3。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检查rH1a表达情况，Ni-NTA亲和层析法收集rH1a。采用Western blot鉴定其免疫反应性和免疫原性。建立PCR和ELISA检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株H1a基因携带和表达频率。观察rH1a对甲型副伤寒杆菌50001株感染小鼠的免疫保护作用。结果 与报道的相关序列比较，所克隆的H1a基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为99．59％。rH1a表达量为细菌总蛋白的60％左右。甲型副伤寒杆菌全菌抗血清能识别rH1a并与之结合。rH1a免疫家兔可产生抗体。100％（98／98）甲型副伤寒杆菌临床菌株均含有H1a基因并表达H1a。500μg rH1a灌喂或皮下注射免疫小鼠受甲型副伤寒杆菌50001株攻击后的存活率均为50．0％，若加入5μg rLTB，存活率分别上升至75．0％和66．7％。结论 本研究成功地从甲型副伤寒杆菌临床菌株中构建了H1a基因高效原核表达系统。rH1a有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用。甲型副伤寒杆菌临床菌株广泛存在H1a基因并高频率表达。     

1312例癌症患者统计分析

为了解我院癌症病人的患病种类状况,对1991年10月～2001年9月在我院肿瘤防治中心住院治疗的1312例癌症患者进行病种、性别、年龄结构分析,统计报告如下:     

“厚薄”教学理念在病理教学中的应用研究

病理学理论课教学是灌输病理学基础知识的基本手段,是医学教育的关键组成部分,普遍应用LBL教学模式。如何让传统病理学理论教学模式从被动灌输方式转化为主动学习的过程,充分调动教学双方的内在动机,拓展学生的思维能力,这是病理学理论教学研究的重要内容。文章尝试"把书读厚及把书读薄"的教学思想有效应用到病理学教学中,通过引入"思维导图"优化相关教学内容;结合双师型培训机制,灵活做到将病理学"教薄教厚";积极创建网络互动平台,提升学生的动手操作能力,实现把病理学"学薄学厚"。     

心内非接触式标测指导心律失常射频消融的原理及临床应用

目前,对于常见的心动过速如房室折返性心动过速、房室结折返性心动过速等,因其机制明确、发生的部位也较局限,现有的多电极接触式标测技术基本上已能满足需要。但是,这样的标测方式并不适于一些发生于心房或心室的,尤其是非持续的、难诱发的、多源性或血流动力学不稳定的心律失常。对于一个三维的心腔结构,少数几个接触式电极显然难以全面而准确地反映心腔激动的情况,致使标测的操作和X线照射时间往往较长,其定位的精确度也欠佳,患者消融失败率和复发率均较高。     

冠心病与病窦综合征之间关系的探讨

本文应用食道心房调搏测定50例冠心病患者窦房结功能,其结果为:SNRT1223±28.09ms,CSNRT318.2±91.96ms,SACTNarula118.00±28.41ms,SACTstrauss120.52±35.77ms,与正常人数值无明显差异,与16例SSS患者相比,各项指标均有高度显著差异,16例中仅有2例有冠心病表现。19例下壁心肌缺血、心肌梗塞与31例前壁心肌缺血、心肌梗塞患者窦房结功能相比只有SNRT有显著差异(P<0.05),而CSNRT和SACT均无明显差异,可能系植物神经失调所致。本资料说明:冠心病并不是SSS最常见的病因。     

高血压病并靶器官损害动态血压变化观察

高血压病并靶器官损害动态血压变化观察山东省滨州医学院附属医院（２５６６０３）李翠香阮萍尚炳英薛艳为探讨高血压病并心、脑、肾靶器官损害患者动态血压的变化规律及特点，正确地评估高血压患者的病情及预后，指导临床用药和护理，减少心、脑急性事件的发生。本文对１...     

小剂量多巴酚丁胺超声心动图试验判定心肌梗塞后心肌存活性的临床价值

采用小剂量多巴酚丁胺超声心动图试验（ＤＯＳＥ）对３０例急性心肌梗塞伴室壁运动异常患者进行了心肌存活性的研究。结果表明，４７％的患者异常心肌节段呈心肌顿抑；经康复治疗６个月后，心肌运动绝大部分明显改善或恢复正常。认为ＤＯＳＥ是判断急性心肌梗塞患者心肌存活性的一种好方法。     

在综合性大学开设口腔健康教育课程的实践与探讨

在高校开设口腔健康教育课程对全社会的口腔保健意识会产生重大影响。长期以来 ,我国的口腔健康教育都集中在幼儿、中小学生及社区[1 ] ,却忽略了高校学生这一重要群体。本文就在综合性大学开展口腔健康教育的课程设置、教学实践、教学评估等问题进行了探讨。实践与成果1 创建课程　 1 999年 3月暨南大学医学院在国内首创开设公共选修课《口腔卫生保健与疾病防治》 (后改为《口腔疾病防治》) ,每学期 36学时 / 2学分 ,授课对象为非口腔医学专业的高校学生。自开课 4年以来共 8个学期 ,1 2班次 ,约 1 4 0 0多名学生选修该课程。选修的学生覆…     

问号钩端螺旋体属lipL32/1-ompL1/1融合基因的真核表达及其表达产物的免疫反应性

目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)的融合基因lipL32/1-ompL1/1真核表达系统并鉴定表达产物的免疫反应性.方法:采用连接引物PCR构建融合基因lipL32/1-ompL1/1,克隆测序后构建lipL32/1-ompL1/1的毕赤酵母真核表达系统pPIC9K-lipL32/1-ompL1/1-P.pastorisGS115.用MM和MD平板分离His Mut 型菌落,YPD平板筛选出G418高抗性的His Mut 转化子.以酵母裂解酶处理的高拷贝转化子His Mut 克隆裂解产物为模板,5'AOX1和3'AOX1为引物,用PCR检测所构建的毕赤酵母工程菌株染色体DNA中的目的融合基因.在BMMY培养基中用甲醇诱导目的重组蛋白rLipL32/1-rOmpL1/1表达.采用硫酸铵沉淀,Ni-NTA亲和层析提纯培养物上清液中的rLipL32/1-rOmpL1/1.采用SDS-PAGE和Western blot分别检测rLipL32/1-rOmpL1/1的产量及其免疫反应性.结果:获得的lipL32/1-ompL1/1融合基因约为1 794 bp.其核苷酸和氨基酸序列与原始lipL32/1和ompL1/1基因型比较,相似性分别高达99.94%和100%.所构建的真核表达系统可分泌rLipL32/1-rOmpL1/1,SDS-PAGE后位于预期位置处,产量约占上清总蛋白的40%.rLipL32/1和rOmpL1/1兔抗血清均能与表达的rLipL32/1-rOmpL1/1结合.结论:本研究成功地构建了钩体lipL32/1-ompL1/1融合基因高效毕赤酵母真核表达系统,所表达的融合蛋白具有特异的免疫反应性,可作为研制钩体新疫苗的候选抗原.     

逍遥散对雌性兔膝关节软骨组织及性激素水平的影响

目的：探讨逍遥散对雌性兔性激素水平及膝关节软骨组织损伤的影响。方法：40只新西兰兔通过手术方法进行膝关节失稳型造模,1周后随机分为中药组、西药组、混合组和对照组各10只,驱赶行走4周,分别灌药或灌生理盐水8周。造模后12周末处理动物,血清检测雌二醇、睾丸酮含量;HE染色、甲苯胺蓝染色,光镜观察膝关节软骨组织并进行Mankin分级评分。结果：4组动物性激素含量无统计学意义（P〉0.05）;对照组软骨组织中度损伤,中药组、西药组和混合组软骨组织轻度损伤,结果比较有统计学意义。结论：逍遥散可明显减轻兔膝关节软骨组织损伤,对雌性兔性激素水平的影响有待进一步研究。