全基因组低覆盖度测序结合传统细胞遗传学核型分析在罕见遗传病诊断中的应用

目的对1例NT增厚的彩超异常胎儿进行遗传学分析及诊断,探讨多种检测方法的联合应用在遗传病检测中的实际意义。方法采用全基因组低覆盖度测序(WGS)法检测胎儿染色体非整倍体及100kb以上的拷贝数微缺失/微重复,同时用常规G显带法对羊水行胎儿脱落细胞染色体核型分析。结果 WGS显示胎儿4q末端存在34.16Mb的重复合并18q末端存在19.97 Mb的缺失,经结合G显带核型分析最终确定该胎儿核型为46,XN,der(18)t(4;18)(q32.1;q21.3)。结论应用WGS结合染色体G显带核型分析技术,确诊了1例4q部分三体合并18q部分单体衍生的不平衡重排染色体的彩超异常胎儿,证明合理运用细胞遗传学和分子遗传学检测方法有助于对染色体异常的遗传学变异病例进行明确诊断。     

两种手术方法治疗高龄骨质疏松患者股骨转子间骨折临床效果比较

目的：比较人工髋关节置换术与髓内钉内固定术治疗高龄骨质疏松患者股骨转子间骨折的临床效果。方法回顾性分析我院收治的62例合并骨质疏松的高龄股骨转子间骨折患者的临床资料,其中接受人工髋关节置换术20例（置换组）、髓内钉内固定术42例（固定组）,比较两组手术时间、术中出血量、手术切口长度、术后卧床时间、术后（第3及第6个月）视觉模拟疼痛评分（ VAS评分）及髋关节功能St．MicHael评分、术后并发症发生情况。结果置换组手术时间、术后卧床时间均显著短于固定组,手术切口长度大于固定组,P均＜0．05;两组术中出血量无显著差异（P＞0．05）。两组术后第6个月VAS评分、St．MicHael髋关节功能评分均较术后第3个月显著好转（P均＜0．05）;术后第3、6个月置换组VAS评分、St．MicHael 髋关节功能评分均显著低于固定组,P均＜0．05（t值VAS评分为5．046、6．323,St．MicHael髋关节功能评分为5．325、7．410）。住院期间固定组发生肺部感染3例、心衰2例,置换组发生下肢深静脉血栓1例、肺部感染1例,两组发生率比较无显著差异（P＞0．05）。结论与髓内钉内固定术比较,人工髋关节置换术治疗高龄骨质疏松患者股骨转子间骨折能明显缩短手术时间及术后卧床时间、促进术后髋关节功能康复,且安全性高。     

高铁环境对成骨细胞生物活性的影响

目的探讨高铁环境对人成骨细胞(hFOB1.19)活性指标的影响。方法采用细胞贴壁法培养成骨细胞(hFOB1.19)后,将不同浓度枸橼酸铁铵(50、100、200μmol/L)加入细胞培养基,用MTT法检测成骨细胞增生活性;碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性;流式细胞仪检测成骨细胞凋亡情况;Vonkossa染色法行钙结节染色;用RT-PCR和Western blotting分别检测Ⅰ型胶原(COL1)的基因及蛋白表达变化。结果用不同浓度枸橼酸铁铵干预成骨细胞后,与对照组相比,48 h与72 h组成骨细胞增生活性呈剂量依赖性降低,差异有统计学意义(P0.05);48 h组成骨细胞凋亡率呈浓度依赖性升高,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);不同浓度枸橼酸铁铵干预10 d和14 d时各组成骨细胞碱性磷酸酶活性均随枸橼酸铁铵浓度增高而降低,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,枸橼酸铁铵干预17 d后钙结节染色结果显示,矿化面积和钙结节形成随铁离子浓度增加而减少;枸橼酸铁铵干预3 d后呈剂量依赖性下调Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达。结论高铁环境使成骨细胞成骨活性指标均受到抑制。     

116例疱疹性咽峡炎患儿早期血象分析

目的了解疱疹性咽峡炎患儿早期血象变化情况,探讨其辅助临床诊疗的意义。方法对116例疱疹性咽峡炎患儿发病早期采集EDTA-k2抗凝静脉血,使用Sysmex XT-2000i全自动五分类血细胞分析仪进行血常规分析,同时对符合复检要求和医生申请镜检的共76份标本推片作外周血细胞形态学检查,对两种结果进行整体综合分析。结果 116例疱疹性咽峡炎患儿早期血常规结果中,WBC计数高同时中性粒细胞百分率及绝对值高者58例,占50%;WBC计数低同时淋巴细胞百分率及绝对值高者46例,占39.7%。76份血涂片镜检结果中,中性杆状核粒细胞比例>5%者28份,其中在20%-30%范围者3份;异型淋巴细胞比例>2%者32份,其中在5%-10%范围者12份,大于10%者4份。红系和血小板系无显著变化。结论疱疹性咽峡炎主要是由A组柯萨奇病毒引起的,但血常规结果显示早期大约有50%的患者合并细菌感染,血涂片结果显示病毒和细菌感染的双重性。及时检查患者血象可辅助临床医生鉴别诊断疱疹性咽峡炎及感染类型,为临床合理用药提供有力依据。     

铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响

目的了解铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响。方法 34℃条件下体外培养人成骨细胞(hFOB1.19),以不同浓度(50、100、200μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,用RT-PCR检测成骨细胞铁调节基因膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1(DMT1)表达的变化;用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察成骨细胞铁离子荧光强度;流式细胞仪检测成骨细胞活性氧(ROS)水平;碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性;Vonkossa染色法行钙结节染色。结果与对照组相比,FAC干预48h后FPN1mRNA的表达随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性上调,TfR、DMT1mRNA的表达呈剂量依赖性下调(P0.05);FAC干预48h后成骨细胞铁离子荧光强度剂量依赖性减弱,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05);48h后成骨细胞ROS水平随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性升高(P0.05);FAC干预10d后各组成骨细胞碱性磷酸酶活性均随FAC浓度增高而降低,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,FAC干预17d后成骨细胞钙结节染色显示矿化面积和钙结节形成随FAC浓度增加而减少。结论铁过载对成骨细胞生物活性有明显抑制作用,其机制可能与细胞内铁离子浓度增加及活性氧水平升高有关。     

1例伴45,X,-X,t(8;21)(q22;q22),del(9)(q22)M2型急性髓系白血病患儿的早期诊断

目的 通过血常规、外周血涂片及骨髓细胞MICM分型对1例伴45,X,-X,t(8;21)(q22;q22),del(9)(q22) M2型急性髓系白血病患儿进行早期诊断。方法血细胞五分类分析仪检测血常规;外周血涂片经瑞-吉染色后镜检分析血细胞形态;骨髓涂片经瑞-吉染色、过氧化物酶（POX）、酯酶双染色（AS-DNCE、α-NBE）进行细胞形态学诊断;流式细胞仪检测免疫表型;未刺激/24 h培养法、G显带分析染色体核型;FISH技术检测白血病融合基因。结果血常规白细胞计数（WBC）10.9×109·L-1、单核细胞比例（Mon%）29.8%、单核细胞绝对值（Mon#）3.3×109·L-1、血红蛋白（Hb）111g/L、血小板计数（PLT）90×109·L-1;血涂片发现血常规增高的单核细胞中部分为幼稚粒细胞,而非真正的单核细胞,且含有Auer小体;骨髓细胞检查诊断为AML-M2;流式结果符合急性髓系白血病AML-M2免疫表型;染色体核型45,X,-X,t(8;21)(q22;q22),del(9)(q22);融合基因AML1／ETO阳性。结论血常规及外周血细胞Auer小体结合骨髓细胞MICM分型有助于急性髓系白血病的早期诊断。     

促红细胞生成素和甲泼尼龙对损伤星形胶质细胞增殖的影响

目的研究在促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)和甲泼尼龙(Methylprednisolone,MPSS)干预下对损伤星形胶质细胞增殖的影响,探讨EPO和MPSS联合应用在脊髓损伤中的作用。方法取自SD大鼠大脑原代培养星形胶质细胞,缺营养培养3h后分别在促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)和甲泼尼龙(erythropoietin,EPO)的培养基中培养24、48小时后,MTT法检测星形胶质细胞增殖活性的变化。结果缺营养可抑制星形胶质细胞增殖,促红细胞生成素和甲泼尼龙对正常细胞增殖无明显影响作用,EPO和MPSS均促进损伤细胞增殖,两者联合减量应用对细胞增殖有明显影响作用。结论 EPO+MPSS(半量组)联合减量应用对星形胶质细胞增殖作用表达的升高作用优于单独应用甲泼尼龙。     

动态监测降钙素原在糖尿病足合并感染中的临床意义

目的:探讨降钙素原(PCT)在糖尿病足合并感染中监测的临床意义.方法:对50例糖尿病足合并感染患者中34例PCT阳性患者,进行抗生素使用后3d、7d、14d的PCT水平连续监测和数据统计分析.结果:PCT阳性患者首次含量为(12.45±2.91)ng/ml,显著高于PCT阴性病例和健康体检正常人组(P<0.01);在抗生素使用后的3d、7d、14d,PCT值明显下降,阳性率逐次降分别为48.98%、28.57%、10.20%,与入院当天68%比较,差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01、P<0.01).结论:血清PCT水平与患者感染的严重程度、抗生素的及时应用及疾病转归密切相关,动态监测PCT在糖尿病足合并感染病程中的变化,对评估感染病情、指导抗生素使用、判断转归预后具有重要的临床意义.     

铁调素对成骨细胞骨相关基因表达的影响

目的研究铁调素对人成骨细胞(hFOB1.19)Ⅰ型胶原(COL1)、骨保护素(OPG)、骨钙素(BGP)基因表达的影响。方法成骨细胞在34℃下进行体外培养,以不同浓度铁调素(50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L、400 nmol/L)干预72 h后,收集细胞,分别抽取总RNA,采用半定量RT-PCR法检测成骨细胞中COL1、OPG、BGP mRNA表达的变化。结果 RT-PCR检测显示不同浓度铁调素干预后,各组COL1、OPG、BGP mRNA均有表达;不同浓度组的COL1、OPG、BGP mRNA表达光密度比值不同,组间密度比值比较存在统计学意义(P0.05),但铁调素在400 nmol/L时抑制OPG的表达(P0.05)。结论 铁调素可上调成骨细胞(hFOB1.19)COL1、OPG、BGP mRNA表达,铁调素浓度增加转录水平逐渐增加,显示有浓度依赖性。