持续负压封闭引流治疗四肢骨折术后感染的效果

目的探讨持续负压封闭引流（VSD）治疗四肢骨折术后感染的临床疗效。方法收集41例四肢骨折术后感染患者,使用 VSD 治疗技术,使用 VSD 过程中,需根据培养结果使用敏感抗生素,创面彻底清创后使用 VSD,VSD 调整压力为300～500 mm Hg 负压,维护 VSD 管腔通畅,确保创面进行有效负压吸引,5～12 d 后拆除 VSD,观察创面愈合情况,确定是否需要再次行清创、VSD 置入,VSD 使用次数2～13次。结果14例（34％）患者经过 VSD 治疗后创面一期愈合,21例（51％）患者经过 VSD 治疗后再联合植皮、转移皮瓣创面愈合,6例（15％）患者经过 VSD 治疗后,创面缩小明显,肉芽组织新鲜,辅助联合换药后愈合。结论四肢骨折术后感染彻底清创后使用 VSD,可以改善创面血液循环,抑制创面细菌增殖,刺激肉芽组织生长,可直接闭合创面,或为植皮、转移皮瓣提供良好条件,预防感染复发,治疗结果满意。     

结核感染T细胞斑点试验在骨与关节结核诊断中的价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT TB)在临床诊断骨与关节结核的应用价值。方法收集154例疑似骨与关节结核患者外周抗凝血标本,依据细菌学检验、病理学结果及临床表现判定有无结核分枝杆菌感染;其中确诊骨与关节结核73例,非结核感染81例,分别进行T-SPOT TB和结核抗体(TB-Ab)检测,并分析T-SPOT TB在骨与关节结核诊断中的敏感度和特异度。结果 73例确诊骨与关节结核中,64例T-SPOT TB阳性;81例非结核中,72例T-SPOT TB阴性;T-SPOT TB检测敏感度为87.67%(64/73),TB-Ab为41.10%(30/73),T-SPOT TB诊断骨与关节结核的敏感度显著高于TB-Ab(P0.001);T-SPOT TB检测特异度为88.89%(72/81),TB-Ab为71.60%(58/81),T-SPOT TB特异度也高于TB-Ab(P=0.006)。在结核组中,涂阳与涂阴两组T-SPOT TB阳性检出率分别为95.45%(21/22)及86.49%(32/37),差异无统计学意义(P0.05)。在结核组中,病理诊断阳性率92.16%(47/51)与T-SPOT TB总阳性率87.67%(64/73)比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 T-SPOT TB在诊断骨与关节结核中具有良好的敏感度和特异度,具有重要临床应用价值。     

胚胎颅骨骨膜移植修复髋关节软骨大面积缺损

１９９０年５月～１９９４年４月，对４２例（４７个髋）关节软骨全厚缺损患者采用冷冻保存胚胎颅骨骨膜移植进行修复，其中１４例股骨头骨质Ⅳ期坏死者，同时施行带旋髂深血管蒂髂骨植骨。对３４例（３８个髋）进行了２年～６年（平均４０个月）随访。结果表明，按照吴之康髋关节人工置换术后疗效评定标准，优良２５例，很好５例，好３例，尚可１例。认为，与自体移植物修复关节软骨大面积缺损相比，这种方法无附加损伤，具有移植材料、形态与股骨头相似等特点，是治疗髋关节软骨大面积缺损的一种有效方法。     

反转录病毒介导人骨形态发生蛋白2基因修饰骨髓基质细胞的体内成骨效应

目的：构建人骨形态发生蛋白2反转录病毒表达载体，探讨以转人骨形态发生蛋白2基因骨髓基质细胞为种子细胞的组织工程骨修复骨缺损的可行性。方法：实验于2001—05／2003-01在北京大学医学部完成。①采用DNA重组技术，将骨形态发生蛋白2cDNA克隆到pLXSN反转录病毒质粒，经酶切及测序鉴定正确后，包装成为pLXSN／BMP2重组反转录病毒。取15d龄BALB／c系小鼠5只用于骨髓基质细胞的提取。将重组病毒感染小鼠骨髓基质细胞，经筛选后，聚合酶链反应鉴定人骨形态发生蛋白2cDNA在转基因骨髓基质细胞中的整合情况。②转基因骨髓基质细胞的骨形态发生蛋白2表达情况采用免疫印渍杂交和核糖核酸印渍杂交技术检测。转基因骨髓基质细胞碱性磷酸酶的表达采用钙一钴法染色检测，用以评定表达骨形态发生蛋白2的生物活性。③取6周龄BALB／c小鼠6只，将转基因骨髓基质细胞与羟基磷灰石构建人工骨植于小鼠骨骼肌内，体内成骨情况予组织学观察评估。结果：①pLXSN／BMP2质粒的鉴定结果：经酶切及DNA测序证实重组pLXSN／BMP2序列正确。②重组病毒的滴度测定结果：包装的病毒滴度为（6～8）&;#215;10^5cfu／mL。③基因整合及表达的分析：聚合酶链反应证实转基因骨髓基质细胞基因组中有骨形态发生蛋白2cDNA整合；核糖核酸印渍杂交和蛋白免疫印渍杂交证实转基因骨髓基质细胞稳定表达人骨形态发生蛋白2；钙-钴法染色证实转基因骨髓基质细胞碱性磷酸酶阳性。④小鼠体内成骨情况：甲苯胺蓝染色的组织切片镜下观察显示转骨形态发生蛋白2基因骨髓基质细胞构成人工骨可见少量软骨细胞及软骨基质存在，软骨细胞呈巢状分布。结论：成功地构建了pLXSN—BMP2重组反转录病毒载体，该载体不仅有效地表达骨形态发生蛋白2蛋白，表达的骨形态发生蛋白2能够诱导未分化的骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化，且在体内肌肉环境下能促进成骨。     

人过氧化物氧化还原酶-1在胃癌中的表达情况及其临床意义

目的 探讨人过氧化物氧化还原酶-1（PRDX1）在胃癌中的表达情况及其与胃癌临床病理特征和预后之间的关系。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法（Western Blot）检测21例胃癌与相应癌旁组织中PRDX1 mRNA和蛋白的表达水平,并应用免疫组化法检测105例胃癌和癌旁组织中PRDX1蛋白的表达水平,以分析其表达情况与临床病理特征及预后的关系。结果 qRT-PCR和Western Blot检测发现,PRDX1在胃癌组织中的mRNA和蛋白的表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组织化学检测结果表明,PRDX1蛋白水平在胃癌组织中高于癌旁组织,差异有统计学意义（P<0.05）。不同肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况、TNM分期间PRDX1蛋白表达水平差异有统计学意义（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示,PRDX1蛋白的过表达与总生存时间及无病生存时间较短相关。COX多因素分析显示,PRDX1是胃癌独立的预后影响因子。结论 胃癌组织中PRDX1蛋白的表达明显升高,PRDX1蛋白高表达可能促进了胃癌的发生和发展,可能做为胃癌的早期诊断及预后评估的新型生物学指标。     

冷冻保存胎兔颅骨骨膜超微结构观察

通过观察经二步冷冻法保存的胎骨颅骨骨膜超微结构的变化，评价该方法在胎免颅骨保存的作用。将孕龄２６－２８ｄ健康孕兔无菌下剖腹了以出胎兔，锐性切 取胎兔颅骨骨膜，半所得标本分成３份。     

重组人骨形态发生蛋白7腺病毒载体构建及在小鼠成肌细胞中的表达

目的：构建重组人骨形态发生蛋白7的腺病毒载体(AdBMP7)，并观察其在小鼠成肌细胞C2C12细胞中的表达情况。方法：实验于2004—05／10在北京大学医学部完成。RT-PCR方法从HKE293细胞中克隆出hBMP7 cDNA并亚克隆人穿梭质粒pAdtraekcmv中，构建pAdtrackcmv-hBMP7质粒。该质粒和腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183菌中进行同源重组后挑选阳性重组体pAd—hBMP7质粒。线性化pAd-hBMP7质粒转染293A细胞后检测病毒噬斑形成情况，并于转染后9d收获病毒，大量扩增并制备高纯度、高滴度的AdBMP7。将AdBMP7按MOI=100来感染C2C12细胞，48h后分别应用RT-PCR和免疫组化方法来检测hBMP7在mRNA和蛋白水平的表达。结果：成功克隆出hBMP7 cDNA，酶切鉴定pAdtraekcmv-hBMP7和pAd-hBMP7质粒正确重组，获得纯化后滴度达到5&;#215;10^12vp／mL的AdBMP7。AdBMP7能有效感染C2C12细胞并表达hBMP7蛋白。结论：应用AdEasy-1腺病毒载体系统可在短期内制备高滴度的携带GFP和hBMP7的重组腺病毒AdBMP7，并在为进一步研究BMP7基因治疗促进骨愈合打下基础。     

丁丙诺啡联合股神经阻滞对膝关节置换术后快速康复的影响

目的:观察丁丙诺啡联合股神经阻滞,用于首次单侧全膝关节置换术后患者的镇痛效果及术后近期对功能锻炼的影响.方法:选择我科2016年6月至2017年6月全膝关节置换术行股神经阻滞62例,根据股神经阻滞时是否使用丁丙诺啡分为A组(丁丙诺啡+罗哌卡因)和B组(罗哌卡因).比较两组患者术后12、24、36、48、60、72h静息和活动视觉模拟评分(Visual Analogue Score,VAS),术后3d的氨酚羟考酮使用量,术后7d膝关节关节活动度(Range of motion,ROM),以及住院时间的情况.结果:A组患者术后静息状态VAS评分在12、24、36、48h低于B组(P<0.05),在60、72h差异无统计学意义(P>0.05);A组患者术后活动状态VAS评分在12、24、36、48、60、72h低于B组(P<0.05);术后氨酚羟考酮使用量在1、2d,以及总使用量A组小于B组(P<0.05).患者术后7d膝关节活动度A组大于B组(P<0.05);两组患者住院时间差异无统计学意义(P>0.05).结论:使用丁丙诺啡联合股神经阻滞可改善术后短期镇痛效果,减少镇痛药物使用,有利于患者早期功能锻炼和快速康复.     

软组织修复重建在保肢治疗四肢恶性骨肿瘤的应用

目的：探讨切除恶性骨肿瘤后,采用特制人工假体,辅助化疗下行保肢治疗,观察修复软组织和重建功能的可行性。方法：回顾性分析51例恶性骨肿瘤患者的临床资料,骨肿瘤切除后的缺损应用特制人工假体修复,行软组织修复和功能重建。评估标准按照Puri肢体骨骼肿瘤手术治疗重建术,评价保肢术后功能恢复、骨愈合情况及并发症等。结果：51例患者术后均存活,术后功能评估：优27例（52.9％）,良11例（21.6％）,可7例（13.7％）,差6例（11.8％）,优良率达74.5％。超过10个月随访时间49例,均骨性愈合,无骨不连和内固定折断现象。结论：采用特制人工假体对四肢恶性骨肿瘤行保肢治疗,可有效的修复软组织和重建功能,有效的克服了患者因肢体缺失带来的心理障碍,是四肢骨骼系统恶性肿瘤有效的治疗途径。     

人过氧化物氧化还原酶-1在胃癌中的表达情况及其临床意义

目的 探讨人过氧化物氧化还原酶-1（PRDX1）在胃癌中的表达情况及其与胃癌临床病理特征和预后之间的关系。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法（Western Blot）检测21例胃癌与相应癌旁组织中PRDX1 mRNA和蛋白的表达水平，并应用免疫组化法检测105例胃癌和癌旁组织中PRDX1蛋白的表达水平，以分析其表达情况与临床病理特征及预后的关系。结果 qRT-PCR和Western Blot检测发现，PRDX1在胃癌组织中的mRNA和蛋白的表达水平均高于癌旁组织，差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组织化学检测结果表明，PRDX1蛋白水平在胃癌组织中高于癌旁组织，差异有统计学意义（P<0.05）。不同肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况、TNM分期间PRDX1蛋白表达水平差异有统计学意义（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，PRDX1蛋白的过表达与总生存时间及无病生存时间较短相关。COX多因素分析显示，PRDX1是胃癌独立的预后影响因子。结论 胃癌组织中PRDX1蛋白的表达明显升高，PRDX1蛋白高表达可能促进了胃癌的发生和发展，可能做为胃癌的早期诊断及预后评估的新型生物学指标。