G-CSF动员的外周血Vα24+NKT细胞体外扩增及免疫表型

NKT细胞识别由抗原呈递细胞(APC)表面CD1d分子提呈的脂类抗原,人工合成的α-半乳糖酰基鞘胺醇(α-galactosylceramide,α-GalCer,KRN7000)可以激活NKT细胞[1].     

异基因造血干细胞移植治疗再生障碍性贫血16例临床观察

目的评价异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗再生障碍性贫血（AA）的疗效。方法1991至2006年共有12例重型AA（SAA）、4例慢性AA（CAA）患者接受allo-HSCT治疗，回顾性分析植入情况、并发症发生及移植疗效等。结果造血重建14例（87．50％），中性粒细胞绝对值（ANC）≥0．5×10^9／L和BPC≥120×10^9／L中位时间分别为移植后14（11～16）天、14（10～33）天；其中6例患者发生Ⅰ～Ⅱ度急性移植物抗宿主病（aGVHD），2例患者发生慢性局限型GVHD。16例AA患者中未植入死亡1例；移植排斥（GR）3例（18．75％），其中死亡1例、自身造血恢复1例；至随访截止，存活13例（81．25％），中位生存10（0．5～84）个月。结论allo-HSCT是治疗AA的有效方法之一，加强移植前后免疫抑制处理的强度，减少GR、GVHD的发生。     

NKT细胞在异基因造血干细胞移植中作用的临床初步研究

目的：初步观察NKT细胞在临床异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）中的作用。方法：检测15例allo-HSCT患者移植物中NKT细胞含量,研究输注细胞数与移植物抗宿主病（GVHD）发生的关系。结果：15例患者均获造血重建,其中13例患者发生急性GVHD（aGVHD）,包括Ⅰ度8例,Ⅱ度1例,Ⅲ-Ⅳ度4例;8例患者发生慢性GVHD（cGVHD）,其中广泛型2例,局限型6例;7例患者同时出现aGVHD及cGVHD。aGVHD发生组和无aGVHD发生组NKT细胞输注数分别为2.16（0.43-8.82）×10^6/kg、7.71（0.3-15.12）×10^6/kg（P〉0.05）;0-Ⅰ度和Ⅱ-Ⅳ度aGVHD组NKT细胞输注数分别为2.33（0.3-15.12）×10^6/kg、1.99（0.43-8.82）×10^6/kg（P〉0.05）;cGVHD发生组和无cGVHD发生组输注NKT细胞数分别为2.07（0.3-3.05）×10^6/kg、2.99（0.43-15.12）×10^6/kg（P〉0.05）。结论：输注NKT细胞数不影响aGVHD发生、aGVHD严重程度及cGVHD发生。     

无关供者异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征9例患者临床分析

目的探讨无关供者异基因造血干细胞移植(UD-HSCT)治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效和可行性。方法MDS患者9例,其中男性6例,女性3例;年龄7～46岁,中位年龄30岁。其中难治性贫血(RA)1例,难治性血细胞减少伴有多系发育异常(RCMD)2例,难治性贫血伴有原始细胞过多-2(RAEB-2)5例,MDS进展为急性髓系白血病(MDS-AML)1例。接受UD-HSCT治疗的MDS患者中外周血造血干细胞移植(PBSCT)8例,骨髓移植(BMT)1例。供受者HLA高分辨配型10/10位点相合4例、9/10位点相合4例、7/10位点相合1例。预处理方案为BU+CY+Flud+Ara-C+ATG 8例、BU+Mel+Flud+Ara-C+ATG 1例,移植物抗宿主病(GVHD)预防方案为FK506+MTX+MMF 8例、CsA+MTX+MMF 1例。结果9例患者均获得造血重建,中性粒细胞≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L的中位时间分别为移植后15(11～20)d和23(8～32)d。6例患者发生急性GVHD(aGVHD),其中Ⅰ度4例,Ⅱ度2例,5例患者发生局限型慢性GVHD(cGVHD)。中位随访20.3(6.4～50.0)个月,1例患者移植后14个月复发死亡,其余8例患者中位随访27.9(6.4～50.0)个月,均无病存活,总体生存率(OS)及无病生存率(DFS)均为85.7%±13.2%。结论UD-HSCT治疗MDS安全有效,在无同胞全合供者时,无关供者也可以作为此类患者有效治疗选择。     

自体造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤

多发性骨髓瘤是一中老年恶性疾病，常规化疗效果差。大剂量化疗后辅以造血干细胞移植治疗效果较好，其中自体造血干细胞移植应用较多。本文推荐大剂量马法兰200mg/m^2。为预处理方案，未净化的自体外周血干细胞为造血干细胞来源。对移植后维持治疗、二次移植、预后因素等相关问题亦予以简介。     

自然杀伤性T细胞与移植

自然杀伤性T细胞（NKT细胞）是一种免疫调节细胞，同时表达T细胞及部分NK细胞标志。NKT细胞可在α—GalCer刺激下体外大量扩增，呈TH0样细胞因子分泌，激活后可以产生IL-4、IFN-γ等细胞因子，并具有细胞毒性作用。NKT细胞在诱导移植耐受、调节移植物抗宿主病及移植物抗肿瘤效应等方面具有一定作用，应用前景广泛。     

自体造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤

多发性骨髓瘤是一中老年恶性疾病,常规化疗效果差。大剂量化疗后辅以造血干细胞移植治疗效果较好,其中自体造血干细胞移植应用较多。本文推荐大剂量马法兰200mg/m~2为预处理方案,未净化的自体外周血干细胞为造血干细胞来源。对移植后维持治疗、二次移植、预后因素等相关问题亦予以简介。     

无关供者异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征9例患者临床分析

目的 探讨无关供者异基因造血干细胞移植（UD-HSCT）治疗骨髓增生异常综合征（MDS）的疗效和可行性。方法 MDS患者9例,其中男性6例,女性3例;年龄7 ～46岁,中位年龄30岁。其中难治性贫血（RA）1例,难治性血细胞减少伴有多系发育异常（RCMD）2例,难治性贫血伴有原始细胞过多-2（RAEB-2）5例,MDS进展为急性髓系白血病（MDS-AML）1例。接受UD-HSCT治疗的MDS患者中周血干细胞移植（PBSCT）8例,骨髓移植（BMT）1例。供受者HLA高分辨配型10/10位点相合4例、9/10位点相合4例、7/10位点相合1例。预处理方案为BU + CY + Flud + Ara-C + ATG 8例、BU + Mel + Flud + Ara-C + ATG 1例,移植物抗宿主病（GVHD）预防方案为FK506 + MTX + MMF 8例、CsA + MTX + MMF 1例。结果 9例患者均获得造血重建,中性粒细胞≥ 0.5 × 109/L和血小板≥20 × 109/L的中位时间分别为移植后15（11 ～ 20） d和23（8 ～ 32） d。6例患者发生急性GVHD（aGVHD）,其中Ⅰ度4例,Ⅱ度2例,5例患者发生局限型慢性GVHD（cGVHD）。中位随访20.3（6.4 ～ 50）个月,1例患者移植后14个月复发死亡,其余8例患者中位随访27.9（6.4 ～ 50）个月均无病存活,总体生存率（OS）及无病生存率（DFS）均为85.7 % ± 13.2 %。结论 UD-HSCT治疗MDS安全有效,在无同胞全合供者时,无关供者也可以作为此类患者有效治疗选择。     

不同来源人Vα24＋NKT细胞体外扩增及细胞因子分泌

为了研究人脐血（CB）、外周血（PB）及G—CSF动员后外周血采集物单个核细胞（G—PBMNC）中Vα24＋NKT细胞的表型及体外扩增、细胞因子分泌情况,分别取来自CB和PB的单个核细胞（MNC）以及G-PBMNC,在含α-半乳糖酰基鞘胺醇（α-GalCer）及细胞因子IL-2、IL-15的体系中,体外扩增培养Vα24＋NKT细胞;采用间标磁珠分选纯化NKT细胞;流式细胞术（FCM）检测NKT细胞表型、NKT细胞含量;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞因子IL4、IFN-γ浓度。结果表明：由CB或PB或G-PBMNC诱导扩增Vα24＋NKT细胞可分别扩增221．5倍、456．5倍、756．38倍。CB或PB来源的Vα24＋NKT细胞经PMA刺激后,24小时生成IL-4、IFN-γ浓度和IL-4／IFN-γ比率分别为180．33VS190．67ng／ml、864．33vs508．49ng／ml、0．503vs0．455。由G-PBMNC诱导扩增Vα24＋NKT细胞,培养9天及12天时生成IL-4、IFN-γ浓度及IL-4／IFN-γ比率分别为139．08vs89．3ng／ml、14264．8ml、14488ng／ml、0．0531vs0．0376。结论：不同来源MNC在α-GalCer、IL-2、IL-15诱导下可以短期有效扩增Vα24＋NKT细胞,G-PBMNC诱导扩增的效果优于CB和PB。NKT细胞活化后可以分泌大量IL4及IFN-γ,但以IFN-γ为主。