利用Hnf4α敲除的小鼠肝脏类器官探究发育模型的应用潜力

目的 探讨胆管类器官(ICO)分化模型用作肝脏发育模型的应用潜力。方法 结合CRISPR/Cas9基因编辑技术和ICO分化模型,使用分别在扩增培养基、分化培养基及敲除肝细胞核因子4 α(Hnf4α)后在分化培养基培养的类器官的全转录组测序数据分析ICO的转分化过程,使用公共测序数据集分析胎肝发育过程中的分化,并从基因表达的变化趋势、生物学功能,以Hnf4α为例的regulon调控关系这三个方面对两种分化过程进行比较。结果 ICO转分化过程中基因表达的变化趋势与胎肝发育总体一致;转分化过程中表达上调的差异基因主要富集在与肝实质细胞生物学功能密切相关的代谢相关通路;ICO转分化过程中Hnf4α的下游靶基因与胎肝发育部分相似。结论 ICO转分化模型可以部分模拟胎肝发育中的分化过程。     

交锁髓内钉远端锁钉困难的原因分析与对策

目的 分析交锁髓内钉远端锁钉困难的原因,并提出相应的处理方法.方法 分析83例股骨交锁髓内钉内固定术(其中10例为逆行交锁髓内钉内固定术)及75例胫骨交锁髓内钉内固定术,术中均采取标准方式开路、扩髓、复位插钉、安装远端瞄准器及定位杆,常规行远端锁钉交锁.结果 按常规操作方法下出现术中出现锁钉困难45例(股骨交锁钉占28例,胫骨交锁钉占17例,逆行股骨交锁钉未出现锁钉困难),均采取"C"型臂X光机辅助下重新置入定位杆,准确压住髓内钉后,锁钉均取得成功.结论 行髓内钉内固定时应按规范程序操作,避免动作粗暴,出现锁钉困难时应分析其原因,务必使定位杆准确置于髓内钉远端压钉处,应用"C"臂X光辅助,一般可解决远端锁钉困难问题.     

敲除ARID1A对人肝癌细胞系PLC/PRF/5基因表达调控的影响

目的探讨肝癌细胞系PLC/PRF/5中敲除ARID1A后对基因表达调控的影响。方法利用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除PLC/PRF/5细胞中ARID1A。然后分别对PLC/PRF/5 ARID1A野生型与敲除型细胞进行全转录组测序分析(RNA-seq),并用DESeq2鉴定ARID1A敲除后差异表达基因。最后,使用Metascape数据库对差异表达基因进行GO功能富集分析。结果成功构建PLC/PRF/5 ARID1A敲除细胞系。利用RNA-seq共筛选出978个差异表达基因,包括480个表达上调差异基因和498个表达下调差异基因。GO功能富集分析显示差异表达基因主要集中在细胞黏附、激素水平调节、激素代谢和MAP激酶活性调节等生物学过程。结论PLC/PRF/5肝癌细胞中,ARID1A可调控大量基因的表达,为进一步研究ARID1A在肝癌发生发展中的作用机制提供了新的线索。     

新型钌(Ⅱ)配合物抑制人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及其机制

目的研究新型钌(Ⅱ)多吡啶配合物[Ru(dmp)2Nadpip](Cl O4)2(Ru 1)对人骨肉瘤U-2 OS细胞增殖抑制及相关机制。方法 MTS法检测细胞增殖抑制情况,DAPI染色观察细胞吸收Ru1作用部位情况,Hoechst-33258染色观察Ru1作用后细胞核的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期情况。结果 (6.25~100.00)μmol/L的Ru 1均能不同程度抑制骨肉瘤细胞增殖,其24、48、72 h半数抑制浓度(IC50)分别为113.26、45.52、41.00μmol/L,对骨肉瘤细胞增殖抑制作用呈时间-剂量依赖关系。细胞吸收结果显示Ru 1能进入细胞质,聚集并作用于细胞核内。药物处理后的细胞经Hoechst-33258染色,细胞核出现致密浓染,或呈碎块状致密浓染。100.0、50.0、25.0μmol/L Ru 1作用于细胞48 h后的凋亡率分别为(38.51±3.72)%、(21.13±2.03)%、(11.75±2.54)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。流式检测药物作用后的U-2 OS细胞呈现G0/G1期阻滞,并呈时间-剂量依赖效应。结论 Ru 1能抑制U-2 OS细胞增殖,诱导其发生凋亡并呈现G0/G1期阻滞,均与时间、剂量正相关。     

重症手足口病11例临床分析

探讨重病手足口病的临床特点、诊治方法.对28例手足口病患儿其中重症手足口病11例的临床表现、辅助检查、治疗及转归进行作总结分析.     

肝癌细胞系PLC/PRF/5中染色质重塑蛋白ATRX表达的调控作用

目的探讨肝癌细胞中地中海贫血伴精神发育迟滞综合征基因(ATRX)对基因表达的影响及其可能机制。方法利用CRISPR/Cas9技术敲除PLC/PRF/5细胞中的ATRX。全转录组测序技术(RNA-seq)检测ATRX敲除前后的基因表达水平,并用DESeq2软件得出差异表达基因。最后利用转座酶可及性核染色质区域分析技术(ATAC-seq)对差异基因的染色质可及性进行分析。结果分析得到2 754个差异表达基因,其中MUC16和CXCL8均在ATRX缺失后表达显著上调(P0.05),且两基因附近都存在升高的染色质可及性的区域。结论在肝癌细胞中,ATRX调控大量基因的表达,且可能直接参与了MUC16与CXCL8的抑制,为进一步研究ATRX在肝癌发生中的作用提供了新的线索。     

成人骨髓间充质干细胞的体外分离培养与鉴定

目的 对成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)进行体外分离培养与鉴定,研究其生物学特性.方法 将密度梯度离心法获得的单个核细胞,用贴壁培养法分离纯化、扩增获得大量hBMSCs,观察细胞形态,分析细胞生长特性,并经流式细胞仪检测细胞表面抗原、细胞周期,和进行成骨诱导鉴定.结果 经密度梯度离心和贴壁培养法可成功分离纯化、扩增得到大量hBMSCs,其细胞形态、分化特性和表型均符合干细胞特点,在特定培养条件下能向成骨细胞分化.结论 骨髓间充质干细胞分离扩增容易,细胞增殖能力和成骨性能好,是骨组织工程理想的种子细胞.     

西充县疾病监测点（1996-2005年）婴儿死亡情况分析

本文对西充县疾病监测点1996—2005年婴儿死亡情况进行了统计分析，点内1996—2005年共出生婴儿1281人，年出生率为14．08‰，男性663人，女性568人，性比值为1．16：1；死亡21人，婴儿死亡率0．24‰，婴儿死亡以新生儿最多，占婴儿死亡总数的66．67％，新生儿病中又以新生儿先天性疾病死亡最多，占新生儿死亡的42．86％，婴儿死亡占死亡总数的6．46％，为此，提出了降低婴儿死亡率的控制措施。     

伤害控制策略在合并骨盆骨折严重多发伤病人救治中的应用

目的探讨伤害控制性治疗策略在合并骨盆骨折严重多发伤病人的治疗效果.方法对创伤严重度评分(injury severityscore,ISS)大于25分的21例合并骨盆骨折的严重多发伤病人进行伤害控制性治疗,观察围手术期并发症、病死率和随访骨折愈合情况.结果除合并左下肢严重毁损伤病人急诊保肢、右小腿离断病人急诊再植术后出现急性肾功能衰竭的2例外,其余未出现严重并发症,无围手术期死亡病例.全部病例骨折愈合、肢体功能恢复满意.结论对合并骨盆骨折的严重多发伤病人进行伤害控制性治疗,疗效满意.