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目的:利用基因工程技术构建人Wnt10b基因的pEGFP-N1-Wnt10b真核表达载体,观察其在COS-7细胞中的表达。方法:以pUC19-Wnt10b为模板,PCR扩增人Wnt10b基因的cDNA编码区序列,扩增产物和pEGFP-N1载体双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pEGFP-N1-Wnt10b,酶切和测序鉴定该载体;LipofectamineTM2000将该载体转染入COS-7中,Western blot和免疫细胞化学检测COS-7 Wnt10b蛋白表达。结果:PCR扩增出的人Wnt10b基因cDNA正确克隆到pEGFP-N1载体,成功构建了pEGFP-N1-Wnt10b;将其转染入COS-7,COS-7 Wnt10b蛋白表达明显增高。结论:成功构建了人pEGFP-N1-Wnt10b,这为进一步研究Wnt10b基因功能奠定了前期基础。 相似文献
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毛乳头(dermal papilla,DP)细胞衰老能使毛囊失去诱导功能,是雄激素性脱发的主要机制。而Wnt信号通路与DP细胞衰老进程虽密切相关,但具体机制不明确。长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)和非编码单链小RNA(micro RNAs,miRNAs)以各种不同的方式在基因表达的各个水平发挥着重要作用,并已证实在Wnt信号通路也存在这样的调控方式。因此,备受关注的lncRNAs和miRNAs,很可能是通过激活Wnt信号通路而发挥DP细胞的抗衰老作用,最终维持毛囊诱导功能。笔者结合国内外文献,旨在通过对与DP细胞、毛囊再生以及与某些细胞衰老密切相关的lncRNAs/miRNAs和Wnt信号通路调控方式作一总结,以探讨完善脱发的分子机制,并提出可能的药物治疗靶点,从而为DP细胞衰老机制的研究提供新的思路。 相似文献
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目的 观察葡聚糖-荧光素在APA微囊中的扩散方式,对比其在不同直径APA微囊中的扩散速度,确定最佳的人工毛乳头直径;对比最佳直径人工毛乳头的微囊膜与毛乳头基膜的通透性,以进一步评价微囊膜的通透性能. 方法 在共聚焦显微镜下,分别观察分子量10、40、70ku的葡聚糖-荧光素在APA微囊中的扩散速度和扩散方式,对比、分析相同时间、不同直径的APA微囊中葡聚糖-荧光素的强度,结合囊内细胞数量及成囊所需电压等因素,确定最佳的人工毛乳头直径;比较最佳直径人工毛乳头的微囊膜与新鲜分离的毛乳头基膜的通透性. 结果 相同分子量、相同时间内荧光强度的比较:小囊组>中囊组>大囊组,大囊组、小囊组间的差异具有极显著的统计学意义(P<0.01);大囊组与中囊组间的差异具有显著的统计学意义(P<0.05);直径400μm微囊中的荧光强度高于新鲜分离毛乳头中的荧光强度. 结论 直径约400μm人工毛乳头的微囊膜能保证营养物质、代谢产物和信号分子的自由进出,其内部结构适合毛乳头细胞聚集性生长的特性,且其制作过程对细胞的影响较小. 相似文献
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微囊化人头皮毛乳头细胞诱导小鼠耳毛囊再生的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察人头皮毛乳头细胞海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine-alginate,APA)微囊是否具备诱导小鼠耳部毛囊再生的功能;寻找理想的微囊直径。方法 以APA微囊包裹体外分离培养的人头皮毛乳头细胞;将毛乳头细胞微囊移植至小鼠耳部皮下,6周后局部取材行组织学检查;共聚焦显微镜下观察葡聚糖-荧光素在APA微囊中的扩散速度和扩散方式,并对比相同时间、不同直径的APA微囊中葡聚糖-荧光素的强度,综合分析确定最佳的微囊直径。结果 组织学检查显示:移植部位皮下有密集的同心圆状毛囊结构形成,其数量、大小、分化程度等与对照组明显不同。荧光素以同心圆状、逐层渗透的方式向APA微囊中扩散;相同时间内荧光强度比较:小囊组〉中囊组〉大囊组。结论 微囊化毛乳头细胞具备诱导毛囊再生的生理功能;微囊理想的直径是400μm。 相似文献
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吻合小隐静脉的腓肠神经营养血管逆行皮瓣的临床应用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨吻合小隐静脉的腓肠神经营养血管逆行皮瓣转移修复下肢软组织缺损的临床效果。方法7例下肢软组织缺损,应用吻合小隐静脉的腓肠神经营养血管逆行皮瓣修复小腿远1/3胫前、足背、足跟、踝部软组织缺损。皮瓣切取面积8 cm×6 cm~18 cm×10 cm。结果7例皮瓣全部成活,随访6~40个月,平均24个月,皮瓣质地优良,外观及功能满意。结论吻合小隐静脉的腓肠神经营养血管逆行皮瓣切取方便,血供丰富且不牺牲主要动脉,静脉血回流通畅,适合修复小腿远1/3胫前、足背、足跟、踝部软组织缺损。 相似文献
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我科自1996年12月至1998年11月共收治男性易性癖患者3例,效果较好。1临床资料本组3例,均为男性,外生殖器正常,年龄24~25岁,未婚。1例有自残行为,2例有较稳定的同性朋友。3例术前均感精神痛苦,与社会隔离,自我封闭。3例患者术前均具备必须完成的手续:精神病院易性癖诊断;公安部门及父母同意转性的证明;本人要求接受转性手术的申请。2典型病例例1,患者男,24岁,未婚,汉族,理发师,小学文化。8岁起喜欢着女装,说话声调及走路姿势皆模仿女性。15岁时厌恶自己的男性生殖器官,觉得很累赘,18岁后佩戴胸罩,涂脂抹粉,对镜自赏,戴耳环,描眉,抹口红,与同… 相似文献
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