突触黏附分子NECL4对大脑皮质Ca2+-CaMKII-CDC42信号通路的影响

目的探究突触黏附分子NECL4对Ca~(2+)-CaMKII-CDC42信号通路和树突棘数量的影响。方法以Necl4全身性敲除小鼠为研究对象,对8周龄的Necl4野生(WT)及敲除(KO)小鼠脑组织进行高尔基染色,对大脑皮质第Ⅱ/Ⅲ层椎体神经元二级树突上树突棘密度进行统计。通过Western blot和RT-qPCR实验对Ca~(2+)-CaMKII信号通路及其下游信号分子的蛋白和mRNA表达水平进行检测,包括CDC42、Rac1、RhoA、H-Ras、ERK等信号蛋白。结果高尔基染色结果显示,Necl4敲除小鼠大脑皮质第Ⅱ/Ⅲ层椎体神经元二级树突上树突棘数量与野生型小鼠相比减少(P0.01)。Western blot实验结果显示CaMKIIα(P0.05)及phospho-CaMKIIα(Thr286)(P0.05)在Necl4敲除小鼠中表达降低,CaMKIIα的下游信号分子CDC42的mRNA水平(P0.05)和蛋白水平(P0.05)在Necl4敲除小鼠中均表达降低。结论 NECL4通过Ca~(2+)-CaMKII-CDC42信号通路对小鼠大脑皮质树突棘数量进行调控。     

胶质瘤中PTB调控长非编码RNA选择性剪接的筛选

目的探究在神经胶质瘤发生发展过程中PTB调控选择性剪接的长非编码RNA。方法全转录组芯片分析筛选受PTB蛋白介导影响选择性剪接的长非编码RNA。提取胶质瘤和正常细胞系及临床病例组织样品和敲低PTB的神经胶质瘤细胞总RNA,实时荧光定量PCR验证候选基因不同剪接异构体的表达及比值变化。核质分离实验鉴定长非编码RNA细胞定位。结果筛选出16条受PTB蛋白介导影响选择性剪接的长非编码RNA,其中linc00882的不同剪接异构体的表达模式受PTB调控所产生的差异最明显。检测到linc00882定位于细胞质。结论神经胶质瘤中PTB蛋白参与长非编码RNA linc00882的选择性剪接。     

椎体成形术中椎管内骨水泥渗漏对临床疗效的影响

目的探讨椎体成形术中椎管内骨水泥渗漏对临床疗效的影响。方法回顾性分析2009年10月至2011年12月柳州市工人医院收治的260例（337椎）骨质疏松性压缩骨折（OVCF）患者的临床资料,采用经皮穿刺椎体成形术（PVP,238例）或经皮穿刺球囊扩张椎体成形术（PKP,22例）治疗。术后通过X线片和CT检查评估骨水泥渗漏情况,对符合评价标准椎管内骨水泥渗漏占椎管面积百分比等指标进行计算。同时采用视觉模拟评分法（VAS）和Oswestry功能障碍指数（ODI）进行疗效评估,并观察脊髓神经损伤情况。结果 X线片和CT检查显示椎管内渗漏分别为48例（56椎）和84例（93椎）。符合评价标准的椎管内骨水泥渗漏者37例（44椎）,其中T1～T10段和T11～L1段骨水泥渗漏占椎管面积平均百分比分别为（30.8±1.5）%和（28.2±1.1）%。260例（337椎）患者手术前后VAS和ODI比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;37例（44椎）椎管内骨水泥渗漏者术后VAS、ODI与其他患者比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,其中3例（5椎）出现神经根性灼痛、麻木症状,其他均表现为阴性症状。结论椎体成形术中椎管内骨水泥渗漏率较高,但对手术疗效并无明显影响。加强监控、严格掌握手术适应证及良好的手术技巧可减少椎管内骨水泥渗漏的发生。     

miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠衰老中的功能及机制

目的 探讨miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠衰老中的功能及机制。方法 选取4-、8-、12-月龄快速老化倾向小鼠(SAMP8)作为研究对象,并以同月龄快速老化抵制小鼠(SAMR1)为对照,每组3只,取脑,切片进行原位杂交检测miR-9和miR-9*的表达;分别以miR-9和miR-9*的模拟物和抑制物转染N2a细胞,采用流式细胞术检测过表达和敲低miRNA对细胞周期的影响;生物信息学预测miR-9和miR-9*靶基因并进行双荧光素酶报告基因实验验证。结果 miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠海马区的表达低于SAMR1小鼠。敲低miR-9和miR-9*都可以增加N2a细胞G1期细胞在群体中的比例,减少S期细胞在群体中的比例,过表达则相反。生物信息学预测并通过文献筛选miR-9的靶基因有PSEN1、SCN2B、MAP3K3和BACE1,miR-9*的靶基因有CDKn1c。荧光素酶报告基因实验证实miR-9的靶基因是MAP3K3,miR-9*的靶基因是CDKn1c。结论 miR-9和miR-9*可能是分别通过其靶基因MAP3K3和CDKn1c在SAMP8小鼠衰老进程中发挥重要作用。     

RNA结合蛋白作为氯福克酚药靶的机制初探

目的探索氯福克酚靶向RNA结合蛋白的抗胶质瘤机制。方法Biotin pull-down实验检测RNA结合蛋白N-ras上游蛋白(UNR)与靶基因Krüppel样因子13(KLF13)mRNA各片段的结合,以及氯福克酚对UNR与下游靶基因KLF13 mRNA片段结合能力的影响;氯福克酚靶点稳定性的药物亲和反应(DARTS)样品质谱检测结果与转录组芯片分析相结合,筛选其他RNA结合蛋白作用靶点,并对其他下游靶基因进行预测分析。结果氯福克酚可以增强UNR与KLF13 mRNA片段的结合;氯福克酚还可与其他RNA结合蛋白相互作用,参与mTOR信号通路以及由肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)激活的凋亡信号通路。结论氯福克酚可通过作用于RNA结合蛋白而起到抗胶质瘤的效果。     

长链非编码RNA AK046999在小鼠大脑皮质发育中的表达及功能

目的检测长链非编码RNA AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中的表达及作用。方法 1)通过UCSC基因组浏览器获取其基因组座位,利用Coding Potential Calculator工具对其编码能力进行预测;2)原位杂交及免疫荧光技术确定其在大脑皮质发育过程中的表达谱;3)TALEN技术构建AK046999完全敲除小鼠,并且在DNA及RNA水平对其进行敲除鉴定;4)免疫荧光及TUNEL技术对敲除小鼠大脑皮质在发育过程的功能进行检测。结果 1)AK046999可认为是非编码RNA(Coding Potential Score-1);2)AK046999在小鼠大脑皮质发育过程中,前体区相对高表达;3)成功构建了AK046999敲除小鼠;4)与对照相比,AK046999敲除小鼠中表达PAX6、TBR2和NEUROD2的细胞数量无明显改变,并且在这两组小鼠中凋亡细胞的数量无明显改变。结论 AK046999在发育期的小鼠大脑皮质表达,但敲除后不影响小鼠大脑皮质中神经祖细胞的增殖、分化和细胞凋亡过程。     

脊柱结核外科治疗骨缺损的修复

背景：脊柱结核外科干预治疗中如何有效修复破坏之椎体,是脊柱结核治疗中的重点和难点。目的：探讨国内目前脊柱结核病灶清除后骨缺损修复方法、骨缺损修复的有效方法及新进展。方法：CNKI数据库检索2006/2010-01-01五年间相关脊柱结核外科治疗文献,先检索关键词＂脊柱结核＂,再分别以：＂内固定＂,＂植骨＂,＂人工骨（材料）＂,＂钛网＂,＂骨水泥＂,＂人工椎体＂,为关键词在以上数据中检索,根据入选条件,选择相关文献,对其文献报道病例、手术方法（包括骨修复方法）、疗效（包括治愈率、复发率、Cobb角纠正）进行统计分析。结果与结论：自体骨（髂骨、肋骨）是脊柱结核目前骨缺损的主要修复来源,其次是钛网植骨,人工骨及人工椎体少量用于临床治疗。提示,自体骨仍是脊柱结核骨缺损修复的主要来源,是钛网植骨次之,人工骨及人工椎体有广阔的发展空间,成为将来植骨理想替代品。     

微创系统横突间入路治疗极外侧椎间盘突出症11例

目的探讨借助可扩张通道管脊柱微创系统,横突间入路治疗极外侧腰椎间盘突出症的临床疗效。方法所有11例病例采用横突间入路,借助可扩张通道管脊柱微创系统完成神经根的探查、松解和髓核的摘除。结果术后神经根压迫症状和体征改善明显,优良率为91%（10/11）。随访6个月至2年,未见腰椎不稳定表现和神经根损伤等并发症。结论借助可扩张通道管脊柱微创系统,采用横突间入路治疗极外侧椎间盘突出症与常规手术相比临床疗效确切,具有创伤小、不累及椎管、不影响脊柱的稳定性等优势。