宫颈鳞癌脱落细胞人端粒酶逆转录酶mRNA的表达及意义

目的探讨宫颈鳞癌脱落细胞中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达及其在宫颈鳞癌早期诊断中的作用。方法采用实时荧光定量RT-PCR技术,检测人宫颈癌Hela细胞株(细胞组)以及2008年4-10月广东省妇幼保健院经临床和病理证实的31例宫颈鳞癌(病例组)、21例正常或宫颈炎症(对照组)宫颈脱落细胞中hTERT mRNA的表达,以细胞组hTERT mRNA的表达作为定性、定量参照;对病例组及对照组同时采用液基薄层细胞学(TCT)检查。结果 (1)在病例组和对照组宫颈脱落细胞中hTERT mRNA阳性表达率分别为80.6%和9.5%,其相对定量表达水平NhTERT分别为0.4646～13.7823和0.0093～0.0816,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)采用宫颈脱落细胞hTERT mRNA表达进行宫颈鳞癌筛查的灵敏度和特异度分别为80.6%和90.5%。结论宫颈鳞癌患者脱落细胞hTERT mRNA的阳性表达率及表达水平均异常增高,检测宫颈脱落细胞hTERT mRNA的表达,有助于宫颈鳞癌的早期诊断。     

脐血胃动素及促红细胞生成素与中、重度羊水胎粪污染的关系

羊水胎粪污染的发生机制目前尚不清楚,其与围产儿不良结局有关,可致新生儿窒息或胎粪吸入综合征(meconium aspiration syndrome,MAS)[1].目前认为羊水胎粪污染有胎儿生理成熟、官内缺氧及胃动素水平变化等不同学说,多数倾向于"胎儿窘迫理论",而羊水胎粪污染与胎儿宫内是否缺氧的关系存在争论.国外陆续有观点认为胎儿脐血胃动素(motilin,MTL)与胎粪排出有关[2-4].本研究旨在通过对MTL、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)与胎粪排出关系的研究,探讨胃动素水平变化在羊水胎粪污染发生中的作用.     

桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β介导的bEnd.3 细胞PGE2代谢通路的影响

目的:研究桂枝汤及其生物转化模拟产物对白细胞介素-1β(IL-1β)介导的小鼠脑微血管内皮细胞株(bEnd.3)细胞前列腺素E2(PGE2)代谢通路的影响。方法:制备了桂枝汤及桂枝汤生物转化模拟产物的含药血清(分别设五个浓度组),采用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印记法(Western blot),观察桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β刺激的bEnd.3细胞磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶p38(p-p38MAPK)、胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)、分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、环氧合酶2(COX-2)、前列腺素E合成酶(PGES)、15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)以及前列腺素E2(PGE2)分泌及表达的影响。结果:IL-1β作用于细胞10 h后,各项指标均明显上调,与对照组比较,P<0.01。除质量终浓度为2.5%的桂枝汤含药血清对PGES,sPLA2;终浓度为1%的模拟药对PGES;终浓度为2.5%的含药血清对PGES,sPLA2,cPLA2作用不显著外,其他各浓度组与模型组比较均出现显著性差异。结论:桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β刺激bEnd.3细胞合成PGE2的代谢酶系统有不同程度的抑制作用,从而降低了前炎症介质和中枢发热介质PGE2的释放和分泌。结果提示,桂枝汤及其生物转化模拟产物对脑微血管内皮细胞分泌PGE2具有相似的药效,为模拟产物的应用和开发提供了实验支持。     

广州市5757例手足口病肠道病毒与气候因素的相关性

目的探究气候因素对手足口病肠道病毒感染的影响。方法收集2009～2011年广州市的气候及某医院实验室诊断手足口病病例数据,应用单因素相关、多元线性回归检验气候因素与各肠道病毒报告例数之间的关联,并应用亚组分析探索影响的滞后作用。结果单因素分析结果表明周平均气温、湿度和露点与EV71、Cox A16和其他肠道病毒周报告例数存在正相关性,气压成负相关（P〈0.05）。控制其他气候因素后,湿度、气温分别与EV71、Cox A16和其他肠道病毒例数有显著性联系,且亚组分析证实与2～3周后的例数关联最强（P〈0.05）。结论气候因素,尤其湿度、气温可影响手足口病肠道病毒感染,在高热高湿度的季节,预防控制措施更可减少感染手足口病肠道病毒的危险性。     

孕妇巨细胞病毒感染及其母婴垂直传播

目的探讨孕妇巨细胞病毒（HCMV）感染及其母婴垂直传播状况。方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）筛查11859例孕妇HCMV的特异性抗体（IgG及IgM），同时应用荧光定量PCR（FQ-PCR）技术检测其中248例具有活动性HCMV感染孕妇的羊水或胎儿脐血或产后直接抽脐血检测HCMV-DNA。结果孕妇HCMV感染率为95，3％（11306／11859），孕妇活动性HCMV感染率为3．5％（417／11859），孕中期羊水的HCMV-DNA阳性率为12．1％（12／99）；孕晚期脐血或产后直接抽脐血HCMV-DNA阳性率为6．0％（9／149），羊水的HCMV-DNA阳性率与分娩期脐血及及新生儿血相比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论孕产妇孕前绝大多数已感染过HCMV，测定孕中期羊水的HCMV-DNA，对早期诊断先天性HCMV感染具有重要意义。     

携带乙肝病毒的孕妇阴道分泌物中乙肝病毒DNA检测情况分析

目的分析携带的乙型肝炎病毒孕妇阴道分泌物中乙肝病毒(HBV)携带情况以及探讨阴道分娩的安全性问题。方法将159例孕期检测乙肝血清学指标HBsAg阳性的孕妇作为研究组,及70例乙肝标志物阴性的健康孕妇作对照组,采用荧光定量PCR技术检测其阴道分泌物中的HBV标记物,并与血清乙肝标志物和HBV-DNA含量的检测结果进行比较。结果159例乙肝血清学指标HBsAg阳性孕妇阴道分泌物中有84例检出HBV-DNA(52.8%),而对照组中无1例阳性;HBeAg阳性组孕妇阴道分泌物的阳性率为93.4%(57/61),明显高于HBeAg阴性组的27.6%(27/98)(P<0.01);HBeAg阳性组孕妇阴道分泌物中HBV-DNA平均拷贝数(104.37)高于阴性组孕妇阴道分泌物中HBV-DNA平均拷贝数(102.24)(P<0.01)。另外,孕妇血清中HBV-DNA浓度与阴道分泌物中HBV-DNA浓度呈正线性相关(r=0.536,P<0.01)。结论对乙肝标志物阳性孕妇,应检测其阴道分泌物中的HBV-DNA。若阴道分泌物中HBV-DNA阳性,应慎重选择分娩方式。     

TaqMan-MGB探针实时荧光PCR在β地中海贫血植入前诊断中的应用研究

目的建立单细胞MGB探针荧光PCR检测β地贫的方法以及在β地贫PGD中的应用研究。方法获取β地贫基因携带者单个淋巴细胞,建立稳定的单细胞MGB探针荧光PCR检测技术,并对2例双方均为β地贫基因携带者的夫妇应用MGB探针荧光PCR进行了β地贫的PGD。结果利用单细胞MGB探针荧光PCR检测了β地贫基因携带者的200个单个淋巴细胞的基因型,平均扩增效率为94%,平均等位基因脱扣(ADO)率为2.5%。对两对夫妇进行4个周期PGD,共活检16个胚胎,获得16个卵裂球,其中15个卵裂球扩增成功,扩增效率为93.8%,ADO率为6.2%。14个胚胎经PCR分析后获得明确诊断,移植了4个胚胎,获得1例临床妊娠。孕11周时经腹吸取绒毛,证实为完全正常胚胎,最终分娩了一正常女婴。结论应用单细胞MGB探针荧光PCR技术可对β地贫以及其它单基因遗传病进行植入前遗传学诊断,达到优生目的。     

Identifiler体系在绒毛取样术中取材鉴定的应用

[目的]研究利用Identifiler体系对孕早期绒毛取材进行鉴定,以避免母体DNA的污染影响产前诊断的准确性。[方法]收集15例需行绒毛取样产前诊断的早孕期病人,用Identifiler体系的16基因位点进行检测病人外周血及绒毛DNA,判断绒毛DNA是否存在污染,从而决定是否利用绒毛进行产前基因诊断。[结果]检出2例存在母体DNA污染,于孕中期重新取羊水进行产前基因诊断,13例判断不存在污染的绒毛DNA进行基因诊断,其结果与出生后新生儿的结果完全符合。[结论]Identifiler体系在判断孕早期绒毛取样术取材的污染鉴定方面,有着非常准确的作用,可以考虑采用。     

子宫颈癌组织中p16基因启动子甲基化的临床意义

宫颈癌是严重威胁妇女健康的主要疾病之一,全世界每年大约有50万宫颈癌新发病例,死亡20万;我国每年新发病例13.15万,约占全世界宫颈癌新发病例的28.8%,居我国妇女生殖道恶性肿瘤的第1位[1].     

Y染色体基因芯片在无精、少精症分子遗传学诊断中的应用研究

目的探讨Y染色体基因芯片在无精、少精症分子遗传学诊断中的应用价值。方法利用高分辨率Y染色体基因芯片对10例原发性无精、少精症患者的Y染色进行基因芯片扫描。结果 10例原发性无精、少精症患者的Y染色体中有3例病例存在共同缺失片段12处,4例病例存在共同缺失片段14处,5例病例存在共同缺失片段3处,6例病例存在的共同缺失片段1处,缺失片段从1 kb到348 kb大小不等。结论 Y染色体基因芯片是研究无精、少精症的分子遗传学新方法,具有潜在的临床应用价值。