骨软骨组织工程支架的研究现状及发展趋势

目前,随着骨软骨组织工程的发展,为临床上骨软骨缺损的修复带来了新希望。应用自体细胞、支架、生长因子可以修复骨、软骨的缺损;选取具有生物相容性和可吸收性的复合支架可为细胞提供暂时的支持、黏附、生长环境,促进骨软骨缺损的修复。就骨软骨组织工程支架的分类、特性、应用以及存在的问题和发展趋势作一综述。     

兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体构建软骨组织工程支架*

背景：软骨组织工程的核心是利用少量的细胞经体外培养、扩增后,在一定环境下附着在三维多孔支架上,再将细胞/支架复合体移植到体内形成新的组织。 目的：拟构建兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体,探讨该支架作为软骨组织工程支架的可行性。 设计、时间及地点：细胞-支架学体外观察,于2008-03/2009-02在武警医学院生物化学教研室完成。 材料：日本大耳白兔6只用于分离培养骨髓间充质干细胞。医用壳聚糖粉末为山东奥康生物科技有限公司产品。Ⅰ型胶原为Sigma公司产品。 方法：取3%的壳聚糖和2%的胶原混合的醋酸溶液,倒入72孔板内,-20 ℃预冷冻10 h,冻干机冷冻抽干24 h制作成壳聚糖-胶原支架。取第3代兔骨髓间充质干细胞,以1×109 L-1密度接种于支架内,构建细胞/支架复合体。 主要观察指标：傅里叶红外光谱、扫描电镜、液体置换法测定支架的理化性质,观察三维培养后细胞在支架上的生长情况。 结果：壳聚糖-胶原支架孔径为160~380 μm,平均为270 μm,孔相通性好,支架孔隙率为(86.00±5.12)%。傅里叶红外光谱仪测定数据表明复合支架组成物有典型的壳聚糖、胶原峰,未发现有聚乙二醇峰。细胞/支架共培养24,48,72 h后,骨髓间充质干细胞可渗入支架多孔结构内,并黏附在支架上成簇生长,部分细胞已与支架融合。 结论：壳聚糖-胶原支架基本符合软骨组织工程支架要求,能够作为种子细胞的承载体。 关键词：壳聚糖-胶原支架;骨髓间充质干细胞;冻干法;软骨组织工程     

玻璃化保存肌腱的生物力学观察

目的探讨玻璃化保存法对兔肌腱力学性能的影响。方法玻璃化保存组，6条新鲜胫前肌肌腱，以18．64％二甲基亚砜＋13.37％乙酰胺＋9．17％1．2丙二醇＋浓度0．10mmol／L海藻糖＋10％小牛血清为玻璃化冷冻保护剂．将新西兰纯种大白兔肌腱采用三步法预处理．-196℃液氮保存14d；“两步法”深低温冷冻保存组，6条新鲜胫前肌肌腱，以15％二甲基亚砜＋10％小牛血清作为冷冻保护剂，“两步法”处理后-196℃液氮冷冻保存14d；对照组．6条新鲜新西兰纯种大白兔胫前肌肌腱。分别进行肌腱拉伸实验．检测肌腱破坏载荷峰值、最大载荷拉伸位移及杨氏弹性模量。结果肌腱破坏荷载峰值：新鲜肌腱组与玻璃化保存组及“两步法”深低温冷冻保存组间差异均有统计学意义（P=0．002），玻璃化保存组与“两步法”深低温冷冻保存组无统计学意义（P=0．256）；最大载荷拉伸位移：新鲜肌腱组与玻璃化保存组及“两步法”深低温冷冻保存组3组间均无统计学意义（P=0．065）；杨氏弹性模量：新鲜肌腱组与玻璃化保存组及“两步法”深低温冷冻保存组间差异均有统计学意义（P=0．006）．玻璃化保存组与“两步法”深低温冷冻保存组差异无统计学意义（P=0．577）。结论玻璃化保存法保存肌腱具有良好的发展前景。     

自发性蛛网膜下腔出血患者hs-CRP蛋白的动态变化及其临床意义

目的研究自发性蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)患者hs-CRP蛋白的动态变化及其临床意义。方法选取本院住院的50例自发性SAH患者为试验组和20例健康体检者为对照组。所有病例均在住院后根据Hunt-Hess分级给予评分,并分别在急性期(1、4、8、16天)、恢复期(1,3个月),采集肘静脉血,分离血清,采用免疫散射速率比浊法检测hs-CRP蛋白。对所有病人于发病后1、3月根据ADL法进行评级。结果试验组在发病后第1、4、8、16天,1、3个月时血清内的hs-CRP蛋白含量明显高于对照组,有统计学差异(P<0.01),而第3月时血清内的hs-CRP蛋白含量无明显差异(P>0.05)。试验组发病后第1、4、8、16天,1、3个月时血清内的hs-CRP蛋白含量与入院时Hunt-Hess分级评分具有明显正相关性(P<0.01),也与患者在第1个月、3个月时的ADL法的评级具有明显相关性(P<0.01)。结论检测血浆内的hs-CRP蛋白含量可以在一定程度上反应出患者病情的轻重,并对患者预后具有指导意义。     

依达拉奉联合硫酸镁和大剂量纳洛酮治疗急性脑卒中的临床观察

目的探讨依达拉奉联合硫酸镁和大剂量纳洛酮治疗急性脑卒中的疗效。方法 112例急性脑卒中患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组46例。对照组给予依达拉奉,观察组联合应用硫酸镁、大剂量纳洛酮。比较两组神经功能缺损评分、血液流变学指标及疗效。结果观察组总有效率为86.96%(40/46),对照组为60.87%(36/46),比较差异有统计学意义(P<0.01);两组治疗后NDS评分和血液流变学指标均显著下降(P<0.05),观察组较对照组下降更为显著,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组均无不良反应。结论依达拉奉联合硫酸镁和大剂量纳洛酮治疗急性脑卒中能更快改善神经功能,促进血液循环,显著提高疗效,且无不良反应。     

颅脑创伤后脑血管痉挛的诊断及治疗体会

颅脑外伤后许多患者有病情逐渐加重过程,部分患者甚至死亡.如果排除非颅内因素(即全身原因),病情加重多与颅内血肿增大、迟发性颅内血肿或脑水肿加重等有关,头颅CT检查常能发现其病因.但部分患者病情加重不能用颅脑CT检查结果解释,可能与症状性脑血管痉挛( symptomatic cerebral vasospasm,SCVS)有关,本院自2006年6月至2009年6月收治相关病例26例,现报告如下. 资料与方法 1.一般资料:本组颅脑外伤26例,男18例,女8例,年龄22～72岁,平均43.3岁;车祸伤17例,高处坠落伤7例,打击伤2例;合并高血压8例,糖尿病3例.     

兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体构建软骨组织工程支架

背景:软骨组织工程的核心是利用少量的细胞经体外培养、扩增后,在一定环境下附着在三维多孔支架上,再将细胞/支架复合体移植到体内形成新的组织.目的:拟构建兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体,探讨该支架作为软骨组织工程支架的可行性.设计、时间及地点:细胞-支架学体外观察,于2008-03/2009-02在武警医学院生物化学教研室完成.材料:日本大耳白兔6只用于分离培养骨髓间充质干细胞.医用壳聚糖粉末为山东奥康生物科技有限公司产品.Ⅰ型胶原为Sigma公司产品.方法:取3%的壳聚糖和2%的胶原混合的醋酸溶液,倒入72孔板内,-20℃预冷冻10 h,冻干机冷冻抽干24 h制作成壳聚糖-胶原支架.取第3代兔骨髓间充质干细胞,以1×109L-1密度接种于支架内,构建细胞/支架复合体.主要观察指标:傅里叶红外光谱、扫描电镜、液体置换法测定支架的理化性质,观察三维培养后细胞在支架上的生长情况.结果:壳聚糖-胶原支架孔径为160～380 μm,平均为270 μm,孔相通性好,支架孔隙率为(86.00±5.12)%.傅里叶红外光谱仪测定数据表明复合支架组成物有典型的壳聚糖、胶原峰,未发现有聚乙二醇峰.细胞/支架共培养24,48,72 h后,骨髓间充质干细胞可渗入支架多孔结构内,并黏附在支架上成簇生长,部分细胞已与支架融合.结论:壳聚糖-胶原支架基本符合软骨组织工程支架要求,能够作为种子细胞的承载体.     

天然支架在软骨组织工程中应用的研究现状

由于软骨内无血管，缺乏血液供应，细胞代谢缓慢，临床上常见的由创伤和各种疾病（如骨关节炎，剥脱性骨软骨炎、骨坏死等）引起的关节软骨缺损难以自行修复。修复关节软骨缺损的传统的方法（关节灌洗清理术、微骨折、软骨下钻孔、骨膜和软骨膜移植）都存在一些技术上的局限性，均不能实现长期的软骨修复。自体软骨移植在临床上技术较成熟，但也存在供区缺损、来源有限等不足，异体软骨移植因免疫排斥反应而受到限制。组织工程化软骨的出现为软骨缺损修复提出了新的途径。1977年Green将分离、培养的软骨细胞与脱钙骨支架联合培养，开始尝试软骨组织工程的研究，并认识到细胞培养支架的重要性。目前，软骨组织工程中支架分为天然和人工合成支架。     

玻璃化保存法对肌腱形态学及生物力学影响

目的：探讨玻璃化保存法对兔肌腱组织、细胞形态及力学性能的影响。方法：以18．64％二甲基亚砜（V／V）＋13.37％乙酰胺（V／V）＋9．17％1，2丙二醇（V／V）＋0．10mmol／L海藻糖＋10％小牛血清为玻璃化冷冻保护剂，将新西兰纯种大白兔肌腱采用三步法预处理，-196℃液氮保存14d作为玻璃化保存组：以15％二甲基亚砜＋10％小牛血清作为冷冻保护剂．“两步法”处理后-196℃液氮冷冻保存14d的新西兰纯种大白兔胫前肌肌腱作为对照组。透射电镜观察组间肌腱组织细胞的形态差异，并分别进行肌腱拉伸实验．检测肌腱破坏载荷峰值、最大载荷拉伸位移及杨氏弹性模量。结果：玻璃化保存组细胞的结构形态未见明显改变．对照组肌腱组织微观结构损伤明显。肌腱破坏荷载峰值：玻璃化保存组与对照组无统计学意义（P=0．256）：最大载荷拉伸位移：玻璃化保存组与对照组间差异无统计学意义（P=0．065）；杨氏弹性模量：玻璃化保存组与对照组间差异有统计学意义（P=0．006）。结论：与对照组肌腱相比。玻璃化保存法对肌腱组织细胞形态损伤较小。但两者在生物力学特性上无明显差异．     

hs—CRP蛋白在SAH患者的动态变化及其临床意义

脑血管疾病是当今人类死亡率最高的三大疾病之一。自发性蛛网膜下腔出血（SAH）是脑血管疾病发病过程中一种常见、重要的临床表现形式。急性颅脑损伤、脑梗死及冠心病中,血清超敏C-反应蛋白（hs—CRP）升高者预后不佳．所以把血清hs—CRP作为早期诊断、病情分级及判断预后的一项特异性指标。本研究就自发性SAH患者血清hs—CRP的表达与自发性SAH患者的病情严重程度及预后的相关性做探讨,现报告如下。