酵母系统表达疾病相关蛋白的研究

随着分子生物学技术的发展 ,利用生物工程技术表达药用蛋白、生物活性蛋白已成为一种有潜在发展前景的生产方式 ,如全世界用于治疗糖尿病的胰岛素 ,大约有一半的用量是由酿酒酵母表达出来的。ThomasKjeldsen等用毕赤巴斯德酵母表达出了有活性的与人类天然胰岛素结构相同的胰岛素[1] 。与传统的原核表达系统相比 ,酵母真核表达系统具有易培养、繁殖快及真核细胞对翻译后蛋白的加工及修饰过程 ,如二硫键的正确形成 ;前体蛋白的水解加工 ;糖基化作用等 ,并且能将表达的蛋白产物分泌到细胞外的培养基中 ,简化了表达产物的回收和纯化 ,有利于蛋…     

小分子肽制备抗体方法的研究进展

许多生理调节所必须的因子都是很小的肽类, 生物技术的发展也促进了大量小分子基因工程肽类药物的出现, 因而小分子肽的分离、纯化与鉴定技术日趋重要.小分子肽的界限划分迄今未有明确定义, 一般认为小分子肽的相对分子质量(Mr)均在3000以下[1].在小分子肽的生物学功能、鉴定与其相互作用的蛋白质的研究中, 特异性抗体是一重要的研究工具[2].鉴于小分子肽仅有反应原性, 免疫原性较弱,因此在小分子肽制备抗血清过程中采取多种方法.     

骆驼蓬种子提取物及其β咔保啉生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱及哈尔满碱(止咳药用植物)对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用。方法从体外培养的Q3肝癌细胞中,提取分离DNA拓扑异构酶Ⅱ;以阿霉素为阳性对照,用琼脂糖凝胶电泳法检测药物对DNA拓扑异构酶Ⅱ的作用。结果骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔满碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性均有一定的抑制作用。结论对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用是骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱等生物碱抗癌作用和细胞毒作用的机制之一。     

手术应激反应的新概念——神经免疫内分泌学说

神经免疫内分泌学说认为神经内分泌系统与免疫系统间存在双向调节、交互影响的基础,更引人关注的是,免疫系统通过释放细胞因子、分泌内分泌激素、感受抗原刺激等三方面发挥调节神经内分泌反应的功能。在手术应激反应的研究中不能忽视免疫系统的参与作用及围术期多种因素对其影响。     

新疆家蚕抗菌肽的抗体制备及鉴定

目的:制备鼠抗新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)的抗体, 用于抗菌肽的体外细胞定位分析.方法:将编码抗菌肽的cDNA序列亚克隆到真核表达载体pcDNA3上, 构建重组真核表达载体pcDNA3/Cecropin-XJ, 进行核酸免疫昆明白小鼠;同时构建原核表达载体, 对抗菌肽进行融合表达, 以表达的融合蛋白作为检测抗原.采用免疫电镜技术分析Cecropin-XJ的作用部位.结果:间接ELISA表明, 重组质粒第5次免疫的效价最高;免疫胶体金实验显示, 所制备的抗血清能够对抗菌肽作用部位进行准确清晰的定位.结论:所制备的鼠抗Cecropin-XJ的抗血清具有较高的免疫反应性和特异性, 为Cecropin-XJ的抑菌机制研究提供了有力的工具, 同时也为小分子肽抗体的制备提供了参考.