成纤维细胞生长因子在软骨发育过程中的基因芯片分析及相关研究

目的 检测并分析促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中成纤维细胞生长因子(FGF)在软骨发育过程中的基因表达规律;通过细胞培养观察FGF基因对骨髓基质干细胞(BMSCs)生长特性的影响. 方法用基因芯片技术建立妊娠胎鼠肢芽软骨发育过程的基因表达谱,分析MAPK信号通路中碱性成纤维细胞生长因子(brGF)在软骨发育过程中的基因表达规律.构建bFGF质粒并转染至培养的BMSCs中,用MTT法、免疫组织化学、HE染色、RT-PCR及酶联免疫吸附法检测bFGF基因转染BMSCs的效果及产物表达. 结果 MAPK信号通路中的FGF在软骨发育过程中的软骨形成关键期表达显著上调,并启动MAPK信号通路,促进软骨形成.bFGF基因转染的BMSCs生长活力较强,可以保持2周以上;HE染色显示细胞增殖旺盛,胞核深染;RT-PCR表明有bFGF的基因表达;酶联免疫吸附法检测bFGF表达量高. 结论 FGF能够启动MAPK信号通路从而促进软骨彤成.bFGF质粒转染BMSCs后可促进BMSCs的增殖,细胞有向软骨细胞分化趋势.     

Vertebral plate regeneration induced by radiation-sterilized allogeneic bone sheets in sheep

Objective： To evaluate the effects and mechanism of radiation-sterilized allogeneic bone sheets in inducing vertebral plate regeneration after laminectomy in sheep. Methods ： Twelve adult male sheep （ aged 1.5 years and weighing 27 kg on average ） provided by China Institute for Radiation Protection underwent L3-4 and L4-5 laminectomy. Then they were randomly divided into two groups： Group A （n =6） and Group B （n =6）. The operated sites of L4-5 in Group A and L3-4 in Group B were covered by ＂ H-shaped＂ freeze-drying and radiationsterilized allogeneic bone sheets （ the experimental segments）, while the operated sites of L3-4 in Group A and L4-5 in Group B were uncovered as the self controls （ the control segments ）. The regeneration process of the vertebral plate and the adhesion degree of the dura were observed at 4,8,12,16,20 and 24 weeks after operation. X- ray and CT scan were performed in both segments of 1.34 and L4-5 at 4 and 24 weeks after operation. Results： In the experimental segments, the bone sheets were located in the anatomical site of vertebral plate, and no lumbar spinal stenosis or compression of the dura was observed. The bone sheets were absorbed gradually and fused well with the regenerated vertebral plate. While in the control segments, the regeneration of vertebral plate was not completed yet, the scar was inserted into the spinal canal, compressing the dura and the spinal cord, and the epidural area almost disappeared. Compared with the control segments, the dura adhesion degree in the experimental regenerated segments was much milder （ P 〈 0. 01 ）, the internal volume of the vertebral canal had no obvious change and the shape of the dura sack remained well without obvious compression. Conclusions： Freeze-drying and radiation-sterlilized allogeneic bone sheets are ideal materials for extradural laminoplasty due to their good biocompatibility, biomechanical characteristics and osteogenic ability. They can effectively reduce formation of post-laminectomy scars, prevent recurrence of post-lamlnectomy spinal stenosis, and induce regeneration of vertebral plates.     

SOX9基因在软骨发育过程中的表达谱分析及其质粒转染鼠骨髓基质细胞的实验研究

目的 检测并分析SOX9基因在软骨发育过程中的表达规律;构建其质粒并转染至培养的骨髓源基质细胞(BMSCs)中,通过细胞培养观察SOX9基因对BMSCs生长特性的影响,为可能的骨关节炎(OA)基因治疗提供理论基础.方法 用基因芯片技术建立妊娠胎鼠肢芽软骨发育过程的基因表达谱,分析SOX9基因在软骨发育过程中的表达规律;用噻唑蓝(MTT)法、免疫组织化学、苏木素-伊红(HE)染色、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SOX9基因转染MSCs的效果及产物的表达.结果 SOX9基因在软骨发育过程中的软骨形成关键期表达显著上调;pDC316-SOX-9质粒转染骨髓基质细胞后可促进骨髓基质细胞的增殖,细胞有向软骨细胞分化趋势.结论 SOX9能够促进软骨形成,SOX9基因质粒转染的MSCs可望在软骨组织工程临床治疗中得到更广泛的运用.     

稳定表达PAcGFP1-Golgi质粒的中国仓鼠卵巢细胞株的构建

目的:将质粒PAcGFP1-Golgi转染到中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)并进行筛选纯化,得到单一克隆细胞株,从而构建能很好显示高尔基体形态、分布和功能的新模型。方法:将质粒PAcGFP1-Golgi以脂质体法转染CHO细胞,稳定后用G418筛选、平板稀释法克隆细胞;克隆完成后以激光共聚焦显微镜观察高尔基体形态及分布,动态监测荧光表达率,MTT法检测细胞增殖活性。结果:成功获得稳定表达质粒PAcGFP1-Golgi的CHO细胞株,激光共聚焦显微镜下高尔基体显示清晰,荧光表达率高达(99.31±0.26)%且表达稳定,细胞增殖活性与空白CHO细胞无异。结论:稳定表达PAcGFP1-Golgi质粒的CHO细胞株构建成功,为进一步研究高尔基体、COG复合体及其与遗传性糖基化障碍疾病之间的关系打下基础。     

微量快速制备的人双核淋巴细胞微核标本及在放射生物学中的应用

本文报道了利用细胞松弛素Ｂ抑制细胞质分裂诱导产生双核淋巴细胞的制备方法，该方法具有微量，快速，简便的优点，适用大范围的人群普查，具有一定的推广价值。并测试了１０名健康献血者的外周血，经不同剂量ｘ射线照射后的剂量反应曲线，其微核率照射剂量的增加而增加。     

高效皮肤清洗剂—SGS—1对小鼠骨髓细胞SCE影响的动态观察

本文分别通过一次和连续七天经皮染毒方法,观察了高效皮肤清洗剂——SGS-1对小鼠骨髓细胞SCE的影响。结果表明经皮肤给予89.6mg/kg、358.6mg/kg、1793mg/kg三个实验组,一次染毒和七次染毒各组动物骨髓细胞SCE频率无显著差异。未发现染毒剂量增高或染毒次数的增加时SCE频率有随之增高的倾向。各实验组SCE频率与阴性对照组接近(P>0.5),且明显低于环磷酰胺对照组(P<0.001)。结果提示SGS-1属于无明显诱变作用的化合物。     

降低香烟毒性的添加剂效应评价

香烟中存在多种肯定致癌剂，促癌剂和协同致癌剂。香烟凝聚物（CSC）能引起人外周血淋巴细胞SCE频率明显增加。目前在细胞水平上观察DNA的损伤，SCE是一种很敏感的指标，它与现有的致突变、致癌测试法有高度的关联性。因此，本研究以人体外周血淋巴细胞SCE作为指标，检测降低香烟毒性添加剂（I＊D）对人外周血淋巴细胞S＊E频率的影响，以及降低由CSC诱发的SCE频率的作用，为减少吸烟给人类健康所带来的危害提供科学依据。1材料和方法l·IJYD的制备由河南省鹤壁市第一人民医院科技组提供，系中草药制剂。用0．smo！NaOH调节其P…     

医学生物学科课程体系融合改革的探索

为了适应高等医学教育面向21世纪课程体制改革的需要，提高教学水平和教学质挝，以培养出符合新世纪要求的医学人才，我们将原有的医学细胞生物学和生物化学与分子生物学融合成一门课程一一医学分子细胞生物学，在教学体系和教学内容上按生物大分子物质，细胞结构、物质代谢，基因信息、基因表达与调控融合为一体．作了较大改革。从理论和实验两方面加强各学科之间的联系与渗透，减少课程内容不必要的重复，促进学科融合，构筑一个含有生命科学多层次的觅口径教学平台的宏观教学模式。     

利用基因芯片技术研究FGFR3在小鼠胚胎肢芽不同发育阶段的表达

目的 检测在软骨发育分化过程中具有重要作用的成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)在小鼠胚胎肢芽发育过程中的表达. 方法 采用小鼠全基因组Affymetrix mouse 430 2.0芯片检测小鼠胚胎肢芽发育不同阶段的基因表达,并进行组织学染色观察. 结果 FGFR3在E12.5d开始呈现明显的表达上调,在E13.5d达到上调顶峰,E14.5d后FGFR3表达逐渐下调. 结论 FGFR3的表达与胚胎肢芽软骨发育过程密切相关,在软骨的发育分化过程中发挥着重要的作用,并可作为前软骨细胞的特异件标记物.     

人体泌尿系统感染结肠小袋纤毛虫1例

结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)具有大多数自由生活和某些寄生生活纤毛虫的特性。有滋养体和包囊两个发育阶段。在我国西南、中南及华南地区，猪感染结肠小袋纤毛虫比较普遍，人体的感染比较少见。结肠小袋纤毛虫主要寄生在人体的结肠肠道处，偶尔也感染泌尿系统。最近我们在武汉市郊区某一农村小学做寄生虫病普查时，在一个学生