丙酮酸乙酯对肝细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制研究

目的:探讨丙酮酸乙酯在肝细胞氧化应激损伤中的作用及机制。方法:通过对人肝细胞系L-02进行缺氧/复氧处理各1 h建立氧化应激损伤模型。将L-02根据干预措施分为对照组(Control组)、乳酸钠林格液组(LR组)、丙酮酸乙酯组(EP组)。应用日本日立公司7020全自动分析仪检测细胞培养上清液中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)浓度;采用Hoechst 33342/碘化丙啶双标记荧光染色以及原位缺口末端标记法(TUNEL)检测各组细胞的凋亡和坏死情况;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测各组caspase-9、caspase-3与多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达;采用荧光素发光法测量各组肝细胞内ATP浓度。结果:EP组细胞培养上清液中AST和ALT浓度均低于Control组和LR组(P0.05);EP组坏死细胞比例低于Control组和LR组(P0.05),但凋亡细胞比例高于Control组和LR组(P0.05)。EP组活化形式的caspase-9、caspase-3与PARP蛋白表达水平高于Control组和LR组(P0.05)。EP组细胞内ATP浓度显著高于Control组和LR组(P0.05)。结论:EP对肝细胞氧化应激损伤有保护作用,能减少坏死细胞数量,增加凋亡细胞数量,改变坏死及凋亡细胞比例。EP的细胞保护作用机制可能在于改善能量代谢,提高细胞内ATP浓度,激活"凋亡/坏死共同通路",激活凋亡过程。     

便秘用这4招,比任何药都管用

所谓便秘,指在多种致病因素的作用下,结直肠和肛门的结构功能发生改变,临床上出现排便困难、排便量少、排便次数减少或排便不适感等的一类疾病。     

《中华精准健康传播专家共识》之公民防控心梗“十间”防心梗（上）

正一、如厕间所谓如厕间即是指上厕所的时刻,中老年人或有疾患者,大便往往不顺畅,在用力排解大便时,人体的腹内压会增大,血压会迅速上升,心率也相应加快,这一切都会增加心脏负担,可能诱发心肌梗死。建议有冠心病等疾患的患者或者中老年人在如厕时切忌用力过猛,当大     

《中华精准健康传播专家共识》之公民防控心梗 生活“十间”防心梗(下)

日常生活中，“如厕间、洗澡间、酒席间、电视间、游泳间、吸烟间、棋牌间、鼾睡间、起居间、太平间”是引发心肌梗死的危急“十间”，怎么预防？怎么急救？请看图学习。     

胸苷磷酸化酶与肝癌血管新生及预后的关系

目的　研究胸苷磷酸化酶 (TP)在原发性肝癌 (HCC)血管新生化及预后中的作用。方法　收集 6 5例HCC患者围手术期一般临床资料和病理学资料 ,并进行随访。分析TP的免疫组织化学表达与微血管密度 (MVD)计数的关系 ;对随访的 5 4例患者作生存分析。结果　 (1)肝癌组织TP阳性表达率明显高于正常肝组织 (P <0 .0 5 )。 (2 )肝癌组织TP阳性表达组、阴性表达组MVD计数分别为 16 .14± 5 .11、10 .11± 4 .5 5 ,两者差异具有统计学意义 (P <0 .0 1)。 (3)TP的表达与肝癌大小、Edmondson分级、包膜是否完整、有无门静脉癌栓明显相关。 (4 )TP表达阳性HCC组 1年、2年、3年复发率分别为 4 0 0 %、6 6 .7%、79.2 % ;TP表达阴性HCC组则分别为 2 7.4 %、31.3%、4 5 .7%。TP阳性HCC组 2年、3年复发率明显高于TP阴性组 (P <0 .0 1)。 (5 ) 5 4例随访患者 ,TP阳性组总体生存率明显低于阴性组 (P <0 .0 1)。结论　TP在HCC血管新生化中起重要作用 ,可作为HCC术后一个新的预后指标。     

外科重症监护室病人治疗性干预时每日诊疗目标表格用于诊疗管理的效果

自2008年1月起,本课题组将每日诊疗目标表格用于外科重症监护室(SICU)中每例病人的不同治疗性干预.首先评估住院医生和护士对病人情况的知晓度2周,第1周未应用该表格,第2周应用该表格.每天随机选2例病人,向主管住院医生和护士询问病情.评估标准:完全知晓为5分;大部分知晓为4分;部分知晓为3分;了解一点为2分;不知晓为1分,其中5分和4分判定为对病人病情知晓.应用表格前,住院医生和护士对病人诊疗知晓度评分分别为(3.21±0.71)分和(2.29±0.49)分,应用表格后,评分分别为(4.79±0.27)分和(4.07±0.61)分,应用表格后住院医生和护士对病人诊疗知晓度评分明显高于应用表格前(P＜0.05).2008年病人SICU住院时间短于2007年(P＜0.05).提示每日诊疗目标表格是科学管理SICU的措施之一,对医护人员达成有效的共识和改善病人的预后具有积极地作用.     

人肝癌细胞系MHCC97H中侧群细胞初探

目的 从人肝癌细胞系MHCC97H中分选侧群细胞,探索其形态、表型和功能特征.方法 利用流式细胞仪从MHCC97H中分选得到侧群细胞,用相差显微镜和透射电镜观察其形态学特点;Western blotting观察其ABCG2表达;用流式细胞仪评估侧群细胞与干细胞基因CD133、CD117的关系;用克隆形成实验和NOD/SCID接种实验分别观察侧群细胞体外增殖和体内成瘤情况.结果 侧群细胞体积较小,呈圆形或短梭形;侧群细胞的细胞器如线粒体、内质网等明显少于非侧群细胞;流式检测显示侧群细胞中含有CD133、CD117阳性细胞;Western blotting显示侧群细胞和非侧群细胞中均有ABCG2表达,两者无明显差异;平板克隆形成实验显示SP具有较强的克隆形成能力;体内移植实验显示2000个SP细胞即能在体内形成肿瘤.结论 肝癌细胞系MHCC97H中侧群细胞具有肿瘤干细胞样细胞的表型和特性;ABCG2可能不是决定肝癌侧群细胞表型的主要因素.     

高/低转移人肝癌细胞株MHCC97-H/L中侧群细胞分析

目的观察高／低转移人肝癌细胞株MHCC97-H／L是否存在侧群（SP）细胞并鉴定其致瘤性。方法MHCC97-H／L予Hoechst33342和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）荧光染色；流式细胞分选MHCC97．H／L中SP细胞，分选后细胞皮下接种非肥胖性糖尿病联合免疫缺陷（NOD／SCID）小鼠，观察成瘤情况。结果Hoechst33342和CFSE染色结果显示，MHCC97-H／L中未染色细胞分别为（4．02±0．02）％／（1．02±0．01）％，流式细胞分选结果示MHCC97-H／L中sP细胞为（4．88±0．66）％／（0．88±0．36）％，比例差异有统计学意义（P〈0．05）。体内成瘤实验显示，SP细胞只需1×10。个即可在NOD／SCID小鼠皮下成瘤（5／6），而1×10^6个非SP细胞均未成瘤（0／6）。结论高／低转移人肝癌细胞株MHCC97-H／L中均存在SP细胞亚群，但前者比例显著高于后者。肝癌SP细胞具有极高的致瘤性，并可能和肝癌转移潜能相关。     

二氮嗪预处理对大鼠部分肝移植的保护作用

目的:探讨二氮嗪(diazoxide,DA)预处理对大鼠部分肝移植的保护作用,寻找减轻临床部分肝移植中缺血再灌注损伤的途径。方法:将150只SD(Sprague-Dawley)大鼠,随机配对成75对,分为3组:对照组(C组)、DA预处理组(DA组)和5-羟基癸酸盐(5-hydroxydecanoate sodium salt,5-HD)+DA预处理组(HD-DA组),每组25对。在进行60%比例部分肝移植术前,C组供体不进行药物预处理;DA组供体在术前30min腹腔注射DA(5mg/kg);HD-DA组供体在术前45min腹腔注射5-HD(5mg/kg),并在其后15min腹腔注射DA(5mg/kg)。各组分别在术后2h、1d、3d、5d和7d各处死5只受体大鼠,测定谷酸丙氨酸转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST),并在光镜下进行病理检查,电镜下进行超微结构检查。结果:DA组与C组相比,肝细胞肿胀、变性、坏死和空泡样变性以及肝小叶结构排列紊乱和汇管区炎症都较轻,而HD-DA组则跟与C组相近。DA组术后2h、1d、3d的ALT值和AST值均显著低于C组(P<0.05),而HD-DA组与C组相比,各时点ALT和AST值均无显著差异(P>0.05)。结论:二氮嗪预处理对大鼠部分肝移植具有保护作用,但这种保护作用可以被5-羟基癸酸盐特异性阻断。