槟榔碱诱导血管内皮细胞凋亡Caspase-3活性的研究

目的：初步探讨凋亡“核心蛋白酶”——Caspase-3在槟榔碱（Arecoline）诱导血管内皮细胞（Endothelial Cells，EC）凋亡中的作用。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞（HumanUmbilical Vein Endothelial Cells，HUVECs），将EC与槟榔碱共同培养，应用荧光显微镜观察EC凋亡情况，计算凋亡百分率并用比色法检测Caspase-3的活性。结果：槟榔碱诱导血管内皮细胞组在荧光显微镜下可见到明显的细胞凋亡改变，Caspase-3活性较正常对照组明显增高（P〈0．05），且在12h时最高。结论：槟榔碱可诱导血管内皮细胞凋亡，Caspase-3可能参与了这一细胞凋亡过程的调控。     

槟榔碱对口腔角质形成细胞端粒酶逆转录酶表达的影响

目的：观察槟榔碱对人口腔角质形成细胞（KC）端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA及蛋白表达的影响，进一步探讨hTERT在口腔黏膜下纤维性变（OSF）癌变过程中的作用机制。方法：体外培养正常口腔黏膜的上皮细胞，将实验细胞分为0．03、0．06、0．09g／L槟榔碱组、空白对照组。采用Western印迹法和RT-PCR方法观察槟榔碱对KC hTERT mRNA及蛋白表达的影响。结果：槟榔碱能呈剂量依赖性增加KC hTERT mRNA及蛋白表达，0．03、0．06、0．09g／L槟榔碱组hTERT mRNA及蛋白表达均高于空白对照组（P〈0．05）。结论：槟榔碱对KChTERT mRNA与蛋白表达有明显诱导作用，且在一定范围内呈剂量依赖关系，槟榔碱诱导KChTERT过度表达可能在OSF癌变过程中起重要作用。     

c-fos、c-jun蛋白在口腔黏膜下纤维性变组织中的表达研究

目的 :检测c -fos、c -jun蛋白在口腔黏膜下纤维性变 (OSF)组织中的表达及分布 ,探讨其在OSF发病机制中的作用。方法 :采用免疫组化SABC法 ,用c -fos、c -jun兔抗人多克隆抗体检测 5 6例OSF病变组织、15例口腔黏膜扁平苔藓 (OLP)病变组织及 10例正常口腔黏膜组织中的c -fos、c -jun蛋白的表达及分布。 结果 :c -fos、c -jun蛋白在OSF病变组织有明显的阳性表达 ,正常口腔黏膜及OLP组织为阴性表达 (P <0 .0 5 )。其表达主要位于OSF病变上皮组织 (P <0 .0 5 ) ,且表达强度为正相关 (γs=0 .744 ,P <0 .0 1)。结论 :c -fos、c -jun蛋白在OSF病变组织中高表达 ,在OSF发病机制中有重要作用。     

转化生长因子β与组织纤维化

转化生长因子β(TGF-β)是一类具有多种生物活性的细胞因子,本文对其生化特性作一介绍,TGF-β具有调节细胞生长和分化作用,是细胞生长双向调节剂,并调节细胞外基质形成,本文着重就TGF-β与组织纤维化的关系进行了综述。     

槟榔碱诱导口腔角质形成细胞凋亡研究

目的:了解槟榔碱(arecoline)对体外培养的人口腔黏膜角质形成细胞(keratinocyte,KC)凋亡的影响。方法:不同浓度的槟榔碱以及在不同时间处理体外培养的KC,在荧光显微镜下观察KC凋亡形态学改变并计算凋亡百分率,用比色法检测Caspase-3活性的改变。结果:1)槟榔碱能以一定时间和浓度依赖方式诱导培养的KC发生凋亡,其细胞凋亡率较正常对照组明显增高(P<0.05)。2)槟榔碱作用KC,其Caspase-3活性较正常对照组明显增高(P<0.05)。结论:槟榔碱可诱导KC凋亡,Caspase-3可能参与了这一细胞凋亡过程的调控。KC凋亡异常可能是口腔黏膜下纤维性变的重要发病机理之一。     

核磁共振联合阴道彩超评估早期子宫颈癌病情的价值初探

目的:探讨核磁共振成像(MRI)联合阴道彩色多普勒超声(TVUS)预测早期宫颈癌预后高危因素的价值。方法:选择2008年9月至2013年1月在北京大学人民医院住院的临床分期为ⅠB和ⅡA期、术前未接受其他治疗并具有完整影像学检查资料的78例患者,患者术前均行核磁共振常规及加权成像(MRI+DWI)和TVUS检查,回顾分析影像学检查结果与术后病理的关系。结果:MRI、TVUS、MRI联合TVUS判断肿瘤直径、阴道浸润、宫旁组织受侵及淋巴结转移与术后病理的一致性均较高,均无统计学差异(P均≥0.05);判断宫颈间质浸润深度与术后病理的一致性较低,具有统计学差异(MRI组:P=0.007;TVUS组:P=0.010;MRI联合TVUS组:P=0.002);预测肿瘤直径、宫颈间质浸润、阴道浸润、宫旁浸润、淋巴结受累中的准确率:MRI分别为81.8%、73.7%、84.6%、94.9%、78.2%;TVUS分别为66.7%、51.3%、78.2%、96.1%、82.0%;MRI联合TVUS分别为84.4%、78.2%、89.7%、97.4%、92.3%。结论:术前MRI联合TVUS检查对预测早期宫颈癌可能出现的影响预后的高危因素有重要价值,可提高术前病情评估的准确度,为选择最佳治疗方案提供参考。     

口腔黏膜下纤维性变数据库的初步建立及临床应用

目的    设计一个用于口腔黏膜下纤维性变（OSF）患者临床资料收集、查询的数据库,介绍其临床应用。 方法    首先建立数据库的最初模型,然后由程序员利用 Visual Studio 2013和Microsoft SQL server 2005等专业工具进行计算机编程支持,构建OSF患者临床资料数据库。将2014年6月至2015年12月就诊于中南大学湘雅二医院口腔医疗中心及长沙市口腔医院门诊的154例OSF患者的临床资料输入数据库,进行使用性测试。 结果    成功建立了OSF患者临床资料数据库,该数据库具有数据录入简单快捷、数据查询方便、数据统计实用并有针对性、数据维护安全可靠的特点,可对病案实行信息化管理。结论    建立OSF患者临床资料数据库,为OSF患者的临床资料信息化管理提供了一种有用的工具。     

常山酮对口腔黏膜下纤维性变SD大鼠模型抗纤维化作用研究

目的　探讨常山酮对博来霉素致口腔黏膜下纤维性变（oral submucous fibrosis,OSF）大鼠的药理作用。方法　将40只SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组20只。实验组大鼠在麻醉状态下,于双侧颊黏膜下局部注射1 mg/mL 博来霉素稀释液100 μL,每天1次,共持续给药8周;对照组大鼠注射等量的生理盐水。分别于实验前和给药2、4、6、8周时用游标卡尺对每只大鼠进行张口度测量,每次每只大鼠测量3次,求平均值。建模过程中实验组大鼠有3只死亡。8周后分别处死建模成功的实验组大鼠5只和全部对照组大鼠,取其双侧颊黏膜组织置于多聚甲醛中固定。另建模成功的实验组12只大鼠随机分为常山酮治疗组和常山酮对照组各6只。常山酮治疗组大鼠给予1 μg/mL常山酮稀释液 200 μL,给药方式同建模时博来霉素的注射,每天1次,持续6周;常山酮对照组大鼠给予相同剂量的生理盐水。分别于2、4、6周时对每只大鼠进行张口度测量,测量方法同上。6周后处死全部大鼠,取其双侧颊黏膜组织置于多聚甲醛中固定。采用HE染色观察各组大鼠颊黏膜组织病理变化情况。结果　（1）20只SD大鼠局部注射博来霉素 8周诱导出了17只临床和病理上与人OSF相似改变的SD大鼠模型;（2）局部给药常山酮6周缓解了OSF模型鼠的纤维化情况。结论　常山酮可改善博来霉素致OSF大鼠的纤维化情况,阻止纤维化的进一步发展。