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1.
目的 研究替米沙坦对脂多糖诱导3T1-L1脂肪细胞炎症通路的影响,探讨替米沙坦的抗炎机制.方法将3T3-L1脂肪细胞诱导至90%成熟,按随机数字表法分为6组:对照组、LPS组、LPS+替米沙坦(0.01、0.1、1和10μg/ml)组(n=18),向对照组细胞中加DMSO,LPS+替米沙坦组细胞中加入不同浓度替米沙坦,孵育2h后,LPS组和LPS+替米沙坦组再加入脂多糖(1 μg/ml),孵育1h,Western免疫印记法比较各组核蛋白NF-κBp65、总蛋白p-IκBα、IκBα、p-ERK1/2、ERK1/2、P-p38MAPK、p38 MAPK的表达水平.结果 脂多糖刺激后IκBα磷酸化蛋白表达增强(P<0.05),细胞核内NF-κBp65蛋白表达增多(P<0.05),MAPK通路相关蛋白ERK1/2磷酸化和p38MAPK磷酸化水平明显增强(P<0.05),替米沙坦可抑制IκBα磷酸化和NF-κBp65核转位,p-IκBα蛋白表达和核蛋白NF-κBp65表达均降低,大剂量替米沙坦(10 μg/ml)作用时该作用明显(P<0.05).替米沙坦干预后,p-ERK1/2和p-p38MAPK蛋白表达也受到明显抑制(P<0.05),大剂量(10μg/ml)时作用明显(P<0.05).结论 在3T3-L1脂肪细胞中,替米沙坦可以抑制NF-κB通路中IκBα蛋白磷酸化、NF-κBp65蛋白核转位以及MAPK通路中ERK1/2蛋白和p38MAPK蛋白的磷酸化,从而发挥抗炎作用.  相似文献   
2.
促肾上腺皮质激素单克隆抗体的筛选和鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的制备促肾上腺皮质激素 ( ACTH)单克隆抗体 ,拟建立高灵敏度 ACTH- IRMA或 EL ISA。方法 ACTH1 - 1 3、ACTH1 - 2 8、ACTH 1 - 39和 ACTH1 8- 39分别与牛血清白蛋白偶联制备免疫原 ,在背部皮下和腹腔注射免疫 BAL B/ c鼠。按常规方法进行细胞融合 ,以 RIA法检测培养上清液 ,阳性孔经亚克隆 ,获得 2株分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株 ;瘤细胞种于预致敏的BAL B/ c鼠腹腔 ,批量生产单抗性腹水 ;琼脂扩散法鉴定抗体类型 ;利用标准曲线的参数计算单抗的亲合常数 ;亲合纯化单抗并进行抗体固化试验。结果从 ACTH1 - 2 8免疫鼠获得单抗株为 5 G2 ,从 ACTH1 - 1 3免疫鼠获得单抗株为 D3 ;单抗腹水 5 0 %结合率时腹水最终稀释度分别为 5× 10 3和 2× 10 3;抗体类型均为 Ig G1/λ;5 G2和 D3亲合常数分别为 5 .1× 10 9L M- 1 和 4 .9× 10 7L M- 1 ;抗体包被实验显示 5 G2和 D3的固化抗体量分别为 1.4μg和 8.8μg时结合率达到饱和。结论 5 G2和 D3可以用于构建灵敏的 ACTH- IRMA或 EL ISA。  相似文献   
3.
目的探讨不同温度、不同时段的贮存条件对全血HbA1c测定结果的影响。方法用离子交换高效液相色谱法检测全血HbA1c。取60例全血新鲜样本,每样本分装成15份,1份作为新鲜样本标准当天检测;5份4℃贮存,分别于3d、1周、2周、3周、4周后取出检测;3份-20℃、3份-40℃、3份-80%贮存,分别于1、3、6个月后取出检测,比较各个贮存条件下结果的平均值。结果4℃样本2周内的结果略高于当日结果2.5%左右,从第3周开始逐渐下降,第4周低于当日结果7.2%。-20℃、-40℃、3和6个月的结果都比当日结果低,且随时间延长有逐渐降低的趋势;除-80%冻存1个月的结果与当日结果差异无统计学意义(P〉0.05)外,其余各组结果与当日结果比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。-80℃冻存1、3和6个月的结果都比当日结果略高,且随时间的延长结果略有升高,偏离当日结果的程度要比-20℃、-40℃偏离程度小。结论在相同温度条件下贮存时间越短贮存温度越低HbA1c越接近当日结果;贮存温度对结果的影响要比贮存时间更大。-80℃贮存1个月是本实验显示的最佳贮存条件。  相似文献   
4.
目的 探讨糖化血红蛋白(HbA1c)检测对老年人群不同糖代谢异常状态的临床价值.方法 选取1365名老年受试者(其中男550名,女815名,年龄53~93岁)进行口服糖耐量试验(OGTT)和HbA1c检测.根据OGTT结果分为正常糖耐量(NGT)、空腹血糖受损(IFG)、糖耐量受损(IGT)、IFG合并IGT(IFG/IGT)和糖尿病(DM)5组,通过单因素方差分析比较各组HbA1c值、计算95%可信区间并绘制受试者ROC曲线,对各组HbA1c与空腹血糖(FPG)和OGTT2h血糖(2hPG)进行线性相关分析.结果 HbA1c(%)DM组(6.60±1.18)明显高于其余4组(均P<0.01),IFG组(5.74±0.44)、IGT组(5.67±0.38)、IFG/IGT组(5.87±0.43)分别明显高于NGT组(5.51±0.32)(P<0.01).各组HbA1c 95%可信区间为DM(≥5.4单侧)%、IFG(5.1~6.5)%、IGT(4.9~6.4)%、IFG/IGT(5.2~6.8)%、NGT(≤6.0单侧)%,HbA1c 在 DM 组的 ROC 曲线最佳切点为5.9%,灵敏度84%,特异度62%,曲线下面积0.808,在NGT组的ROC曲线最佳切点为5.6%,灵敏度63%,特异度68%,曲线下面积0.709.DM 组HbA1c分别与FPG(r=0.866,P<0.01)和2hPG(r=0.657,P<0.01)存在着明显的正相关;IFG组HbA1c只与FPG(r=0.325,P<0.01)存在正相关;IGT组HbA1c(r=0.275,P<0.01)只与2hPG存在正相关;NGT组HbA1c只与FPG(r=0.207,P<0.01)存在正相关性.结论 HbA1c水平能够正确地反映正常糖代谢、糖调节受损和糖尿病3种不同糖代谢状态的血糖水平,是区分3种糖代谢状态的有用指标.  相似文献   
5.
目的 研究中国北方汉族人 2型糖尿病视网膜病变 (DR)的易感性与醛糖还原酶 (AR)基因启动子区C 10 6T多态性的相关性 ,并探讨此多态性与AR基因 5′端 (AC)n多态性的连锁关系。 方法  2型糖尿病 (T2DM)患者 116例 ,分为无微血管并发症 (NDC)组和糖尿病视网膜病变 (DR)组 ,提取外周血基因组DNA ,经PCR后用限制性内切酶BfαⅠ 5U进行酶切 ,酶切产物于 3 %琼脂糖凝胶电泳 ,用紫外凝胶成像系统GDS 76 0 0S观察结果。 结果 NDC组和DR组患者均发现 2种等位基因C T ,三种基因型CC、CT和TT ,CC基因型频率在DR组明显高于NDC组 ( 6 4.0 %vs 43.9%,P <0 .0 5 ) ,CT基因型频率在DR组明显低于NDC组 ( 30 %vs 5 4%,P <0 .0 1) ;Z - 2 C单倍型频率在DR组明显高于NDC组 ( 37.0 %vs 3 .0 %,P <0 .0 1) ,Z +2 C和Z +2 T单倍型频率在DR组明显低于NDP组 ( 11.0 %vs 42 .0 %,P <0 .0 1;2 .0 %vs 14.0 %,P <0 .0 5 )。 结论 CC基因型可能增加DR易感性 ,CT基因型可能减低DR易感性 ,且该多态性位点可能与AR基因 5′端 (AC)n多态性之间存在连锁不平衡。  相似文献   
6.
为探讨曲格列酮(troglitazone,TGZ)对人卵巢颗粒细胞芳香化酶(P450arom)活性的调节作用,以不同剂量的TGZ和(或)维甲酸类X受体(RXR)激动剂(LG100268,LG)处理来源于体外受精患者的卵巢颗粒细胞24h,然后测定细胞的芳香化酶活性和P450arom mRNA水平。结果发现,TGZ处理颗粒细胞24h可引起剂量依赖性的芳香化酶活性下降;LG单独作用可以抑制芳香化酶活性,但与TGZ合用对芳香化酶的抑制作用更明显;RT-PCR结果显示,随着芳香化酶活性的下降,P450arom mRNA表达水平也降低。表明TGZ可能是通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ):RXR异二聚体组成的核受体系统直接抑制卵巢颗粒细胞芳香化酶活性。  相似文献   
7.
不同糖调节受损人群血糖波动与氧化应激的相关性分析   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的 采用动态血糖监测系统研究不同糖调节受损人群的血糖波动与氧化应激的相关性.方法 2008年1月至7月选取北京地区稳定人群66名,根据美国糖尿病学会(ADA)2003年标准分为正常糖耐量组(13例),糖尿病前期组(17例),2型糖尿病组(36例);所有受试对象均行72 h动态血糖临测,选取平均血糖波动幅度评价血糖波动情况;其间第48~72小时留取24 h尿,采用酶联免疫吸附法检测8-异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)评价氧化应激水平.2型糖尿病组给予"重组赖脯胰岛素25"强化治疗12周,其间定期随访、指导生活方式干预并调整胰岛素用量.对干预前、后血糖波动、氧化应激和各项代谢指标的变化行方差分析,并对其影响因素行相关分析及多元逐步回归分析.结果 (1)基线时2型糖尿病组24 h尿游离8-isoPGF2α分泌率(8-isoPGF2α/Cr)为(1706±477)pg/mg,与糖尿病前期组[(216±65)pg/mg]和正常糖耐量组[(269±60)pg/mg]比较升高690%和534%,差异有统计学意义(F=27.304,P<0.05);2型糖尿病组平均血糖波动幅度(MAGE)为6.04 mmol/L,与糖尿病前期组[(2.7±1.2)mmol/L]和正常糖耐量组[(1.7±0.5)mmol/L]比较升高124%和249%,差异有统计学意义(F=67.729,P均<0.05).(2)2型糖尿病组经"重组赖脯胰岛素25"干预后,24 h尿8-isoPGF2α/Cr、MAGE、糖化血红蛋白、甘油三酯与干预前比较分别降低34.53%,31.81%,18.50%,28.79%,差异有统计学意义(F值分别为6.108、18.378、39.322、5.942,P均<0.05);此外,收缩压、舒张压、空腹血糖、餐后2 h血糖与干预前比较显著下降(F值分别为7.879、11.684、38.952、61.207,P均<0.01).(3)Pearson相关分析显示24 h尿8-isoPGF2α/Cr与MAGE呈显著相关(r=0.593,P<0.01);与空腹血糖(r=0.415,P<0.01)、餐后2 h 血糖(r=0.472,P<0.01)、高密度脂蛋白胆固醇(r=-0.307,P<0.01)、甘油三酯(r=0.296,P<0.01)、收缩压(r=0.268,P<0.05)显著相关;而与糖化血红蛋白无相关(r=0.186,P>0.05).(4)以24 h尿8-isoPGF2α/Cr为因变量,以上述与其有相关性的变量为自变量进行多元逐步同门分析,只有MAGE和高密度脂蛋白胆固醇进入最终方程(决定系数r2分别为0.354、0.346,P均<0.01);偏相关分析与卜述结果 一致.结论 (1)2型糖尿病组与正常糖耐昔组、糖尿病前期组比较血糖波动幅度大,氧化应激水平高;(2)2型糖尿病氧化应激活化程度与血糖波动和部分血脂代谢相关;(3)经胰岛素强化干预后,血糖波动幅度下降,氧化应激反应减轻.  相似文献   
8.
目的 探讨诊断2型糖尿病时糖化血红蛋白(HbA1c)的参考值,并对比分析糖化白蛋白(GA-L)和HbA1c对于诊断2型糖尿病的灵敏度和可靠性.方法 509例疑似2型糖尿病患者(男268例,女241例),以2003年美国糖尿病学会(ADA)标准为诊断标准.通过绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),分析比较GA-L及HbA1c诊断糖尿病的灵敏度和特异性.结果 HbA1c的ROC曲线的最佳切点为6.75%,灵敏度75.5%,特异度93.2%,曲线下面积0.886,阳性似然比5.45,阴性似然比0.23,阳性预测值92%,阴性预测值70%.GA-L的ROC曲线的最佳切点为17.45%,灵敏度70.1%,特异度91.6%,曲线下面积0.844.当HbA1c≥6.75%时诊断的准确性为94.9%,而GA-L≥17.45%时诊断的准确性为93.3%.结论HbA1c≥6.75%和GA-L≥17.45%可作为诊断2型糖尿病的一种参考方法,且HbA1c的灵敏度和特异度优于GA-L.  相似文献   
9.
目的初步建立1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)在健康人群中的参考范围,并探讨1,5-AG与短期血糖控制水平的相关性。方法2010年3至7月在北京古城和苹果园社区及解放军总医院门诊体检人群筛选不同年龄健康受试者281名,其中男143名,女138名,年龄20-87岁,用酶偶联-两点法测定空腹血清1,5-AG,建立1,5-AG的正常参考值。同期随机选取门诊2型糖尿病(T2DM)患者38例,其中男女各19例,年龄37-74岁,给予重组赖脯胰岛素25治疗12周,每周规律监测餐前、餐后2h指尖血糖用以计算平均血糖(MBG),测定0、2、4、8、12周的1,5-AG、糖化血红蛋白(HbAlc)和糖化血清白蛋白(GA),比较各阶段不同血糖监测指标的变化,并行Pearson相关分析。结果健康人群的参考值范围:整体人群68-251μmol/L;男性80-267μmol/L,女性66-206μmol/L。健康人群1,5-AG水平号性别有关,男性高于女性;与年龄、体质指数(BMI)均无关。T2DM患者中,1,5-AG、HbAlc、GA与MBG均呈显著相关性(r=-0.491、0.563、0.422,均P〈0.01);1,5-AG与2周内的MBG相关性最高(r=-0.675,P〈0.01),HbAlc与MBG的相关性维持时间最长。2周时1,5-AG升高了18.8%,而HbAlc和GA只分别降低了3.2%、6.2%。到12周,1,5-AG变化幅度为65.2%,仍明显高于HbAlc、GA的降低率(16.1%、21.1%)。T2DM患者个体的1,5-AG、HbAlc、GA、MBG随时间变化的一致性较好。结论1,5-AG的正常参考值:整体人群68-251μmol/L;男性80。267μmol/L,女性66-206μmol/L;1,5-AG作为短期血糖控制程度的标志,可能优于HbAlc和GA。  相似文献   
10.
目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对小鼠3T3-L1脂肪细胞合成白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法脂肪细胞诱导至90%成熟,随机分为5组:对照组,脂多糖(LPS)组,LPS+替米沙坦组,其中替米沙坦设0.1μg/ml、1μg/ml和10μg/ml 3个浓度梯度。对照组中加DMSO,LPS+替米沙坦组中加不同浓度替米沙坦,孵育2h后,再向LPS组和LPS+替米沙坦组加入LPS(1μg/ml),与替米沙坦共同孵育细胞1h。酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组IL-6和TNF-α的蛋白分泌水平,Q-PCR检测各组IL-6和TNF-αmRNA基因表达。结果脂多糖处理后IL-6分泌较对照组增加约2.7倍,IL-6mRNA表达增加4倍。替米沙坦干预后各组IL-6浓度较脂多糖组均明显下降,10μg/ml组降低67%,IL-6mRNA表达随替米沙坦浓度升高而下降,10μg/ml组下降约63%。此外,与对照组相比,脂多糖处理组TNF-α分泌增加1.3倍,其mRNA表达增加3.5倍,替米沙坦干预后,各组TNF-α蛋白分泌及mRNA表达均较脂多糖组明显降低,大剂量替米沙坦干预后(10μg/ml),TNF-α蛋白分泌下降约85%,mRNA表达下降约23%。结论替米沙坦通过影响脂肪细胞炎性因子的产生发挥抗炎作用,10μg/ml大剂量时作用尤为明显。  相似文献   
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