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目的 探讨人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因P1启动子区域CA微卫星多态性对启动子活性的影响.方法 收集131名健康中国人的血液样品,提取基因组DNA并进行基因扫描分析,测定人IGF-Ⅰ基因P1启动子区域CA微卫星多态性并计算其频率分布.通过PCR方法扩增含有不同长度CA微卫星的P1启动子单体型片段,插入至缺少启动子的pGL4.10质粒载体上的荧光素酶报告基因的上游.通过双荧光素酶报告基因分析法测定含不同长度CA微卫星的P1启动子单体型的活力,比较CA微卫星多态性对P1启动子活性的影响.结果 共发现9种CA微卫星多态性,分别为13CA、16CA、17CA、18CA、19CA、20CA、21CA、22CA和23CA,其中分布频率大于5%的有17CA、18CA、19CA、20CA和21CA多态性,分布频率最高的为19CA多态性.双荧光素酶报告基因分析结果表明,P1启动子单体型之间存在活力差异,其中16CA启动子单体型的活力最高,21CA启动子单体型的活力最低.结论 人IGF-Ⅰ基因P1启动子区域CA微卫星多态性能够影响P1启动子的活性. 相似文献
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目的探讨人胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因P1启动子区域单核苷酸多态性(SNP)-705T>C和-603T>A对启动子活性的影响。方法招募152名健康志愿者参与本研究,取静脉血样品,使用基因组DNA提取试剂盒从血样中提取全基因组DNA。通过限制片段长度多态性分析(RFLP),对每名志愿者的SNP-705T>C和-603T>A进行基因分型,统计各基因型的频率。使用PHASE v2.1软件程序分析P1启动子单体型的类型和频率。通过荧光素酶报告基因测定不同P1启动子单体型的活力差异。结果成功提取了每名志愿者的全基因组DNA并测定了SNP-705T>C和-603T>A的基因型。基因型-705T/T、705T/C、-705C/C的频率分别与-603T/T、-603T/A、-603A/A相同,分别为43.4%、45.4%、11.2%。等位基因-705T、-705C的频率分别与-603T、-603A相同,分别为66.1%、33.9%。SNP-705T>C和-603T>A之间存在完全的连锁不平衡,其组成的P1启动子单体型只有-705T/-603T和-705C/-603A两种,频率分别为66.1%和33.9%。报告基因分析结果表明,P1启动子-705C/-603A单体型的活力显著高于-705T/-603T单体型。结论人IGF-I基因P1启动子区域SNP-705T/C和-603T/A能够影响P1启动子的活性。 相似文献
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