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1.
目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对,设计特异性的引物探针,建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq (Probe qPCR) 10 μL,人参上下游引物各0.5 μL,西洋参上下游引物各0.3 μL,人参与西洋参特异性探针各0.4 μL,DNA模板2 μL,灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s;然后以95℃变性5 s,60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品,包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA,以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测,用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线,人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线,其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。 相似文献
2.
目的探讨门诊冷圈套切除术(CSP)治疗老年结直肠小息肉的安全性和有效性,为治疗该病症提供方法。方法回顾性分析2018年1月—2018年10月于复旦大学附属华东医院消化内镜行大肠小息肉切除的325例老年患者的临床资料,依据不同治疗方法分为CSP(冷圈套切除术)组(n=186)、HSP(热圈套切除术)组(n=94)和EMR(内镜下黏膜切除术)组(n=45);CSP组分为门诊亚组(n=68)和住院亚组(n=118)。评估并比较各组的手术操作时间、术中出血、术后出血、穿孔和完整切除率等情况。结果 CSP组有较低术中出血率和较短的手术操作时间(P<0.05);3组术后出血穿孔率和病理分型的差异无统计学意义(P> 0.05);CSP门诊亚组和住院亚组相比的术中出血率、术后出血率及穿孔率均无统计学差异(P> 0.05)。结论门诊CSP切除老年患者结直肠小息肉,具有较高的安全性和有效性、较高的完整切除率、较低的术中出血率、几乎为0的术后出血和穿孔率,手术时间更短,手术费用较低,具有一定的临床应用价值。 相似文献
3.
目的通过检测窝儿七中槲皮素、4′-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素、山柰酚4个活性成分的含量来观察不同年限窝儿七中主要成分变化。方法采用高效液相色谱法对窝儿七中槲皮素、4′-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素、山柰酚四种化学成分的含量进行测定。结果 1年至8年生窝儿七药材中,鬼臼毒素在不同年限窝儿七药材中含量均最高,六年生的药材中槲皮素、4′-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素、山柰酚四种化学成分的综合含量最高。结论通过实验研究,六年生的窝儿七主要成分含高较高,质量最佳,为药材的栽培与应用以及质量规范的制订,提供理论和试验依据。 相似文献
5.
摘要:目的:建立HPLC法同时检测肺癌患者血浆中吉非替尼和奥希替尼的血药浓度。方法:色谱柱:Waters X-bridge C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈:5 mmol·L-1磷酸二氢钾(pH 4.0,含0.3%三乙胺)=32∶68(V∶V);检测波长:251nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃;内标为埃克替尼。血浆样品经乙酸乙酯液液萃取后进样测定。结果:血浆中吉非替尼和奥希替尼分别在0.062 75~2.51μg·ml-1和0.063 25~2.53μg·ml-1内呈良好的线性关系(r>0.999),方法的回收率为95%~110%,RSD均小于11%,方法的提取回收率均高于85%,所有稳定性考察均符合要求。应用该方法对10例肿瘤科使用奥希替尼和吉非替尼治疗的肺癌患者进行血药浓度监测,结果表明奥希替尼平均谷浓度为(0.206±0.098)μg·ml-1,吉非替尼平均谷浓度为(0.571±0.206)μg·ml-1。结论:该方法简便准确,专属性高,可用于临床上吉非替尼和奥希替尼的治疗药物监测,为促进其临床个体化用药提供技术支撑。 相似文献
6.
目的建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时检测痰液中3种药物异烟肼(isoniazid,INH)、左氧氟沙星(levofloxacin,LFX)和吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)浓度的方法,冒在为实现临床个体化用药提供帮助。方法痰液样品离心后经甲醇/乙腈蛋白沉淀法预处理后进样液质联用仪进行分析。实验采用的流动相A为含0.1%甲酸的水溶液,流动相B为含0.1%甲酸的乙腈;流速0.35mL·min^-1;采用ACQUITY UPLAC HSS T31.8μm column(2.1mm×100mm,Waters公司)分离;采用电喷零电离源,采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式对待测物进行正离子扫描检测。此外,本试验盲态收集5例患者的痰液,用该法进行定量分析。结果测得痰液中INH、PZA和LFX分别在48~6000 ng·mL^-1(r=0.9988)、480~60000 ng·mL^-1(r=0.9993)、120~15000 ng·mL^-1(r=0.9995)内表现出良好的线性关系。INH、PZA和LFX 3种药物的日内和日间精密度均低于15%,且3种药物的提取回收率均处于97.21%~107.80%之间。7例受试者体内均检测到药物INH,质量浓度分别为44.74、120.1、301.5、481、595.5、1220及1570 ng·mL^-1;PZA的质量浓度分别为104.2、6273.34和3185 ng·mL^-1;1例受试者检出LFX,质量浓度为199.86 ng·mL^-1。结论本试验建立了痰液中INH、PZA及LFX的检测方法,具有灵敏度高、测定结果准确、快速等诸多优点,可以应用于临床治疗药物的监测。 相似文献
7.
生活中我们常常会健忘,下楼了再返回楼上看看房门锁好没有,做饭会忘记关火,昨天发生的事情今天就不记得了……这些生活情景常常会使我们焦虑,甚至会怀疑自己是不是得了老年痴呆症。从狭义的角度来讲,老年痴呆症通常指的是阿尔茨海默病,是指老年人大脑功能逐步退化,出现记忆力下降、智能低下、语言障碍、情感异常等症状,严重者生活不能自理。 相似文献
8.
目的 探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对肥胖症患者皮下白色脂肪组织的米色化的影响,为治疗肥胖症提供新的途径。 方法 选取择期手术的24例肥胖症患者皮下白色脂肪组织,分离脂肪组织基质细胞并进行成脂诱导分化,在诱导分化后期加入不同浓度的罗格列酮干预,根据干预方式的不同分为对照组、Rosi-1组(加入1 μmol/L罗格列酮)和Rosi-2组(加入2 μmol/L罗格列酮)。通过实时定量PCR法以及Western blotting法检测各组脂肪细胞中解偶联蛋白(UCP1)及米色脂肪细胞特异性产热基因的表达。通过比色法检测细胞培养液中甘油释放浓度来评估干预对脂肪细胞脂解功能的影响。 结果 加入罗格列酮干预后,Rosi-1组和Rosi-2组成熟脂肪细胞表现多脂滴外形,UCP1蛋白(t=23.12,P<0.01;t=7.35, P<0.01)和米色脂肪细胞特异性产热基因UCP1(t=2.63, P=0.03;t=9.86, P<0.01)、PPARγ(t=2.8, P=0.02;t=11.06, P<0.01)和PR16结构(PRDM16)基因(t=2.65, P=0.02;t=12.85, P<0.01)表达水平在Rosi-1组和Rosi-2组中均较对照组上调,且Rosi-1组(t=2.76, P=0.02)和Rosi-2组(t=5.83, P<0.01)的脂解能力较对照组增强。 结论 PPARγ激动剂可提高肥胖症患者白色脂肪组织的米色脂肪细胞的分化,从而促进白色脂肪组织的棕色化,选择性作用于脂肪组织的PPARγ激动剂的研发可以为肥胖症治疗提供新的途径。 相似文献
9.
目的观察补气活血生发酊对小鼠雄激素性脱发的影响。方法利用丙酸睾酮注射KM小鼠建立雄激素性脱毛模型,小鼠随机分为空白组、模型组、米诺地尔擦剂组及补气活血生发酊低、中、高剂量组,每日涂抹相应药物1次,连续30 d。肉眼及毛发镜观察小鼠毛发脱落情况,HE染色观察小鼠病理组织及毛囊相关指标,测定小鼠血清睾酮、雌二醇以及HGF水平,免疫组化及Western blot法检测HGF蛋白表达。结果补气活血生发酊可使雄激素性脱毛模型小鼠毛发脱落减少,降低血清睾酮水平(P<0.01),升高E2、HGF水平(P<0.05)。结论补气活血生发酊具有一定促进毛发生长的作用,其育发机制可能与调节雄性激素水平有关。 相似文献
10.