限制性显示技术在制备丙型肝炎病毒分型芯片探针的应用性研究

目的探讨限制性显示(restriction display,RD)技术在制备丙型肝炎病毒(HCV)分型芯片探针的可行性.方法用限制性内切酶Sau3A I消化HCV1a、1b、2a亚型全长cDNA,所得的限制性内切酶片段与通用接头相连,通过10个选择性引物进行分组PCR,使得各片段得以扩增并分布于10个亚组中,经聚丙烯酰胺电泳(PAGE)结合银染法进行分离.切胶回收后作3次PCR,得到较纯净的HCV cDNA限制性片段.对这些片段做分子克隆,并测序鉴定.结果由HCV 3个亚型1a、2a、1b的全长cDNA得到66个大小相对均一(200～900bp)的限制性片段,平均每个亚型约22个.测序结果表明,属于HCV基因,可以作为HCV分型芯片的探针.结论RD技术能快速收集大量长度适宜、大小均一的病毒基因片段,适合于分型诊断基因芯片探针的收集.     

联合手术治疗增生型糖尿病视网膜病变合并白内障的临床观察

目的观察玻璃体手术联合白内障超声乳化术治疗增生型糖尿病视网膜病变(PDR)合并白内障的临床疗效。方法 2006年1月～2009年1月,对我科收治的48例(54眼)PDR合并不同程度白内障患者行白内障超声乳化联合玻璃体手术,观察术后视力改善程度及并发症。结果 51眼(94.44%)视力有不同程度提高,视力下降3眼(5.56%)。联合手术本身引起的最常见并发症包括虹膜新生血管(2眼)和后发性白内障(7眼)。结论玻璃体手术联合白内障超声乳化术治疗PDR合并白内障安全、有效。     

替奈替普酶对增值型糖尿病视网膜病变玻璃体手术的辅助作用

目的评价替奈替普酶（tenecteplase,TNK-TPA）玻璃体腔注射对增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）患者增殖膜的溶解、分离作用和对视网膜组织的毒副作用。方法将PDR患者54例55只眼随机分成研究组29例30只眼,对照组25例25只眼。研究组于常规玻璃体切除术前3d,玻璃体腔内纤维增殖膜与视网膜的交界面区注射TNK-TPA50μg/0.1ml;对照组为空白对照。注药前后和玻璃体切除手术后均检查视力、裂隙灯显微镜、双目间接检眼镜、B型超声和标准视网膜电流图（ERG）,随访6个月。结果研究组5只眼在注药后发生了完全性玻璃体后分离,增殖膜-视网膜粘连点松解率、术后6个月视力增长幅度、一次手术视网膜复位率均较对照组高（P〈0.05）;医源性视网膜裂孔发生率较对照组低（P〈0.05）;注药前后b波波幅未见明显变化。结论 50μg/0.1ml TNK-TPA可有效的溶解、分离PDR中的纤维增殖粘连,提高手术成功率,减少医源性视网膜裂孔发生率,有利于保护视功能,ERG显示未见视网膜毒性。     

相干光断层扫描在屈光与白内障手术相关检查中的应用

眼前节相干光断层扫描(OCT)可检测眼前节组织的解剖结构及其变化,获得前房直径、前房深度、角膜厚度、透明晶状体厚度及曲率半径、虹膜角膜角开放情况、晶状体穹窿和人工晶状体(IOL)间距、白-白角膜直径等眼前节生物测量参数,对进行LASIK、有晶状体眼IOL植入等屈光手术和白内障手术来说不可或缺。     

儿童痉挛发作的手术策略分析

背景 癫痫性痉挛(ES)是儿童最常见的发作类型之一.关于ES患儿手术疗效的数据却很少,ES既往被认为术后疗效不佳,此外,关于ES的电临床特征及其对术后疗效的影响尚不清楚.由于痉挛发作症状表现的对称性和癫痫发作起始放电的广泛性,致痫区定位困难,癫痫手术难度大.但最新研究表明,若选择适合手术条件的痉挛发作类型,可以达到和其...     

小鼠气性坏疽动物模型的建立

目的建立产气荚膜梭菌感染小鼠的后肢的气性坏疽动物模型,为早期诊断、了解气性坏疽的致病机理及治疗方法提供依据。方法小鼠随机分成4组,每组10只。三个实验组分别肌肉注射3.5×109、3.5×108和3.5×107cfu/ml浓度的产气荚膜梭菌(ATCC13124)菌液0.1ml,空白对照组肌肉注射生理盐水0.1ml,72h后观察小鼠感染情况,取伤口分泌物作革兰氏染色涂片,细菌血平板厌氧培养和荧光定量PCR方法定量检测。结果 3.5×109、3.5×108、3.5×107cfu/ml实验组和对照组在肌肉注射72h内的死亡率为90%、70%、10%和0%。各组平均存活时间依次为(20:43±11:12)h、(37:24±25:39)h、(68:36±10:45)h和(72:00±0:00)h,死亡小鼠出现了气性坏疽的症状,分泌物培养和镜检出产气荚膜梭菌;未死亡小鼠康复;空白对照组无任何症状。各组Ct值均值为21.21±2.69、28.45±2.74、32.49±2.87和0.00±0.00,组间P值均<0.05。结论成功建立了不同浓度的产气荚膜梭菌在不同时间段内感染小鼠的后肢气性坏疽的动物模型,为了解气性坏疽的致病机理及治疗方法奠定基础。     

人工智能助力检验医学发展

2017年以来,中国、美国和欧盟先后发布了国家级人工智能（AI）战略发展规划,人类历史即将迎来以“智能化”为主旋律的第四次工业革命。在医疗检验领域,人工智能的理论和技术爆发也将为医学检验理论、方法与应用的发展提供新方向,本文首先从人工智能的理论与实践基础出发,介绍人工智能的发展历程以及算法、数据和算力三大要素的前沿进展,进而结合医学检验的关键应用维度,阐述“AI+检验”的结合创新,包括涉及检验标本处理的标本采集机器人、样本稀释机器人和样本传送机器人;检验项目挖掘如肿瘤标志物和药物基因组学;检验细胞形态学、检验数据处理、辅助诊断模型和互联网医学检验等。随着工业4.0时代的到来,人工智能技术必将推动医学检验从自动化发展到更高阶的智能化阶段。     

乙型、丁型肝炎病毒诊断基因芯片制备的初步实验研究

目的 制备联合检测乙型、丁型肝炎病毒基因芯片并进行杂交验证。方法利用Primer 5.0软件分别针对乙型、丁型肝炎病毒基因保守区域设计多对PCR引物，纯化PCR扩增产物，扩增后的产物克隆至pMD18-T载体，提取阳性克隆质粒进行测序分析及鉴定。用芯片点样仪将PCR产物点到玻片上制备成基因芯片。样品标记采用限制性显示技术，样品标记后进行杂交。结果运用PCR技术，得到多个乙型、丁型肝炎病毒特异性基因片段。序列分析表明，所扩增的片段均属于HBV、HDV特异基因。杂交结果显示，样品和乙型、丁型肝炎诊断基因芯片杂交的敏感性和特异性均佳。结论利用PCR扩增产物制备乙型、丁型诊断基因芯片是一种快速、简便的实用方法，有着广阔的应用前景。另外，利用限制性显示技术标记样品可为进一步更多种肝炎病毒的混和检测奠定基础。     

癫痫患者先兆症状的临床定位意义

目的 探讨癫痫患者先兆症状的临床定位意义。方法 31例癫痫患者按照有无先兆分为有先兆组(n=19)和无先兆组（n=12）,采用独立样本t检验比较两组之间的发病年龄差异有无统计学意义。采用x2检验比较两组之间患者的头颅MRI的异常率及手术有效率差异有无统计学意义。结果 有先兆组的19例患者,分别为精神症状、自主神经症状、躯体感觉、视觉、听觉、头晕共6种先兆,术后先兆症状均消失,以上6种先兆可分别定位于颞叶、颞叶、对侧顶叶或颞叶、枕叶或颞叶、对侧颞叶、颞顶叶。两组间患者的首次发病年龄差异、头颅MRI的异常率差异均无统计学意义。有先兆组和无先兆组患者的手术有效率（分别为15/19和5/12）差异有统计学意义(x2=4.456,P=0.035)。结论 先兆具有一定的定位意义,可以协助判断致痫灶的起源部位,指导外科手术治疗。     

结节性硬化症的癫痫手术治疗对发作及智力影响的研究

目的：探讨结节性硬化症TSC患者手术治疗癫痫对其远期疗效及智力的影响。方法：回顾性分析经手术治疗的9例伴癫痫的TSC患者的临床资料,总结发作症状学、EEG及头颅MRI的特点,随访远期发作的控制情况及智力水平。结果：术后随访24～30个月（平均26．1个月）,EngleI级8例,EngleIV级1例。8例手术治疗有效的患者中,5例智力水平显著提高,IQ平均增高18．2,手术时平均年龄为5．7岁。3例无明显变化,IQ平均增高2．3,手术时平均年龄为20．3岁。结论：在一部分TSC患者,当发作症状、MRI上的结节的部位、EEG痼样放电的部位一致时,手术治疗能有效的控制发作。手术时年龄较小的患者随发作的控制智力改善明显。