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1.
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目的研制一种用于检测口腔常见无芽胞厌氧性细菌感染的基因芯片。方法选择口腔感染中常见的无芽胞厌氧性细菌作为菌种,将16S rDNA作为靶基因。借助生物信息学方法,设计通用引物和特异性探针,选择与反义引物互补的核酸序列作为阳性质控探针;大肠杆菌16S rDNA基因序列为阴性质控探针,制备微阵列。进行厌氧性细菌DNA的提取、扩增、杂交、结果分析以及微阵列质量检测。结果制备的用于检测口腔常见无芽胞厌氧菌感染的基因芯片特异性、灵敏度、重现性和稳定性均符合实验要求。结论利用生物信息学方法设计的引物和探针合理,制备的芯片可用于口腔常见无芽胞厌氧性细菌感染的诊断。 相似文献
3.
对栅藻延迟发光定量化表征中药寒热药性的方法进行优化,并进行方法学验证。用YPMS-2生物光子测量仪检测栅藻激发延迟发光强度,对测得的激发延迟发光强度用Statistica 10.0软件进行线性拟合,得到表征栅藻性质的可靠参数K,用产自于道地产地的经典寒性中药黄芩作为样本,验证本研究方法的精密度、稳定性、重复性,并进行空白实验。栅藻最佳使用K值波动范围是2.81~3.89,本研究方法精密度高,重复性、稳定性良好,空白溶剂无干扰。 相似文献
4.
5.
重组人成骨蛋白-1的纯化及其生物学活性研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 获得高纯度的重组人成骨蛋白-1(rhOP-1),探讨大肠杆菌表达rhOP-1的生物学活性。方法 表达rhOP-1工程菌经发酵后,裂菌、提取包涵体,层析法纯化蛋白并逐步降低尿素浓度透析复性。采用改良MTT法检测rhOP-1对NIH3T3细胞增殖和对硝基苯酚法(PNPP)检测rhOP-1对细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,同时在体内通过小鼠肌袋埋植实验测定rhOP-1活性。结果 经纯化的rhOP-1纯度可达98%。体外rhOP-1浓度在0.06~6μg/ml可明显促进细胞生长和ALP活性;体内rhOP-1埋植剂植入小鼠肌间隙2周后,可明显提高体内钙含量,且成骨趋势明显。结论 原核表达的rhOP-1具有良好的生物学活性。 相似文献
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8.
目的探索体内埋植组织工程材料方法获取成体干细胞的相关影响因素。方法BALB/c小鼠随机分为2组,分别埋植经环氧乙烷灭菌的明胶海绵与聚乳酸,在植入后第3、7、14天时分别取出材料,HE染色观察细胞捕获情况。将埋植相同质量明胶海绵的小鼠随机分为成骨蛋白-1(OP-1)组、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组和对照组,在植入后第3、6、9、12、15天时分别取出材料,称取质量并进行细胞计数,采用流式细胞术检测第12天时分离获得的各组细胞表面CD34和干细胞抗原-1(Sca-1)的阳性表达率。另取第12天时分离获得的对照组细胞,分为OP-1组、G—CSF组和空白对照组,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性。结果HE染色显示,明胶海绵与聚乳酸捕获的细胞数量均随时间延长而增加。各组植入的明胶海绵质量均随时间延长而减少,而捕获细胞数量均随时间延长而增加,OP-1组第9、12、15天和G.CSF组第9天时捕获细胞数量分别与对照组相比均有统计学意义(均P〈0.05):OP-1组细胞表面CD34、Sca-1单阳性表达率和双阳性表达率(分别为13.07%±0.19%、3.98%±0.15%、17.02%±0.12%)均明显高于对照组(分别为11.62%±0.44%、3.03%±0.11%、2.91%±0.14%,均P〈0.05),G—CSF组细胞表面CD34、Sca-1单阳性表达率(分别为12.79%±0.39%、4.52%±0.35%)分别与对照组相比均无统计学意义,但双阳性表达率(10.21%±0.15%)与对照组相比有统计学意义(P〈0.05)。MTT检测结果显示,OP-1组和G-CSF组各时间点测定的吸光度值均高于空白对照组(均P〈0.05)。结论通过体内埋植复合OP-1明胶海绵的方法可增加干细胞的捕获数量,为建立一种简易提取自体干细胞的新方法奠定了基础。 相似文献