人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2双基因共表达腺病毒载体的构建及鉴定

背景:内部核糖体进入位点序列载体能将上下游基因共同转录,故通过此载体可使连接在一起的人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2同时高表达,可为骨缺损的治疗提供新方法.目的:实验通过引入内部核糖体进入位点序列,采用基于attLXattR的λ噬茵体位点特异性重组系统的GatewayTM技术构建带有人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2双基因重组腺病毒载体并进行鉴定.方法:用聚合酶链反应方法扩增人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2目的基因,将两个基因亚克隆至pIRES2-EGFP载体中,构建phBMP2-IRES-hFGF2载体,通过BP反应将hBMP2-IRES-hFGF2重组到载体pDONR221中,再通过LR反应将其转移到腺病毒载体pAd/CMV/V5-DEST中,线性化后转染293细胞进行包装获得重组腺病毒Ad-hBMP2-IRES-hFGF2.结果与结论:phBMP2-IRES-hFGF2经酶切及测序鉴定正确,带hBMP2-IRES-hFGF2的载体在293细胞中包装成功,获得成熟的病毒颗粒,病毒滴度为2.82×1010 ifu/mL,证实成功构建了带有人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2双基因重组腺病毒载体.     

脊神经鞘瘤发病的遗传学及下游分子机制研究进展

神经鞘瘤起源于雪旺细胞,故又名雪旺细胞瘤（schwannoma、neurinoma、neurilemmoma）,其起病隐匿,病程缓慢,是脊髓良性肿瘤中最常见的类型[1]。好发于30-50岁,无明显性别差异。神经鞘瘤分类较复杂,根据肿瘤是否具遗传性可分为非家族性和家族性,前者包括前庭神经鞘瘤（vestibular schwannoma,VS）这一特殊类型;后者常表现为多发病灶,故命名为神经鞘瘤病（schwannomatosis）,属于神经纤维瘤病家族中甚少见的一种类型[2]。     

人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2双基因共表达腺病毒载体的构建及鉴定

背景：内部核糖体进入位点序列载体能将上下游基因共同转录,故通过此载体可使连接在一起的人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2同时高表达,可为骨缺损的治疗提供新方法。 目的：实验通过引入内部核糖体进入位点序列,采用基于attLXattR的λ噬茵体位点特异性重组系统的GatewayTM技术构建带有人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2双基因重组腺病毒载体并进行鉴定。 方法：用聚合酶链反应方法扩增人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2目的基因,将两个基因亚克隆至pIRES2-EGFP载体中,构建phBMP2-IRES-hFGF2载体,通过BP反应将hBMP2-IRES-hFGF2重组到载体pDONR221中,再通过LR反应将其转移到腺病毒载体pAd/CMV/V5-DEST中,线性化后转染293细胞进行包装获得重组腺病毒Ad-hBMP2-IRES-hFGF2。 结果与结论：phBMP2-IRES-hFGF2经酶切及测序鉴定正确,带hBMP2-IRES-hFGF2的载体在293细胞中包装成功,获得成熟的病毒颗粒,病毒滴度为2.82×1010 ifu/mL,证实成功构建了带有人骨形态发生蛋白2和人成纤维细胞生长因子2双基因重组腺病毒载体。     

白细胞介素-1β对脊髓背角神经元体外存活的作用

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)所致截瘫是一种严重的伤残,目前仍缺乏有效的治疗手段。近年研究[1-3]发现损伤的脊髓组织中白细胞介素-1β(interleuke-1β,IL-1β)及其受体(IL-1βR)表达快速上调,然而其作用尚未明了。本实验旨在探讨IL-1β对脊髓神经细胞的存活的作用及其机     

肿瘤坏死因子-α对脊髓保护功能的电生理机制研究

目的：肿瘤坏死因子-α(TNF-α)具有脊髓保护功能，脊髓损伤后神经元Ca^2+通道开放加重钙超载导致细胞损伤，而TN-α与Ca^2+通道之间的直接关系尚未明确，为此研究TNF-α对大鼠脊髓背根神经节(DRG)感觉神经元细胞膜电压门控Ca^2+通道的电生理功能。方法：实验于2003-09／2004-01在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。实验采用酶解获得单个DRG细胞，采用标准全细胞膜片钳技术记录单一细胞分别在无药物干预和TNF-α10ng／L与μg／L条件下，依次给予单刺激，连续刺激和相关的双刺激时电压门控Ca^2+电流(ICa-L)．并分析对比电流形态、幅度、电流-电压曲线、最大电流的激活电压、反转电位和稳态灭活曲线形状的变化。结果：与用药前比较，TNF-α10ng／L和μg／L可显著性抑制ICa-L(P(0．01)，且两浓度间差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；但TNF-α对ICa-L电流-电压(I-V)曲线的形状、峰电流对应的电位和反转电位无明显影响，加速稳态灭活过程。结论：TNF-α抑制ICa-L，可能是机体通过TNF-α对损伤脊髓发挥保护功能的机制之一。     

突触形成影响因素的研究

突触是神经系统功能活动而且能够传递信息的结构基础,有功能的神经元间的信息传递必须要有成熟的突触结构。所以了解突触形成的相关因素及其作用机制对脊髓损伤的神经再生具有重大的意义。 突触形成发生在突触发育的早期,国内外学者研究证明许多因素可以促进突触的形成,突触的研究也越来越受到学者们的关注。本文就对突触形成的相关影响因素及其作用机制作一综述。     

后路半椎体切除椎弓根螺钉内固定治疗先天性脊柱畸形

目的：评价后方入路半椎体切除并椎弓根螺钉矫形固定椎间植骨融合术治疗先天性脊柱侧后突畸形的疗效。方法：2005年1月～2009年12月,我科收集17例先天性半椎体并脊柱侧突后突畸形患儿,男11例,女6例,平均年龄11.8岁。患儿接受后路半椎体切除＋椎弓根螺钉矫形固定＋椎间隙半椎体之骨颗粒植入融合术,手术固定2～8椎体,椎体手术后佩戴胸腰背支具6个月以上,测量并比较术前、术后1周及术后1年侧后突之Cobb角,从而评估手术效果。结果：本组患儿侧突主弯Cobb角术前平均64.2°,术后18.3°,矫正率为71.5%;后突主弯Cobb角术前平均57.1°,术后22.6°,矫正率为60.4%。术后无神经功能障碍或术区感染等并发症发生。术后3个月植骨达到骨性融合,而且代偿性辅弯减少,躯干平衡改善。结论：后方入路半椎体切除并椎弓根螺钉矫形固定椎间植骨融合术治疗先天性脊柱侧后突畸形可以达到满意的治疗效果,其中,短节段固定又可以保留较多的椎体生长和运动功能。     

骨科临床实习教学的实践和探索

骨科临床实习教学在外科教学中一直都占有比较重要的地位,为提高骨科临床实习教学效果,本文总结了骨科临床实习带教的实践经验,分别从完善骨科临床教学模式、补充骨科新进展、应用骨科教学警示病例及提高医学生医德修养等方面探讨了骨科临床实习教学的改进方法。     

骨形态发生蛋白2和成纤维细胞生长因子2在骨组织工程中的应用

背景：1995年Crane GM系统提出了骨组织工程的概念、研究方法、研究现状及发展前景后，骨组织工程日益成为学者们研究的重点。 目的：通过对1995年以来骨组织工程研究的进展的检索，探寻BMP-2和FGF-2在骨组织工程研究中的应用价值。 方法：以“bone tissue engineering，BMP，FGF， cytokine”为检索词，应用计算机检索中国知网和pubmed数据库相关文章，排除重复性研究，保留36篇文章做进一步分析。 结果与结论：骨组织工程的研究主要包括3个方面的内容：①种子细胞。②能引导组织再生的生物活性因子。③能够支持细胞黏附、增殖和分化以及释放生物活性因子的支架材料。细胞因子在骨组织工程中也拥有着不容忽视的重要地位，主要有有骨形态发生蛋白、骨转化生长因子、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子，胰岛素样生长因子、血小板衍生生长因子等。其中骨形态发生蛋白2和成纤维细胞生长因子2在骨组织工程领域中应用最为广泛。     

骨形态发生蛋白2和成纤维细胞生长因子2在骨组织工程中的应用

背景:1995年Crane GM系统提出了骨组织工程的概念、研究方法、研究现状及发展前景后,骨组织工程日益成为学者们研究的重点.目的:通过对1995年以来骨组织工程研究的进展的检索,探寻BMP-2和FGF-2在骨组织工程研究中的应用价值.方法:以"bone tissue engineering,BMP,FGF, cytokjne"为检索词,应用计算机检索中国知网和pubmed数据库相关文章,排除重复性研究,保留36篇文章做进一步分析.结果与结论:骨组织工程的研究主要包括3个方面的内容:①种子细胞.②能引导组织再生的生物活性因子.③能够支持细胞黏附、增殖和分化以及释放生物活性因子的支架材料.细胞因子在骨组织工程中也拥有着不容忽视的重要地位,主要有有骨形态发生蛋白、骨转化生长因子、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子,胰岛素样生长因子、血小板衍生生长因子等.其中骨形态发生蛋白2和成纤维细胞生长因子2在骨组织工程领域中应用最为广泛.