一体化急救在重型颅脑损伤救治中的应用价值

目的 探讨一体化急救在重型颅脑损伤救治中的临床应用价值.方法 对2011年1月～2012年9月诊治的112例重型颅脑损伤患者启用一体化救治方案（一体化急救组）,急救120负责院前急救,送入医院后由神经外科医师首诊负责,开通绿色通道,全程组织抢救.选择2010年1 ～12月收治的重型颅脑损伤患者158例作为常规组,采用传统救治方法.结果 一体化急救组112例重型颅脑损伤患者,随访3个月,死亡21例,植物生存20例,重度伤残18例,轻度伤残28例,恢复正常25例.与常规组比较,术前准备时间大大缩短（25 min vs 50 min,P＜0.05）,外伤性脑梗死发生率有统计学差异（9.8％ vs 19.0％,P＜0.05）,病死率有统计学差异（18.8％vs 32.2％,P＜0.05）,预后良好率有统计学差异（47.3％vs 33.5％,P＜0.01）.迟发性颅内血肿发生率无统计学差异（21.4％vs 20.2％）,肺部感染发生率无统计学差异（58.9％ vs 62.0％,P＞0.05）.结论 颅脑损伤一体化急救流程的建立,大大缩短了手术准备时间,降低了患者病死率,改善了患者生存质量.     

NF2基因及其蛋白merlin的生物学研究进展

NF2基因是一种瘤抑制基因,其失活可导致蛋白质的变性并可诱导肿瘤的发生。其编码的merlin蛋白与细胞的运动和增殖有着较密切的关系,磷酸化使merlin蛋白丧失了抑制肿瘤生长的能力。通过对NF2及merlin蛋白的研究,为研制抗肿瘤药物或干预的靶点提供其理论基础。     

立体定向血肿抽吸术治疗高血压脑出血的Meta分析

【目的】探讨小骨窗手术与立体定向血肿穿刺术治疗高血压脑出血的,临床治疗效果。【方法】全面检索万方全文数据库、维普中文科技期刊全文数据库、中国知网及CBMdise,对符合纳入标准的6个随机对照研究共计670例患者预后进行Meta分析。【结果】入选论文无发表偏倚,且具有高度同质性（P=0．73、0．72,I^2=0％）。小骨窗手术组与立体定向血肿抽吸组比较,患者远期恢复良好率差异无统计学意义,血肿抽吸组近期死亡率低于小骨窗组,而远期死亡率高于小骨窗组。【结论】立体定向血肿抽吸术及小骨窗手术治疗高血压脑出血均有效,二者对于高血压脑出血患者远期生活质量恢复无差异,中长期效果更倾向于小骨窗组取得较低死亡率,而短期效果更倾向于立体定向组取得较低的死亡率。但尚需要严格设计的、大样本的随机双盲对照试验采进一步验证和支持。     

Merlin蛋白结构及与其他分子的相互作用

NF2基因是一个重要的肿瘤抑制因子,其表达产物Merlin是至今被发现的第一种具有肿瘤抑制作用的蛋白质,通过与其他蛋白质直接或间接的相互作用,调控细胞运动和增殖等细胞活动。     

抑癌基因NF2突变子真核表达载体的构建与表达

目的:分别构建抑癌基因NF2的42位和47位点突变的2种真核表达载体,并在大鼠神经鞘瘤细胞RT4-D6P2T中诱导表达.方法:用定点突变法分别将pcDNA3.1-NF2第42位赖氨酸(Lys)突变为脯氨酸(Pro),第47位苯丙氨酸(Phe)突变为亮氨酸(Leu)构建2种NF2突变子(pcDNA3.1-NF2ΔLys42Pro和pcDNA3.1-NF2ΔPhe47Leu),将3 种NF2质粒用脂质体法分别转染RT4细胞,RT-PCR和Western印迹法分析NF2基因及蛋白表达,MTT法检测转染后RT4细胞的增殖情况.结果:测序证实定点突变成功,构建的重组真核表达载体pcDNA3.1-NF2ΔLys42Pro和pcDNA3.1-NF2ΔPhe47Leu均能表达相应的蛋白和mRNA,这2种NF2突变体对RT4细胞抑制率明显低于野生型NF2组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:成功构建了2种能够在RT4中表达的单个点突变的NF2基因真核表达载体.     

小骨窗血肿清除术与微创血肿穿刺术治疗高血压脑出血的疗效比较

目的比较小骨窗血肿清除术与微创血肿穿刺术治疗高血压脑出血的疗效。方法按照系统评价的要求全面检索万方全文数据库（数字化期刊和学位论文数据库）、维普中文科技期刊全文数据库、中国知网及CBMdisc数据库,纳入10个随机对照研究,共计1937例患者（小骨窗组959例,微创穿刺组978例）,Meta分析远期预后及死亡率。结果小骨窗血肿清除术组与微创穿刺术组比较,患者远期预后有效率差异无统计学意义[P=0.84,OR合并=0.98,95%CI（0.80～1.20）],两组死亡率差异无统计学意义[P=0.15,OR合并=0.81,95%CI（0.62～1.08）]。结论小骨窗血肿清除术与微创血肿穿刺手术治疗高血压脑出血都是有效的。     

野生型Ⅱ型神经纤维瘤病基因Ⅱ亚型真核表达载体的构建及其功能

目的构建野生型Ⅱ型神经纤维瘤病基因（NF2）Ⅱ亚型的真核表达载体，观察其在人胚胎肾细胞293（HEK293）中的表达并检测其转染神经鞘瘤细胞（RT4）后的功能。方法以人胎脑cDNA文库中的NF2Ⅱ亚型基因为模板．应用聚合酶链反应技术扩增野生型NF2Ⅱ亚型基因，并定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1质粒中：经鉴定正确的重组质粒pEGFP-NF2Ⅱ亚型，用Lipofectamine2000脂质体导人人胚胎肾细胞293，通过荧光显微镜和Western Blotting法观察基因表达水平：随后转染大鼠神经鞘瘤细胞．利用水溶性四氮唑法观察野生型NF2Ⅱ亚型基因对大鼠神经鞘瘤细胞增殖的影响。结果经序列分析证实，克隆的NF2Ⅱ亚型基因与Genebank中的序列完全一致。DNA琼脂糖凝胶电泳检测显示，经双酶切后的质粒pEGFPcDNA片段大小约为4700bp：NF2Ⅱ亚型基因cDNA片段大小为l770bp，NF2Ⅱ亚型基因的真核表达载体可瞬时转染人胚胎肾细胞293，通过荧光显微镜和Westem Blotting方法得到证实；水溶性四氮唑法检测显示，转染pEGFP-NF2Ⅱ亚型并表达NF2Ⅱ亚型编码蛋白的293细胞与对照组293细胞的增殖指数相同。结论所构建的野生型NF2Ⅱ亚型基因真核表达载体可在人胚胎肾细胞293中表达，且不具有抑制肿瘤细胞增殖的特性。     

NF2基因对细胞增殖和细胞周期的影响

目的观察Ⅱ型神经纤维瘤（neurofibromatosisⅡ，NF2）基因对细胞增殖和细胞周期的影响。方法采用脂质体介导法将携带野生型NF2的真核表达载体导入大鼠神经鞘瘤RT4细胞，质粒转染成功后实验细胞分为pEGFP-N1组、pEGFP-NF2组和对照组（未转染质粒组），以Western blot分析目的基因的表达，并采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期。结果pEGFP-NF2组细胞merlin蛋白出现明显高表达。pEGFP-NF2组细胞生长的抑制率高达37．7％，与对照组相比较，差异具有统计学意义（P〈0.05）；而pEGFP-N1组细胞生长的抑制率与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。流式细胞仪检测显示NF2可以阻断细胞周期，使其处于G1-G0期。结论野生型NF2可抑制大鼠神经鞘瘤RT4细胞的增殖，阻断细胞周期，使其处于G1-G0期。     

NF2基因突变体真核表达载体的构建和表达

目的构建NF2突变体真核表达载体,并观察其在人胚肾细胞HEK293中的表达。方法采用分子生物学方法构建NF2突变体,将突变体克隆入真核表达载体pEGFP—N1中,进行筛选和鉴定,然后在脂质体介导下,将重组载体转染至真核细胞HEK293中,应用Western blot法检测蛋白的表达。结果通过使用重叠延伸PCR法定位突变,从野生型NF2基因cDNA模板中扩增得到预期大小的NF2突变体条带,DNA测序证实NF2突变体序列的正确性。重组载体转染HEK293后能产生merlin蛋白。结论本研究成功构建重组载体pEGFP—N1-NF2突变体,其转染HEK293后,能有效表达于HEK293中。