大鼠创伤性脑损伤后神经干细胞的增殖及移植后的修复作用

目的：基于神经于细胞的自我更新和多向分化的特点，探讨创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI)后神经于细胞(neural stem cells．NSCs)的增殖及其移植对脑损伤的修复作用。方法：实验于2004年在复旦大学附属华山医院神经外科动物实验室完成．采用Feeney氏法制备大鼠创伤性脑损伤模型，随机分为对照组、损伤组、PBS治疗组、NSCs移植治疗组，免疫组化检测大鼠损伤后海马NSCs的数量；用绿色荧光蛋白(GFP)标记的NSCs立体定向移植。神经损害严重程度评分和旋转爬杆试验对移植后大鼠的神经系统行为和运动功能进行评估，免疫组化染色观察NSCs的分化情况。结果：TBI后7d海马齿状回nestin阳性细胞明显增多，为(8．1&;#177;2．5)个，与正常动物组(2．5&;#177;1．3)个比较差异有非常显著性意义(F=40．91，P&;lt;0．01)。移植后部分GFP阳性细胞表达神经元特异性标记物β-tubilin Ⅲ，移植组大鼠神经系统行为学评分明显改善。结论：TBI后移植NSCs可以有效地促进损伤后大鼠神经行为功能的恢复，NSCs能够分化为神经元从而发挥对损伤后的大脑的修复作用。     

大鼠创伤性脑损伤后神经干细胞的增殖及移植后的修复作用

目的:基于神经干细胞的自我更新和多向分化的特点,探讨创伤性脑损伤(traumaticbraininjury,TBI)后神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)的增殖及其移植对脑损伤的修复作用。方法:实验于2004年在复旦大学附属华山医院神经外科动物实验室完成。采用Feeney氏法制备大鼠创伤性脑损伤模型,随机分为对照组、损伤组、PBS治疗组、NSCs移植治疗组,免疫组化检测大鼠损伤后海马NSCs的数量;用绿色荧光蛋白(GFP)标记的NSCs立体定向移植。神经损害严重程度评分和旋转爬杆试验对移植后大鼠的神经系统行为和运动功能进行评估,免疫组化染色观察NSCs的分化情况。结果:TBI后7d海马齿状回nestin阳性细胞明显增多,为(8.1±2.5)个,与正常动物组(2.5±1.3)个比较差异有非常显著性意义(F=40.91,P<0.01)。移植后部分GFP阳性细胞表达神经元特异性标记物β-tubilinIII,移植组大鼠神经系统行为学评分明显改善。结论:TBI后移植NSCs可以有效地促进损伤后大鼠神经行为功能的恢复,NSCs能够分化为神经元从而发挥对损伤后的大脑的修复作用。     

原发性颅顶骨恶性淋巴瘤一例

患者男,76岁.因"发现额顶部无痛性头皮下肿块进行性增大9个月"入院.体检可在额顶部触及头皮下坚硬、不可移动的皮下肿块,大小约8 cm×8 cm.肿块表面皮肤正常.神经系统检查未见异常.头颅X线片显示额顶部的溶骨性病变.头颅CT示额顶部皮下肿块,局部颅骨骨质破坏.     

MRI活体示踪大鼠脑内超顺磁性氧化铁标记成人神经干细胞

背景：目前判断神经干细胞移植后向脑损伤部位的迁移需要处死受体动物行脑切片检查,且不能进行多点、动态的观察。 目的：探讨用MRI活体示踪移植磁化标记成人神经干细胞在创伤性脑损伤模型大鼠脑内迁移和分布的可行性。 方法：建立大鼠脑部左侧半球创伤性脑损伤模型,超顺磁性氧化铁体外标记成人神经干细胞。模型建立后2周将标记成人神经干细胞立体定向移植入大鼠脑部右侧半球。在移植后1 d、3 d、1周和2周分别行大鼠头部MRI。2周后处死大鼠取脑,用普鲁士蓝染色法进行染色,观察标记神经干细胞的迁移。 结果与结论：超顺磁性氧化铁体外标记成人神经干细胞的成功率约为85%。移植后行头颅MRI可见位于右侧半球的移植部位FSE T2WI和GRE T2序列呈环形低信号。随时间推移,创伤性脑损伤后移植标记干细胞组大鼠头颅MRI可见脑内有一低信号线,指向对侧脑挫伤部位,而创伤性脑损伤后移植未标记干细胞组,正常大鼠移植标记干细胞组无信号线。MRI显像结果与脑切片普鲁士蓝染色观察到的结果是相符合的。 结果提示用MRI活体示踪移植磁化标记成人神经干细胞在创伤性脑损伤模型大鼠脑内迁移和分布可行、有效。     

绿色荧光蛋白、菲立磁体外双标记神经干细胞及其活性的研究

目的探索用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)重组逆转录病毒和菲立磁(超顺磁性氧化铁,,Superparamagnetic Iron Oxide,SPIO)体外双标记神经干细胞的可行性及其对细胞活力的影响。方法用病毒介导的GFP基因转导大鼠胚胎神经干细胞。用SPIO和Lipofectamine体外磁化标记经GFP标记的胚胎神经干细胞。用荧光显微镜观察双标记神经干细胞,并行普鲁士蓝染色,了解转染成功率。MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测标记神经干细胞的细胞增殖活力。结果双标记神经干细胞分化的细胞荧光显微镜下观察见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阳性。而未标记神经干细胞荧光显微镜下观察未见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阴性。MTT法检测发现GFP和SPIO双标记神经干细胞的增殖活力与未标记神经干细胞相比无改变。结论绿色荧光蛋白重组逆转录病毒和菲立磁可以有效地标记体外分离培养的大鼠胚胎神经干细胞。双标记神经干细胞的增殖、分化活力与未标记神经干细胞相比无改变。     

人脑胶质瘤树突状细胞疫苗的临床应用

目的探讨人脑胶质瘤树突状细胞(DC)疫苗的临床疗效。方法采集患者胶质母细胞瘤手术标本,用热休克诱导肿瘤细胞凋亡,制备符合临床应用的人脑胶质瘤DC疫苗。25例脑胶质瘤患者分为C组(12例)和DC组(13例):C组采用传统的手术及术后放化疗治疗;DC组加用DC疫苗。比较两组肿瘤局部控制率(LCR)、生存时间和生活质量的Karnofsky评级,记录并发症。结果随访2年。治疗结束后9个月时,DC组肿瘤LCR明显高于C组(69.2%vs.25.0%)(P<0.05)。DC组治疗结束后6个月及9个月的Karnofsky评级优于C组。DC组1、2年生存率明显高于C组(69.2%、7.7%vs.41.7%、0)(P<0.05)。DC组的肿瘤复发时间为(11.92±25.31)个月,明显晚于C组的(7.75±4.16)个月(P<0.05)。疫苗接种期间,患者均未出现恶心、呕吐、头痛症状,未观察到关节炎、支气管炎等自身免疫性疾病的发生。结论脑胶质瘤DC疫苗联合术后放化疗,为脑胶质母细胞瘤提供一种更有效的治疗方法。     

B超引导下神经内镜手术治疗中重度原发性脑室内出血

目的 探讨术中B超引导下神经内镜手术治疗中重度原发性脑室内出血的方法和疗效.方法 应用术中B超引导下神经内镜手术治疗33例诊断为中重度原发性脑室内出血患者.结果 术后24 h内复查CT示脑室内血肿的清除率平均为85%.术后死亡2例.术后半年对患者进行ADL分级:达到Ⅰ级10例,Ⅱ级8例,Ⅲ级5例,Ⅳ5例,Ⅴ级3例.结论 应用术中B超引导下神经内镜手术治疗中重度原发性脑室内出血,具有定位准确、微创、直视下操作、手术时间短、血肿清除率高和术后疗效好等优点.     

疏肝清胆汤联合逆行胰胆管造影治疗胆源性胰腺炎的临床观察

正急性胰腺炎(AP)是胰酶在胰腺中被激活后引起胰腺组织自身消化的化学性炎症,其中胆源性胰腺炎(ABP)占急性胰腺炎发病半数以上,胆总管结石是诱发ABP的重要原因之一,ABP以上腹部疼痛、恶心、呕吐、发热、血及尿淀粉酶升高为主要临床表现,随着内镜技术的不断发展,经内镜逆行性胰胆管造影(ERCP)术逐渐成为治疗胆源性胰腺炎的常规方法[1]。笔者采用自拟疏肝清胆汤联合经内镜逆行性胰     

人骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞移植治疗局灶性脑缺血后神经功能障碍的实验研究

目的探讨人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）源性神经元样细胞移植对局灶性脑缺血后神经功能缺失的治疗作用。方法应用胶氧尿苷（Brdu）标记全反式维甲酸联合细胞因子诱导的hBMSCs源性神经元样细胞,通过立体定向分别将磷酸盐缓冲液（BS）、hBMSCs及hBMSCs源性神经元样细胞植入局灶性脑缺血模型大鼠纹状体内。观察移植后各组大鼠神经功能恢复情况。结果hBMSCs和hBMSCs源性神经元样组术后神经损伤严重缺损评分（NSS）、平衡木试验（BBT）、一次性被动回避平台试验（SDPAT）、水迷宫试验（WMT）较PBS组显著好转（P〈0.01）;hBMSCs组术后1、3周NSS、BBT较hBMSCs源性神经元样组明显好转（P〈0.05）,术后6、8周两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;hBMSCs源性神经元样组SDPAT、WMT较hBMSCs组改善明显（P〈0.05）。结论hBMSCs和hBMSCs源性神经元样细胞脑内移植均能有效改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能症状,hBMSCs移植作用快,而hBMSCs源性神经元样细胞移植在学习、记忆功能方面改善更好,可能是治疗局灶性脑缺血的一种方法。