低频脉冲超声对肿瘤细胞内化疗药物浓度影响的体外实验研究

目的：观察低频脉冲式超声波对肿瘤细胞内化疗药物浓度的影响并探讨其作用机制。方法：将肝癌细胞株HepG2与临床常用化疗药蒽环类抗生素阿霉素(adriamycin，ADM)共孵育，用不同条件的低频脉冲超声波处理，选不同时间点用流式细胞仪检测细胞内ADM荧光强度，荧光分光光度计测量细胞膜流动性。结果：低频脉冲超声波能显著提高肿瘤细胞HepG2内ADM浓度，且这种效应有明显的频率赖性，以0．8MHz的频率最为理想，细胞内ADM荧光强度最大可达145．12，细胞膜荧光偏振度值由原来的0．1985降至0．1624，改善细胞膜流动性。另外，细胞内药物浓度与细胞膜流动性呈正相关，提示超声波促进药物进入细胞内的作用是通过提高细胞膜的流动性来实现的。结论：低频脉冲超声可促进化疗药物进入肿瘤细胞内，这种效应有明显的频率敏感性，其机制与超声提高细胞膜的流动性有关。     

活体磁共振示踪磁标记大鼠神经干细胞

背景:要将神经干细胞替代治疗神经系统疾病应用于临床,必须解决一个重要问题,就是植入人脑内神经干细胞的存活、迁移、识别和动态监测.目的:拟建立菲立磁体外标记胎鼠神经干细胞的方法及检测于段,观察标记细胞移植后在活体上磁共振信号的改变.设计、时间及地点:MRI动态评估,体内实验,于2005-01/08在武警医学院附属医院完成.材料:孕13～18 d SD胚胎大鼠10只用于分离、培养大鼠胚胎源性神经干细胞,健康成年清洁级SD大鼠32只,用于制作局灶性脑缺血再灌注模型.方法:分离培养大鼠胚胎源性神经干细胞,使用菲立磁一多聚赖氨酸复合物标记神经干细胞.制作局灶性脑缺血再灌注模型,将菲立磁-多聚赖氨酸复合物标记的神经干细胞分别移植入模型大鼠左侧脑内,右侧移植未标记的神经干细胞.主要观察指标:对标记细胞进行普鲁士蓝染色、电镜观察.细胞活体移植后1,5,14 d体内磁共振示踪.结果:菲立磁可以高效率地标记神经干细胞,普鲁上蓝染色显示菲立磁-多聚赖氨酸复合物标记神经干细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒,电镜结果显示非立磁-多聚赖氮酸复合物标记的神经干细胞胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡.磁共振成像检查发现脑内移植的标记细胞在磁共振上呈明显的低信号改变,移植第5天低信号物质沿胼胝体腹侧迁移.在移植第14天,对称平行的两个针道已经基本看不见,病灶侧侧脑室部位低信号物质向对侧迁移,左侧侧脑室部位低信号物质基本看不见.结论:菲立磁经多聚左旋赖氨酸转染后可体外标记神经干细胞,标记后体内移植的神经干细胞可以在磁共振上产生明显的低信号改变.     

颅内动脉瘤研究现状

颅内动脉瘤是脑血管系统的有破裂倾向的局灶性病理扩张,其破裂可致脑蛛网膜下腔出血.对其病因学的研究,有望揭示动脉瘤发病的生物学机制,为其早期预防和治疗提供依据.本文对近年来颅内动脉瘤的研究现状做一综述.     

质膜蛋白与肿瘤多药耐药现象

多药耐药 (MDR)是影响肿瘤化疗效果的主要障碍 ,是由于在耐药细胞质膜上的一系列蛋白是使细胞免受有害因素的攻击。通过 30年的研究 ,证实了肿瘤细胞逃逸化疗药物攻击的许多途径。很显然 ,多药耐药已经成为肿瘤阻碍各种化疗药物有效治疗的途径。因此 ,评价肿瘤多药耐药机制及其耐药程度 ,探讨新的逆转肿瘤多药耐药方法有助于提高化疗效果。本文就MDR中质膜蛋白的分子结构和表型、耐药机制及其逆转方法的研究进展进行综述。     

超声波诱导人肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM凋亡的实验研究

【目的】探讨治疗超声对人肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM凋亡的影响及其可能机制。【方法】研究对象分为4组,分别为对照组、阿霉素组、超声波组(10 min)、阿霉素 超声波组。以频率为800 KHz,声强为3.0 W/cm2,时间10 min的脉冲式超声波作用于细胞。荧光显微镜观察细胞形态变化;DNA片段化分析检测染色体断裂情况;原位末端标记(TUNEL)和流式细胞仪检测细胞凋亡。【结果】经超声波作用10 min后,HepG2/ADM细胞死亡具有细胞凋亡的形态学特征;阿霉素组和超声波组(10 min)细胞凋亡的比例明显高于对照组;阿霉素 超声波联合治疗显著增加细胞凋亡率,为30.1%。【结论】治疗超声照射10 min可诱导HepG2/ADM人肝癌细胞株凋亡,联合阿霉素治疗,可显著增加细胞凋亡比例。     

颅内动脉瘤与细胞外基质

颅内动脉瘤是一种由多种环境因素和多个基因共同作用的多基因疾病。近年来，对颅内动脉瘤相关致病基因的研究逐渐被人们所重视并获得了深入研究。细胞外基质的破裂很可能是颅内动脉瘤形成中的一种病理生理学表现，与遗传缺陷的组织和细胞外基质相关联。在许多破裂的颅内动脉瘤动脉壁的细胞外基质中，已经证实了结构蛋白的减少。     

低频超声逆转人肝癌细胞多药耐药的实验研究

多药耐药(multidurg resistance，MDR)是导致肿瘤化疗失败的重要原因，超声波具有方向性好，可聚焦的特点，能非特异性地提高细胞膜的通透性，促进一系列物质进入细胞内，是一种理想的耐药逆转工具。为此，我们以人肝癌耐阿霉素(ADM)的多药耐药细胞亚系HepG2／ADM为研究对象，观察低频超声对其耐药特性的逆转，并探讨其可能的作用机制。     

人肝癌原发性耐药细胞亚系的建立及耐药机制的初步探讨

目的从人肝癌细胞系HeFG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制.方法采用阿霉素(adriamycin,ADM)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性,流式细胞术分析细胞周期和检测耐药蛋白的表达.结果随冲击次数的增加,筛选出细胞的耐药指数(resistance index, RI)逐渐升高,筛选3次后对ADM的RI可达30.5;其形态学特点、生长特性及细胞周期分布与亲本细胞有明显差异,同时发现耐药蛋白P-gp、MRPt LRP表达增强.结论肝癌细胞系HepG2是个非均质的群体,其中存在着原发性耐药细胞株.     

磁标记大鼠神经干细胞移植入脑缺血大鼠的磁共振示踪

[目的]使用菲立磁（Feridex）体外标记胎鼠神经干细胞（neural stem cells,NSCs）,并在移植脑缺血大鼠后进行活体MRI示踪观察。[方法]分离、培养大鼠胚胎源性神经干细胞,使用“Feridex-多聚赖氨酸复合物（FE-PLL）” ,标记神经干细胞,对标记细胞分别进行普鲁士蓝染色、电镜观察,将FE-PLL标记神经干细胞分别移植人脑缺血大鼠左右侧脑室内,活体移植后1、5、14d体内MRI示踪。[结果]菲立磁可以高效率地标记神经干细胞,普鲁士蓝染色显示FE-PLL标记神经干细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒。电镜结果显示FE-PLL标记的神经干细胞胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡。MRI检查发现脑内移植的标记细胞在磁共振上呈明显的低信号改变。[结论]菲立磁可以用来体外标记神经干细胞,利用MRI技术可以对脑内移植后的标记细胞进行初步的活体追踪。