星形胶质细胞在帕金森病中的作用研究现状

近年来的研究表明星形胶质细胞在帕金森病(PD)的发病学中起着重要作用,一方面星形胶质细胞可能通过分泌神经元所需的神经营养因子和细胞因子以及合成单胺类代谢酶等发挥神经保护作用;另一方面在刺激因子作用下活化的星形胶质细胞可能通过释放炎症因子、氧自由基、影响谷氨酸和自由铁的代谢等促进PD的发生发展。     

脂多糖对星形胶质细胞的生长具有双重性

目的:研究脂多糖(LPS)对星形胶质细胞(AC)生长的影响及其可能的机制。方法:在原代培养的AC中加入不同浓度的LPS作用不同时间,观察AC生长的情况,以及NF-κB通路抑制剂SN50对AC生长的影响。同时以不同浓度的LPS作用24h后,观察随后8dAC生长的变化。结果:在LPS作用不同时间中,只有作用24h后,低剂量的LPS可使AC的生长加快,高剂量的LPS则可抑制AC生长。以LPS作用AC24h后,短期内LPS可促进AC的生长,长期则抑制AC生长,且呈剂量依赖性。NF-κB通路抑制剂可阻断LPS对AC生长的影响。结论:低剂量的LPS短期内可促进AC生长,高剂量时则抑制AC生长,而炎症对AC的长期影响是对细胞的生长增殖起抑制作用。其可能的分子机制可能与NF-κB通路激活有关。     

脂多糖通过MAPK通路影响星形胶质细胞的谷胱苷肽和肿瘤坏死因子生成

目的 研究脂多糖(LPS)对原代培养的星形胶质细胞(AC)代谢的影响及其可能机制.方法 原代培养AC,予以LPS作用30min、24、48和72h后,观察AC的生存率、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、谷胱苷肽(GSH)和谷胱苷肽过氧化物酶(GPx)含量的变化,Western blot检测AC磷酸化MAPK家族信号蛋白P-p38的表达,观察MAPK通路抑制剂对TNF-α分泌的影响.结果 低剂量LPS促进AC增殖,高剂量抑制.LPS(10μg/ml)作用72h后细胞内GPx活性降低,GSH含量下降.TNF-α的含量随LPS作用时间延长而升高,48h后与对照组相比有显著性差异,P-p38蛋白高峰出现在24h,随后下降.MAPK通路抑制剂可阻断TNF-α的升高.结论 LPS激活的AC下调GSH的表达,增加TNF-α的分泌,其可能的分子机制是激活MAPK通路.     

单唾液酸四己糖神经节苷脂联合高压氧治疗急性脑梗死的临床疗效

目的观察单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)联合高压氧治疗急性脑梗死的临床疗效。方法将80例急性脑梗死患者随机分为常规治疗组(40例)和联合治疗组(40例)。两组均常规予以阿托伐他汀分散片、拜阿司匹林肠溶片、血栓通、巴曲酶治疗,并辅以控制血压、血糖等治疗。联合治疗组在常规治疗基础上予以GM1(生理盐水+GM1 40 mg/d)联合高压氧治疗,疗程10 d。治疗前后分别采用NIHSS、日常生活活动量表(ADL)的Barthel指数评价患者的神经功能;治疗3个月后对患者进行mRS评分。结果治疗前常规治疗组及联合治疗组患者NIHSS评分及Barthel指数差异无统计学意义(均P0.05)。与治疗前比较,常规治疗组及联合治疗组治疗后Barthel指数显著升高,NIHSS评分显著降低(均P0.01)。与常规治疗组比较,联合治疗组治疗后NIHSS评分及mRS评分显著降低,Barthel指数评分显著升高(均P0.05)。联合治疗组总有效率显著高于常规治疗组(χ~2=5.00,P=0.025)。两组患者均未发生明显的不良反应。结论对于未能进行溶栓治疗的急性脑梗死患者,积极予以常规治疗可改善患者预后;在此基础上的进行GM1联合高压氧治疗更能有效促进急性脑梗死患者神经功能状态的康复和远期疗效,且安全有效,值得临床推广。     

脂多糖通过NF-κB途径调节大鼠星形胶质细胞Toll样受体表达

目的 研究脂多糖（LPS）对大鼠星形胶质细胞Toll样受体表达的影响及其机制。方法 在原代培养的第3代星形胶质细胞中加入不同浓度的LPS作用24h,通过免疫荧光、western blot观察星形胶质细胞 Toll样受体的表达和NF-κB p65的表达,同时研究NF-κB通路抑制剂对其的影响。结果 在正常状况下,星形胶质细胞胞浆和胞膜表达大量的TLR3受体,很少的TLR4受体。在LPS的刺激下,星形胶质细胞的TLR3表达保持不变,TLR4受体的表达随予以LPS的量增加而增高。LPS可刺激星形胶质细胞NF-κB的表达升高,抑制NF-κB通路活化抑制TLR4受体的上调。 结论 星形胶质细胞Toll样受体的表达是不同源的,TLR4受体随环境的变化而改变,其分子机制可能与NF-κB信号途径有关。     

脂多糖刺激的星形胶质细胞可能通过IL-6介导PC12细胞增殖双重性

目的：研究脂多糖（LPS）刺激的星形胶质细胞（AC）条件培养液（ACM）对PC12细胞生长的影响及其可能的因子。方法：在原代培养的AC中加入不同浓度的LPS作用24h，收集条件培养液，观察ACM对PC12细胞生长的影响，分析AC分泌的细胞因子的变化，研究IL-6中和抗体后处理的ACM对PC12细胞生长的影响。结果：ACM可促进PCI2细胞的增殖，0．1mg·mL^-1 LPS刺激组作用最强。LPS可促进AC分泌IL-6，并呈剂量依赖性。IL-6中和抗体可阻断这种效应。结论：AC对PC12的生长具有双重性，IL-6可能是关键的因素之一。     

一种高纯度多巴胺神经元原代培养方法的建立

目的:通过胚胎中脑祖细胞(MPC)体外培养获得高纯度的多巴胺神经元培养体系.方法:取自E12鼠胚中脑腹侧的MPC悬液在添加bFGF的DMEM/F12/N2/L-抗坏血酸-2-磷酸酯倍半镁盐(AA-2P)培养液中扩增培养,5 d后停用bFGF,促进细胞分化,4 d后通过Neurobasal/阿糖胞苷(Ara-c)抑制胶质细胞生长,获得纯神经元,使用TH鉴定细胞,计数细胞比例和纯度,β-tubulin III鉴定成熟神经元,并计数细胞比例和纯度.结果:在添加了bFGF 20 μg/L的DMEM/F12/N2/AA-2P培养液中MPC增殖良好,体外培养7 d后细胞数量扩增到培养前的(16.54±1.25)倍;使用Neurobasal/阿糖胞苷后胶质细胞受抑制,神经元占94%以上,其中多巴胺(DA)能神经元的比例约(35.56±4.13)% .结论:E12鼠胚MPC原代培养合并使用阿糖胞苷是获取高纯度DA能神经元培养体系的可靠途径.     

栀子甙在炎症诱导的多巴胺能神经元损伤中的作用及机制

目的 研究栀子甙在脂多糖(LPS)介导的星形胶质细胞(AC)过度激活时对多巴胺能神经元保护作用的影响及可能机制.方法 建立高纯度多巴胺能神经元培养体系、多巴胺能神经元和AC混合培养体系并分别经栀子甙预处理后再予以LPS作用24 h,同时设立对照组,观察多巴胺能神经元的生存率,TH mRNA的表达及培养基中TNF-α、NO、IL-6、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和胶质源性神经生长因子(GDNF)含量的变化.结果 AC促进多巴胺能神经元的存活.栀子甙不能增加高纯度多巴胺能神经元培养体系中多巴胺能神经元的存活率,却可剂量依赖地增加混合培养体系中多巴胺能神经元存活率,同对照组相比,40 mg/L组增加细胞存活率从203.0%±17.4%升高到256.7%±15.2%(F=17.22,P=0.001).LPS作用24 h后混合培养体系中TNF-α、NO、GDNF含量并无显著变化,IL-6、MMP-9含量显著上升,栀子甙可明显下调这种反应.同对照组相比,40 mg/L组IL-6含量下降到原来的67.2%±6.4%(F=12.89,P=0.001),MMP-9下降到原来的77.3%±9.8%(F=8.27,P=0.001).结论 LPS通过过度激活AC而增加炎性因子的分泌,从而削弱其对多巴胺能神经元的保护作用,栀子甙通过抑制AC分泌炎性介质,不增加GDNF的分泌,上调AC对多巴胺能神经元的保护作用.     

星形胶质细胞在脂多糖诱导的多巴胺能神经元损伤中的作用

目的 探讨星形胶质细胞在不同浓度脂多糖诱导的多巴胺能神经元损伤中的作用.方法 在第3代星形胶质细胞中加入终浓度为0、0.1、10.0 mg/L脂多糖作用24 h,收集条件培养液.采用L-抗坏血酸-2-磷酸酯倍半镁盐和人成纤维生长因子促进孕12 d的SD大鼠中脑前体细胞扩增、分化为多巴胺能神经元,通过阿糖胞苷抑制胶质细胞的增殖,建立高比例多巴胺能神经元的纯神经元培养体系.在此基础上,利用Transwell双室培养系统建立星形胶质细胞和纯神经元共培养体系,观察脂多糖、条件培养液和星形胶质细胞对纯神经元体系中多巴胺能神经元存活及酪氨酸羟化酶mRNA表达的影响.结果 脂多糖对纯神经元体系中的多巴胺能神经元有损伤作用,并呈剂量依赖性.与单用脂多糖比较,条件培养液显著升高多巴胺能神经元存活,其中0.1 mg/L脂多糖刺激组多巴胺能神经元的存活能力最强,其次为10.0 mg/L组,最后为0 mg/L组.与条件培养液组比较,共培养体系中多巴胺能神经元存活能力更高,其中0.1 mg/L脂多糖干预后多巴胺能神经元的存活能力最强,随后依次为10.0 mg/L、0 mg/L、20.0 mg/L脂多糖.多巴胺能神经元表达酪氨酸羟化酶mRNA的变化类似多巴胺能神经元数量的变化.结论 脂多糖对多巴胺能神经元有损伤作用,并呈剂量依赖性,适度激活的星形胶质细胞对多巴胺能神经元有保护作用,过度激活则削弱了这种保护作用.