骨性关节炎患者关节滑液中结合珠蛋白水平与病情严重程度的相关性

目的研究骨性关节炎（osteoarthritis,OA）患者关节滑液中结合珠蛋白（haptoblobin,Hp）水平与病情严重程度的相关性,探讨Hp在OA病理过程中的作用机制。方法收集2011年7月-2012年2月在解放军总医院行关节镜诊治的41例OA患者及18例非OA膝关节疾病患者（半月板损伤16例,盘状半月板2例,均无明显关节软骨损伤）关节滑液,采用Outerbridge软骨损伤评分法对OA患者分级并记录OA患者膝关节HSS评分（美国特种外科医院膝关节评分）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测两组关节滑液中Hp水平。比较不同程度OA患者滑液Hp水平。结果 OA组滑液中Hp水平明显高于非OA组[（23.04±13.19）μg/mlvs（7.32±3.76）μg/ml,P〈0.001]。OA组滑液中Hp水平与膝关节HSS评分呈负相关（r=-0.487,P=0.001）。结论滑液中Hp水平与OA病变严重程度呈正相关,测定OA患者滑液中Hp水平对早期诊断和有效防治具有重要意义。     

晚发型阿尔茨海默病蛋白质组学中触珠蛋白的表达

目的建立晚发型阿尔茨海默病(LOAD)蛋白质组学技术体系,寻找并鉴定与LOAD发生有关的生物标记物。方法选择8例经病理证实为LOAD患者的颞叶脑皮质为LOAD组,另选择5例尸体解剖为正常老年人颞叶脑皮质为对照组。分别采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,用图像分析软件进行比较分析、确定差异蛋白质点。将选取的差异蛋白质点进行胶内酶切,采用基质辅助激光解析-电离-飞行时间质谱及电喷雾电离串联质谱法进行质谱分析;搜索数据库鉴定蛋白质。结果分别获得两组脑组织双向电泳蛋白质组表达图谱,筛选并鉴定出表达有明显差异的蛋白质点11个,其中蛋白质点2触珠蛋白在LOAD组有明显上调。结论筛选并鉴定表达有明显差异的蛋白质点11个,可能成为具有临床诊断意义的LOAD潜在标记物,从而为阿尔茨海默病的早期诊断和治疗提供理论和实验依据。     

紫外分光光度法测定注射用甲氨喋呤含量

甲氨蝶呤是医院常用的抗肿瘤药 ,有干扰核酸合成的作用 ,临床用于儿童各类急性白血病、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、乳腺癌、卵巢癌、及各种多发性软组织肉瘤等的治疗。其含量测定用ＨＰＬＣ法[1] ,本文用紫外分光光度法测定注射用甲氨蝶呤的含量 ,方法操作简便、测量准确。1　仪器与试药紫外分光光度计岛津ＵＶ - 16 0Ａ型、德国ＳａｄｅｒｉｓＭＣ5微量天平。对照品及其样品、辅料 (由北京医科大学实验药厂提供 ) ,盐酸、碳酸铵均为分析纯 ,实验用水为去离子水。2　实验条件的选择2 1　测定波长的确定　精密称取甲氨蝶呤对照品 10ｍｇ ,用…     

DJ-1蛋白在晚发型阿尔茨海默病蛋白组学的表达

目的 从蛋白质水平初步探讨晚发型阿尔茨海默病发病机制,寻找并鉴定与之有关的生物标志物.方法 选择经病理证实的8例晚发型阿尔茨海默病患者及5例正常老年人颞叶脑皮质为研究对象.分别进行双向凝胶电泳后采用基质辅助激光解析-电离-飞行时间质谱及电喷雾电离串联质谱法进行质谱分析,搜索数据库鉴定蛋白质.结果 分别获得两组脑组织双向凝胶电泳蛋白质组表达图谱,DJ-1蛋白在疾病组明显上调.结论 DJ-1蛋白可能成为具有临床诊断意义的晚发型阿尔茨海默病潜在标志物,从而帮助开发靶向目的 蛋白质的新型抗神经退化药物.     

双三元液相色谱串联ICP-MS对中国东北和西南地区的4种松茸的砷形态分析

目的 松茸中砷含量很高且含有不同的砷形态,包括:砷甜菜碱(AsB)、砷胆碱(AsC)、三价砷(AsⅢ)、五价砷(AsV)、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、三甲基氧化砷(TMAO)和砷糖.然而,有机砷化合物被认为毒性较小,甚至无毒,所以总砷含量不能提供关于其毒性的全部有效信息,需分析其具体的砷酸盐形态.方法 我们...     

微生物抗菌肽的电喷雾串联质谱分子结构解析

目的:以微生物抗菌肽为研究对象,利用电喷雾串联质谱对其分子结构进行解析.方法:首先通过全扫描模式,得到主要成分的相对分子质量为1 436.76.然后选择主要成分m/z718.38(双电荷离子)进行串联质谱测定.结果:相对分子质量为1 436.76的化合物结构为β-OH-FA-TEAPQYIYNE(该肽的脂肪链为羟基14碳脂肪酸),属于Fengycin家族(families).结论:本研究结果表明,电喷雾串联质谱适用于分析微生物抗菌肽类具有相似结构的同系物,是测定此类化合物相对分子质量及鉴定其结构的有效工具.     

鼻窦CT测量在呼吸道上皮腺瘤样错构瘤术前诊断中应用

目的探讨鼻窦CT测量在呼吸道上皮腺瘤样错构瘤(REAH)术前诊断中的应用价值。方法选取自2013年1月至2018年9月在北部战区空军医院耳鼻咽喉科进行手术治疗的REAH患者54例为REAH组;选取同期住院经术后病理诊断鼻息肉的70例患者为NPS组;选取门诊以鼻中隔偏曲症状就诊、查鼻窦CT未见异常的70例成年人为Normal组。测量并比较各组患者的鼻窦冠状位CT的嗅裂前区顶部宽度、嗅裂前区宽度、前鼻腔总横径、中鼻甲间距离、嗅裂后区宽度、后鼻腔总横径,计算嗅裂前区宽度/前鼻腔总横径、嗅裂后区宽度/后鼻腔总横径、嗅裂前区顶部宽度/中鼻甲间距离的比值。结果三组患者的前鼻腔总横径、后鼻腔总横径比较,差异无统计学意义(P>0.05)。NPS组的中鼻甲间距离显著小于REAH组、Normal组,差异有统计学意义(P<0.05);且REAH组与Normal组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。REAH组的嗅裂前区宽度、嗅裂后区宽度、嗅裂前区顶部宽度、嗅裂前区宽度/前鼻腔总横径、嗅裂后区宽度/后鼻腔总横径显著高于NPS组和Normal组,差异有统计学意义(P<0.05);且NPS组与Normal组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Normal组的嗅裂前区顶部宽度/中鼻甲间距离显著小于REAH组及NPS组,差异有统计学意义(P<0.05);且REAH组与NPS组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。受试者工作特征曲线分析示,嗅裂前区宽度和嗅裂前区宽度/前鼻腔总横径的曲线下面积(AUC)值最大,且这两个指标的AUC比较,差异无统计学意义(P>0.05)。当嗅裂前区宽度取值0.78 cm或嗅裂前区宽度/前鼻腔总横径取值0.30,诊断的灵敏度和特异度均较高。结论鼻窦CT测量为REAH术前诊断提供帮助,嗅裂前区宽度≥0.78 cm或嗅裂前区宽度/前鼻腔总横径≥0.30是鉴别REAH和鼻息肉的参考依据。     

小儿神经母细胞瘤蛋白质组的初步探索

目的 应用蛋白质组学方法筛选与小儿神经母细胞瘤(NB)相关的差异表达蛋白质.方法 收集2011年7～ 12月解放军总医院小儿外科经穿刺活检病理证实为Ⅳ期NB的标本3例及其化疗后术后切除肿瘤标本3例,患儿平均年龄3.17岁.对化疗前后NB组织全蛋白进行二维凝胶电泳,应用超高效纳升液相色谱-电喷雾串联质谱进行蛋白质斑点鉴定和生物信息学分析.结果 成功建立了组织化疗前后双向电泳图谱,应用图像分析软件发现化疗后有7个差异表达明显的蛋白质斑点,其中有2个蛋白质表达上调,分别为Nm23蛋白和神经多肽h3;5个蛋白质表达下调,分别为癌蛋白18、热休克蛋白27、线粒体烯酰脂辅酶A、过氧化物酶1和过氧化物酶3.结论 应用二维凝胶电泳和超高效纳升液相色谱-电喷雾串联质谱能鉴定小儿NB化疗前后的差异表达蛋白.     

急性重型脑外伤后脑蛋白表达变化的蛋白质组研究

目的应用蛋白质组学技术，研究重型人脑外伤后的脑皮层蛋白质组表达变化的情况。方法提取脑挫伤部位皮层的总蛋白。通过双向电泳，分离蛋白。应用胶内酶切、生物质谱，鉴定由图像分析软件所得出的具有表达差异的蛋白质点。结果在急性期8h内，目前已发现138个蛋白质点，表达水平具有显著性差异变化。在已鉴定出的83个蛋白点中，属于64种蛋白质。依其功能可分为：细胞骨架、代谢反应、核酸蛋白合成与更新、信号传导、氧化应激反应、功能未知等几类。在急性期，大多数差异蛋白表达水平呈波动变化。结论蛋白质组技术作为一个有力的大规模、高通量的分析蛋白质混合物工具，可快速的建立脑蛋白表达谱。在急性期，脑蛋白质表达呈剧烈变化主要为参与细胞代谢反应、结构修复等组织代偿反应。     

NanoUPLC-nano-ESI-MS/MS鉴定二维凝胶银染后蛋白质点的方法

目的提高银染色后二维凝胶电泳图谱中蛋白质斑点的鉴定率。方法采用欧洲分子生物学实验室（EMBL）银染色方法结合改进后的质谱兼容胶内酶切方法并应用超高效纳升液相色谱-电喷雾串联质谱（NanoUPLC-nano-ESI-MS/MS）对二维凝胶电泳上的蛋白质斑点进行分析。结果二维凝胶上50个蛋白质斑点中46个点得到鉴定,共鉴定出74个有意义的蛋白质,其中一个蛋白斑点鉴定出6个有意义的蛋白质。结论该方法获得的样品经质谱检测和网上数据库比对,蛋白鉴定率高达90%以上,与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）和串联飞行时间质谱（MALDI-TOF/TOF-MS）方法相比,蛋白质的鉴定率明显提高,表明该方法适合鉴定复合蛋白质斑点,是鉴定银染后二维凝胶蛋白质的一种强有力的分析手段。