自体骨髓间充质干细胞移植后心肌缝隙连接蛋白43表达与室性心动过速发生的关系

目的:缝隙连接蛋白43对维持心肌细胞的连接通讯功能、电信号传导和正常的节律性收缩起重要作用,其表达和分布的异常是多种室性心律失常的解剖学基础,建立小型猪急性心肌梗死模型.观察自体骨髓间充质干细胞移植后室性心动过速的发生及心肌缝隙连接蛋白43的表达方法:实验于2006-01/2007-01在河北省人民医院导管室完成。①材料:选取8～12月龄小型猪22头,由河北医科大学实验动物中心提供,体质量20～30 kg,随机数字表法分为细胞移植组12头、模型对照组10头.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学际准②实验方法:无菌条件下抽取猪双侧股骨骨髓20 mL,percoll法 贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,待细胞生长达75%融合时用胰酶消化传代。将传至第2代细胞加入终浓度为10μmol/L的5-氮胞苷进行诱导,用胶体金标记12 h后继续培养20 d用于移植:两组小型猪均采用球囊堵闭法建立急性心肌梗死模型.心电图监测示相关至少2个导联ST段抬高大于0.2 mV、术后血肌钙蛋白和肌酸磷酸激酶同工酶升高超过正常的两倍为建模成功标准:细胞移植组于造模成功后经OTW球囊于第一对角支远端1 cm处再次阻断血流,注入经胶体金标记的10×10~7个骨髓间充质干细胞。③实验评估:于细胞移植后2 h及4周行电生理程序刺激.观察室性心动过速的发生情况。末次电生理检查后、采用免疫组化染色法检测心肌缝隙连接蛋白43的表达.计算其积分吸光度值。结果:①模型建立指标检测:与术前比较.造模后所有小型猪血肌钙蛋白含量和肌酸磷酸激酶同工酶活性均增高,峰值浓度分别为(21.3±3.6)μg/L和(178.3×41.4)IU/L,术中心电图ST段平均抬高(10.67±1.43)mm.证明急性心肌梗死模型成功建立。②骨髓间充质干细胞移植后室性心动过速的发生情况:与模型对照组诱发出室性心动过速的动物数量比较,术后2 h细胞移植组无明显变化(X~2=0.201,P=0.650),术后4周细胞移植组明显降低(X~2=4.455.P=0.035)。②骨髓间充质干细胞移植后梗死心肌缝隙连接蛋白43的表达:术后4周移植到梗死心肌的骨髓间充质干细胞与宿主心肌生长为一体,移植部位颜色变黑,苏木精-伊红染色示移植细胞的胞浆呈紫红色。细胞移植组心肌梗死区缝隙连接蛋白43积分吸光度值明显高于模型对照组(t=16,82.P=0.00),细胞移植组中未发生室性心动过速小型猪的梗死心肌缝隙连接蛋白43的表达明显高于发生室性心动过速小型猪(t=5.06,P=0.00)。结论:自体骨髓间充质干细胞移植可促进急性心肌梗死猪心肌缝隙连接蛋白43的表达,其表达程度可能与急性心肌梗死室性心动过速的发生有关。     

叶酸、维生素B12对老年高血压伴高同型半胱氨酸血症患者血清同型半胱氨酸、一氧化氮、血压水平的影响

目的探讨叶酸、维生素B12对老年高血压伴高同型半胱氨酸血症患者的血清同型半胱氨酸（Hcy）、一氧化氮（No）及血压（BP）水平的影响。方法选择63例血清Hcy水平增高的高血压患者（Hcy≥15μmol／L，收缩压140～159mmHg和／或舒张压90～99mmHg），随机分为对照组（30例，仅服用降压、他汀类及阿司匹林等基础药物，不服用叶酸等影响Hcy的药物）、干预组（33例，除基础用药外加用叶酸5mg／d、维生素B12 250μg／d口服）。治疗前（基线水平）及治疗后4W测定患者空腹血清Hcy、NO水平，同时测量患者收缩压（SBP）及舒张压（DBP）。所有数据应用STATA8．0软件包进行统计学处理。结果干预组患者Hcy水平与治疗前相比显著降低（P=0．0000）；NO水平与服药前相比明显升高（P=0．0002）；4W后对照组Hcy及NO水平亦有变化，但无统计学差异（P〉0．05）。两组患者SBP及DBP基线水平相比无统计学差异（P〉0．05）；干预组患者SBP及DBP值与治疗前相比显著降低（P=0．0000）。结论口服叶酸、维生素B12可以显著改善老年高血压伴高Hcy血症患者的内皮功能及自主神经功能，有一定的降压作用。     

冠心病患者高同型半胱氨酸血症与白细胞介素-8相关性研究

本研究通过测定不同类型冠心病患同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）以及炎性因子白细胞介素-8（IL-8）水平，分析HCY对冠心病患IL-8水平的影响及意义，探讨HCY致冠心病作用机制。     

自体骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死后心律失常影响的实验研究

目的 观察自体骨髓间充质干细胞(MSC)移植对小型猪心肌梗死后心律失常的影响,并研究其作用机制.方法 利用介入方法制作小型猪心肌梗死模型并进行自体MSC移植.MSC移植组12头和心肌梗死对照组10头,分别于移植2 h及4周后通过电生理程序刺激,观察室性心动过速(室速)的发生情况.于建模4周后,通过膜片钳技术研究移植后MSC在心肌环境下的离子通道表达和梗死区域心电异质性变化.结果 (1)建模后2 h MSC移植组9头(75%)、对照组9头(90%)诱发出室速,两组间差异无统计学意义(P=0.445).术后4周MSC移植组3头(25%)、对照组8头(80%)可诱发出持续性单形性室速(P=0.012).(2)MSC移植组的心外膜细胞(Epi)、心内膜细胞(Endo)和中层细胞(M)INa峰值电流密度分别为(-12.43±3.04)pA/pF、(-14.04±3.82)pA/pF和(-29.26±5.70)pA/pF,对照组梗死边缘区的Epi、Endo和M层INa峰值电流密度分别为(-8.47±3.34)pA/pF、(-9.71±3.38)pA/pF和(-18.98±4.05)pA/pF;MSC移植组在三层心肌的表达具有异质性,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05).(3)MSC移植未室速组MSC的Epi、Endo和M层INa失活半数电压分别为(-93.1±13.8)mV、(-95.2 ±15.5)mV和(-103.4±8.7)mV,MSC移植室速组分别为(-126.2±10.9)mV、(-106.7±11.9)mV和(-105.4±11.0)mV,心肌梗死室速组分别为(-129.1±10.9)mV、(-112.2±9.9)mV和(-109.7±9.3)mV,MSC移植室速组和心肌梗死室速组相比各层差异无统计学意义(P>0.05),和MSC移植未室速组相比各层差异有统计学意义(P<0.05).(4)多元logistic回归分析表明INa失活半数电压(RR=1.449,95%CI1.276～2.079,P=0.029)、INa峰值密度(RR=1.092,95%CI1.008～1.917,P=0.012)是影响心肌梗死室性心律失常的独立危险因素.结论 自体MSC移植致心律失常可能性较小,且有抑制梗死后心律失常发生的作用.自体MSC在心肌内可分化成为具有心肌细胞离子通道特性的类心肌细胞,其离子通道分化程度可能是影响室性心律失常发生的主要机制.     

1000/球囊损伤致腹主动脉狭窄过程中白介素-8水平表达对血管内皮功能的影响

目的：观察兔腹主动脉球囊扩张术后炎性因子白细胞介素-8（Interleukin-8,IL-8）,反映血管内皮功能指标一氧化氮(nitric oxide ,NO)、血管性假性血友病因子（von Willebrand factor, vWF）、内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）水平变化,以及球囊扩张术后腹主动脉病理形态学改变。方法：健康新西兰大白兔24只,雌雄不拘,随机分为两组：球囊损伤组(n=12)和对照组(n=12),分别于术前、术后4h、1d、3d、7d、14d取耳缘静脉血,采用酶联免疫吸附双抗夹心法测定 IL-8、vWF,放射免疫法测定ET-1,利用硝酸还原酶法测定NO,14d后复查造影及病理检查观察腹主动脉管腔、管壁变化情况。结果：①兔腹主动脉球囊损伤后炎性因子IL-8水平4h后即开始明显升高,24h后vWF、ET-1水平明显升高,NO水平明显降低,与术前以及对照组相比,差异具有显著性;②相关分析显示:IL-8水平表达与vWF、ET-1水平呈正相关,相关系数r=0.532,0.619（p＜0.05）, IL-8水平表达与NO水平呈负相关,相关系数r=-0.517（p＜0.05）;③球囊扩张拉伤后2周,实验组动物腹主动脉拉伤处与对照组比较管腔明显狭窄;④病理检查结果：对照组动脉内膜光滑,内皮下有少量结缔组织,无平滑肌细胞存在,中膜平滑肌细胞成梭形,环绕管腔排列。实验组动脉内膜、中膜增厚,管腔明显狭窄,内膜下平滑肌细胞明显增生,而且排列不规则,弹性纤维层结构不清,斑块隆起明显,内含泡沫细胞。结论：球囊扩张术后引起炎性反应明显增强,激发加重了内皮功能损伤,引起腹主动脉管腔狭窄。在此过程中,IL-8可能起到关键的调节作用。     

混合性结缔组织病合并肺动脉高压1例

患者,女,54岁,主因咳嗽1个月余,心悸、气短半个月入院.患者于1个月前受凉感冒后出现咳嗽、咳少量白痰,伴低热,无明显盗汗、乏力及胸痛,自服感冒药后无明显缓解.半月前出现心悸气短,无头疼、头晕、恶心、呕吐,入院前5天拍胸片示:肺部感染、双侧胸腔少量积液,血常规:白细胞1.1×109/L,血红蛋白92 g/L,给予先锋霉素静脉滴注5天无明显好转,为进一步诊治收入院.     

血管内超声对易损斑块的诊断价值

冠心病是影响人类健康的主要疾病，其严重类型急性冠状动脉综合征（acute coronary syndromes，ACS）有着共同的病理生理机制,冠状动脉易损斑块破裂及伴随的血小板聚集、急性或亚急性血栓形成，从而导致急性或亚急性心肌缺血。因此早期识别和诊断易损斑块，从而采取有效的干预措施，有助于降低ACS的发生。血管内超声（intravascular ultrasound，IVUS）技术能提供管腔和管壁的横截面图像，可准确测量管腔及粥样斑块的几何尺寸，并可提供粥样斑块的大体组织学特性。     

心绞痛患者血浆同型半胱氨酸水平变化

目的:观察心绞痛患者血浆同型半胱氨酸水平变化情况及一氧化氮、血管性血友病因子、白细胞介素8水平在冠状动脉病变稳定性中的作用。方法:①选择2002-10/2003-10河北省人民医院心脏中心住院心绞痛患者96例,其中不稳定型心绞痛患者56例(不稳定型心绞痛组),稳定型心绞痛患者40例(稳定型心绞痛组)。选择同期本院心脏中心住院冠状动脉造影正常患者20例为对照组。均对实验目的知情同意。②采用酶联免疫吸附法分别测定血浆同型半胱氨酸、白细胞介素8水平、血清血管性血友病因子水平,亚硝酸还原酶法测定血浆一氧化氮水平。③首先进行组间均衡性检验,计量资料差异比较采用方差分析,然后再作多组均数的q检验,计数资料采用χ2检验,相关资料分析采用直线相关分析,并进行多元Logistic回归分析。结果:不稳定型心绞痛患者56例和稳定型心绞痛患者40例及冠状动脉造影正常患者20例均进入结果分析。①不稳定型心绞痛组患者的年龄、性别、血脂水平,糖尿病和原发性高血压的发生率与稳定型心绞痛组差异不明显。②不稳定型心绞痛组血液同型半胱氨酸、血管性血友病因子、白细胞介素8水平均显著高于稳定型心绞痛组(P<0.05),且两组均明显高于对照组(P<0.05);不稳定型心绞痛组一氧化氮水平显著低于稳定型心绞痛组,两组均明显低于对照组(P<0.05)。③以不稳定型心绞痛为因变量,年龄、同型半胱氨酸、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高血压、糖尿病、心绞痛家族史及吸烟等均作为自变量,进行多元Logistic逐步回归分析,发现最后进入模型的变量为同型半胱氨酸、低密度脂蛋白胆固醇,同型半胱氨酸对于不稳定型心绞痛的危险性比值(RR)为1.554(95%CI1.134～2.130,P=0.001)。④同型半胱氨酸与血管性血友病因子、白细胞介素8呈显著正相关(r=0.539,0.718,P<0.01),同型半胱氨酸与一氧化氮呈显著负相关(r=-0.4733,P<0.01)。结论:①同型半胱氨酸水平升高可能与不稳定型心绞痛有关,可能通过增强炎性激活,使冠心病患者冠状动脉内病变不稳定。②同型半胱氨酸为冠心病患者病变不稳定的独立危险因素,可作为判定冠心病患者冠状动脉病变稳定性指标之一。     

闭塞膈下动脉对兔膈肌运动功能影响的实验研究

目的 观察膈下动脉闭塞后缺血对膈肌生理特性的影响.方法 结扎闭塞新西兰大白兔右侧膈下动脉,制作兔右侧膈肌缺血的模型,并随机分为3组,分别于24 h、48 h和1周后观察双侧膈肌运动变化和病理变化.结果 ①闭塞右侧膈下动脉24 h、48 h,右侧膈肌运动幅度分别为(3.53±0.76)mm、(3.44±0.70)mm;与术前和术后左侧运动幅度及术前右侧膈肌运动幅度相比明显减低,差异均有统计学意义(P＜0.05).②闭塞右侧膈下动脉24 h、48 h,右侧膈肌运动幅度与膈肌缺血区重量有相关性(r24 h =-0.874;r48 h=-0.906).③1周后观察膈肌运动功能均恢复正常.结论 闭塞膈下动脉可以引起膈肌可逆性缺血改变,但不会引起膈肌大面积坏死及膈肌运动功能的永久损伤.     

达格列净对非糖尿病慢性心力衰竭兔的心功能及心肌重构影响

目的　探讨达格列净对非糖尿病慢性心力衰竭兔的心功能和心肌重构的影响。方法　将18只健康雄性新西兰大白兔随机分为假手术组、心力衰竭组和达格列净组,每组6只。假手术组只开胸不手术,心力衰竭组和达格列净组开胸后采用主动脉缩窄法经12周建立非糖尿病慢性心力衰竭模型,观察各组一般情况。术后13周达格列净组经强饲法给予达格列净1 mg/（kg·d）,假手术组和心力衰竭组给予等量生理盐水,共干预10周。各组于术前、术后12周、药物干预10周后行超声心动图检查;药物干预10周后检测体质量及白细胞计数、血红蛋白、总蛋白、白蛋白、钾、钠、随机血糖、渗透压和N端前脑钠素（NT-proBNP）;处死动物后,测量全心和左心室质量,并行HE、Masson及免疫组化染色观察心肌细胞形态、纤维化程度,计算胶原组织分数和胶原（Collagen）Ⅰ或CollagenⅢ阳性面积百分比。结果　达格列净可改善心力衰竭兔的食欲减退、精神萎靡、活动减少和呼吸急促等症状。药物干预10周,达格列净组左心室射血分数较心力衰竭组明显升高,且较术后12周明显升高（P＜0.05）。3组间白细胞计数、总蛋白、白蛋白、血清钾、钠、随机血糖、血浆渗透压差异均无统计学意义,达格列净组和心力衰竭组血红蛋白水平低于假手术组,而达格列净与心力衰竭组差异无统计学意义。达格列净组心脏外形较心力衰竭组减小,且全心质量、左心室质量以及左心室/体质量均低于心力衰竭组（P＜0.05）。HE染色显示达格列净可明显改善心肌细胞的形态学变化。Masson染色显示达格列净组胶原组织分数较心力衰竭组明显降低（P＜0.05）,免疫组化染色提示达格列净组心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ阳性面积百分比较心力衰竭组降低（P＜0.05）。结论　达格列净可抑制心力衰竭后心肌重构,其机制可能与抑制心肌组织中CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达和心肌纤维化有关。