柴胡疏肝汤对戊四氮致痫大鼠海马及额叶皮质c-fos表达的影响

目的 观察柴胡疏肝汤对戊四氮致痫大鼠海马及额叶皮质c-fos表达的影响.方法 选取经戊四氮诱导制作的癫痫模型大鼠48只,按随机数字表法分成6组:癫痫模型组、德巴金组、定痫丸组、柴胡疏肝汤低剂量组、柴胡疏肝汤中剂量组和柴胡疏肝汤高剂量组,每组各8只;另设正常对照组8只.正常对照组和癫痫模型组常规饲养,其他各组给予药物德巴金,定痫丸,低、中、高剂量柴胡疏肝汤处理,均连续灌胃治疗5周.免疫组化染色检测各组大鼠海马及额叶皮质c-fos的表达情况.结果 戊四氮致痫后大鼠海马及额叶皮质c-fos表达明显增强,而应用中、高剂量的柴胡疏肝汤,德巴金和定痫丸治疗后,大鼠海马及额叶皮质c-fos表达均明显减弱,与癫痫模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而柴胡疏肝汤低剂量组大鼠海马及额叶皮质c-fos表达无明显减弱.结论 柴胡疏肝汤的抗癫痫作用机制可能与其含有柴胡皂甙及其他多种有效的抗癫痫成份多靶点干预海马及额叶皮质c-fos表达水平有关.

Abstract：

Objective To observe the effect of chaihushugantang on the expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of pentylenetetrazole (PTZ)-induced epileptic rats. Methods Forty-eight PTZ-induced epileptic rats were randomly divided into 6 groups: epileptic model group,Valproate treatment group, Dingxianwan treatment group, and lower-dose, medium-dose and high-dose chaihushugantang treatment groups (n=8). Normal control group was also employed (n=8). The epileptic rats in the normal control group and epileptic model group were fed normally. Rats of the treatment groups were performed intragastric administration of medicines (Valproate, Dingxianwan and chaihushugantang) for 5 weeks in succession respectively. The expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of all the rats was observed. Results The expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of rats in the epileptic model group was significantly increased, while the c-fos expression in the hippocampus and the frontal lobe cortex of rats in the medium-dose and high-dose chaihushugantang treatment groups and Valproate treatment group and Dingxianwan treatment group was significantly decreased as compared with that in epileptic model group (P<0.05). But the c-fos expression in the hippocampus and the frontal lobe cortex of rats in the low-dose chaihushugantang treatment group showed no obvious decrease. Conclusion Chaihushugantang has good antiepileptic effect, might through affecting the c-fos expression in the epileptic rats. The antiepileptic mechanism of chaihushugantang can be related to saikosaponins and other antiepileptic constituents in it.     

点燃效应癫痫动物模型研究状况及评价

癫痫是神经系统常见病和难题之一。通过复制动物模型，探讨癫痫的发生机制，为临床癫痫的治疗提供理论依据。本文着重综述点燃效应癫痫动物模型研究状况。     

重组组织型纤溶酶原激活剂治疗脑室内出血

目的 探讨利用重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)脑室内给药治疗脑室出血的疗效和安全性. 方法 对自2005年11月至2007年10月收入我院的10例脑室出血患者CT确诊后,进行(单侧或双侧)脑室穿刺置管,4～6 h后经弓l流管缓慢注入rt-PA 4～8 mg,12～24 h重复1次,每24～48小时复查CT了解脑室内血肿清除情况,直至头颅CT扫描显示脑室内高密度影像消失.于脑室出血后30 d时对患者情况利用GOS评分进行评估. 结果 每个患者应用rt-PA总剂量为13～24 mg,30 d后GOS评分为良好4例,中残3例,重残2例,植物生存1例,无患者死亡,无出血、颅内感染等并发症,未发生引流管被血块堵塞情况. 结论 选择适宜剂量和方法的rt-PA脑室内给药能够加速脑室内血块溶解,保持脑室引流管通畅,减少血块占位效应.该方法能够安全有效地改善患者的预后.     

GABAB受体对大鼠海马CA1区锥体细胞突触传递的作用

目的研究激活GABA_B受体对大鼠海马CA1区锥体细胞突触传递的影响。方法对成年大鼠海马脑片CA1区锥体细胞采用“盲法”全细胞电压钳记录,分别检测和分析巴氯芬(10μmol/L)对自发性的兴奋性突触后电流(EPSCs)和抑制性突触后电流(IPSCs)的影响。结果巴氯芬可显著降低符氨酸能EPSCs和γ-氨基丁酸能IPSCs的频率(P＜0．01),各自达58%±7%(n=17)和42%±10%(n=15),而对它们的幅度无显著性影响。结论巴氯芬对海马CA1区锥体细胞EPSCs和IPSCs的抑制作用属于突触前抑制,推测GABA_B受体所介导的这种抑制作用对CA1区神经元兴奋性的传出具有抑制作用,从而对癫痫的产生有控制作用。     

人类GAD67基因转染骨髓基质源性神经干细胞及初步检测

目的利用转基因技术将人类谷氨酸脱羧酶（GAD）67基因转染骨髓基质源性神经干细胞仍MSCs-D-NSCs），获得GAD67修饰的成体专能干细胞。方法以PCR、双酶切及测序鉴定pEGFP-C2-GAD67和pcDNA3.1-GAD67重组子；利用密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs并促其向NSCs方向分化，将编码人类GAD67基因的真核表达质粒pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3．1-GAD67分别转染BMSCs-D-NSCs，荧光显微镜下观察并用流式细胞仪检测转染效率。结果pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD6，均可扩增出约1800bp目的条带，经双酶切和基因测序证实。荧光显微镜下观察可见大量绿色荧光细胞，两种载体转染效率分别为39.3％和40.5％。结论pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD67真核表达载体重组正确，利用脂质体介导人类GAD6，基因能有效转染BMSCs-D-NSCs，为进一步观察其GAD67基因和蛋白的表达提供了前提条件。     

p38应急信号通路参与一氧化氮诱导PC12细胞死亡

目的:探讨一氧化氮诱导PC12细胞死亡的信号转导途径。方法:将亚硝基铁氰化钠(sodiumnitroprusside,SNP)、caspase-3拮抗剂(caspase-3inhibitorⅡ)加SNP或p38拮抗剂(SB203580)加SNP与传代培养的PC12细胞一起孵育,观测细胞的存活率和caspase-3的活性;用MTT法测细胞存活率,caspase-3检测试剂盒测caspase-3活性。结果:SNP以浓度和时间依赖性方式诱导PC12细胞死亡,并增加caspase-3的活性;caspase-3拮抗剂Ⅱ和p38拮抗剂均明显减少细胞死亡且p38拮抗剂明显降低caspase-3的活性。结论:一氧化氮可能通过激活p38、caspase-3信号分子诱导PC12细胞死亡。     

红藻氨酸作用后海马神经元胞膜表面的超微结构的原子力显微镜观察

目的 观察原代培养神经元在红藻氨酸(KA)作用下细胞表面形态的三维构像变化。方法 利用原子力显微镜(AFM)对大鼠海马神经元经不同浓度的KA(25和250μmol／L，50和100nmol／L)分别作用10min和100min后的表面结构进行纳米级水平扫描和观测。结果 正常海马神经元表面光滑，起伏均匀、规律；KA作用后神经元呈退行性改变，表现为胞体肿胀，胞膜表面粗糙，出现隆起和“孔洞”样结构，并且其变化程度分别与作用时问和KA浓度呈量-效关系。结论 KA对海马神经元毒性作用后胞膜表面超微结构所产生的明显变化，可借助AFM清晰观察，并定量分析。     

红藻氨酸致痫后大鼠海马ERK、P38 MAPK和JNK的活性变化

目的研究红藻氨酸(KA)诱导大鼠癫痫发作后海马组织细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p38MAPK和c-jun氨基末端激酶(JNK)的活性(磷酸化状态)的变化情况。方法立体定向大鼠侧脑室内注射KA引起大鼠癫痫发作,采用Western-blot方法观察KA致痫后大鼠海马中活性ERK、p38MAPK和JNK的变化。结果KA诱导大鼠癫痫发作后,海马组织ERK、p38MAPK和JNK的磷酸化水平开始增高,分别于30min、1h和30min后达高峰,呈对照组的4.76倍、2.16倍和3.95倍,两组比较差异具有显著性(P<0.01),之后逐渐下降。结论KA致痫大鼠癫痫发作后,海马组织MAPKs的活性产生变化,其信号通路可能参与癫痫发作后海马组织的病理生理反应过程。     

急性轻中度缺氧条件下心率及收缩压变异性谱变化

目的：应用心率及收缩压变异性（HRV、SBPV）谱分析方法评价急性轻中度缺氧条件下心血管自主神经调节的变化。方法：10名健康男性青年分别吸入氧13．7％（相当于海拔3500m)和11％（相当于海拔5000m）两种氮－氧混合气各20min,将对照和缺氧条件下的HRV和SBPV谱变化进行对比分析。结果：在两种缺氧条件下,受试者均出现血压下降、心率增快反应,HRV谱总功率（TP）和高频成分（HF）功率均显著减小,低频成分（LF）功率与LF／HF功率比值无显著变化,SBPV谱LF功率显著增大,3名缺氧耐力不良受试者尤为明显。不同水平缺氧之间的数值比较差异均无显著性意义。结论：急性轻中度缺氧条件下,人副交感神经抑制,交感神经兴奋,联合应用HRV与SBPV谱分析方法可对心血管自主神经调节活动进行评定;但HRV的LF成分变化机理较为复杂。     

全面性癫痫伴热性惊厥附加症一家系报道及文献复习

目的 分析并确定一个全面性癫痫伴热性惊厥附加症(GEFS+)家系临床表型. 方法 收集先证者及其家系成员临床资料进行分析总结并建立完善的家系谱. 结果 该家系为典型GEFS+家系,6代共有20例受累成员,临床表型9例为热性惊厥(FS),4例为热性惊厥附加症(FS+). 结论 GEFS+具有表型异质性和遗传异质性,常见表型为FS和FS+,为常染色体显性遗传,家族史调查是诊断该病的关键.