广西玉林市2005—2012年狂犬病病原学监测及病毒N基因特征分析

目的分析2005—2012年广西玉林市狂犬病病原学监测结果及病毒N基因遗传变异特征,为狂犬病防控提供科学依据。方法 2005—2012年在广西玉林市采集犬脑组织及临床诊断人狂犬病病例的唾液进行病原学检测,检测阳性标本进行N基因核苷酸序列测定、同源性比较和种系发生分析。结果共采集、检测外观健康犬脑组织728份、临床诊断人狂犬病病例唾液33份,RT-PCR检测阳性率分别为0.96%(7/728)和51.52%(17/33)。获得5条犬源、6条人源狂犬病病毒株N基因全序列。该11条序列之间的核苷酸同源性为94.7%~100.0%,与广西以往分离株GX01的核苷酸序列的同源性为94.5%~98.4%,与疫苗株CTN株的同源性为94.6%~99.7%。进化树分析显示,犬源株和人源株病毒N基因亲缘进化关系很近,处于同一分支,都属于基因Ⅰ型狂犬病病毒。结论从病原学和病毒分子水平证实玉林市外观健康犬携带狂犬病毒及17例临床诊断病例为确诊病例,其病原为狂犬病病毒基因I型,阳性带毒犬的流动是造成本病传播和扩散的主要因素,也是造成该地区疫情高发的重要原因之一。     

广西病毒性脑炎高发区流行病学监测

目的了解广西病毒性脑炎高发区的发病强度、病原谱和流行病学特征,为病毒性脑炎的临床诊疗和预防控制提供依据。方法选择病毒性脑炎高发区贵港市为项目监测点,建立涵盖两市一县由12所县级以上医院组成的急性脑炎和脑膜炎的监测网络,按照疾病筛检标准选择并评估疑似病例,进行流行病学调查和采样,对标本开展常见病毒性脑炎的IgM ELISA检测,将数据录入专用数据库并应用Epi info2002进行统计分析。结果项目监测点贵港市2007年5月~2008年4月实验室确诊的病毒性脑炎年平均发病率为6.42/10万,乙脑病毒、肠道病毒、腮腺炎病毒为主要致病原,流行高峰均为夏秋季,10岁以下散居儿童和学生为高发人群。结论在广西病毒性脑炎高发区的夏秋季,乙脑病毒、肠道病毒和腮腺炎病毒为病毒性脑炎的主要病原,10岁以下散居儿童和学生为高发人群。     

双磷酸化His-PZR蛋白的表达与分离纯化

目的 获得纯化的双磷酸化His-PZR蛋白.方法 本试验采用His-PZR与C-Src蕈组原核表达载体共同转化E-coli BL21菌株的方法,通过IFFG诱导表达,Ni-NTA纯化及HPIE分离纯化等技术,获得双磷酸化的His-PZR蛋白.结果 成功表达了 His-PZR蛋白,约占全菌体蛋白的8.5%,相对分子质量约为10 000;并分离纯化出双磷酸化的His-PZR蛋白.结论 舣磷酸化His-PZR蛋白的表达和纯化,为进一步研究His-PZR与SHP蛋白问的作用机制及其在信号转导过程中的功能奠定了基础.     

人卵泡抑素基因真核表达载体构建和体外表达

目的:体外构建携带人卵泡抑素基因(FS)cDNA的真核表达载体,并观察其在幼年叙利亚地鼠肾细胞(BHK21)中的表达。方法:从新鲜人卵泡抽提液细胞中提取RNA,应用RT-PCR方法扩增人FScDNA序列,克隆到pMD-18T载体中,构成pMD-FS重组克隆质粒。经测序鉴定后,双酶切得到人FS基因cDNA序列,插入到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-FS重组表达质粒。pEGFP-FS重组表达质粒经酶切和PCR鉴定,通过脂质体2000介导瞬时转染BHK21细胞,并检测绿色荧光蛋白(GFP)的荧光表达。结果:成功构建pMD-FS重组克隆质粒,FScDNA序列测序结果与GenBank中公布的序列(Genbank NM_013409.1)同源性为100%;成功构建pEGFP-FS重组表达质粒,将其转染BHK21细胞后,观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:本实验成功构建了人FS的pMD-FS重组克隆质粒和pEGFP-FS重组表达质粒,为进一步研究FS对哺乳动物卵泡发育的影响奠定了基础。     

广西16株狂犬病毒P基因序列分析

目的分析广西16株狂犬病毒P基因序列特点,探讨广西狂犬病高发的可能原因。方法 2005-2008年在广西14个市采集健康犬脑标本3 961份,用直接免疫荧光法（DFA）和RT-PCR法检测狂犬病毒,P基因PCR扩增阳性者进行序列测定和分析。结果 16株狂犬病毒完成P基因序列测定,核苷酸及氨基酸同源性分别为86%-100%和93%-100%,属于基因Ⅰ型狂犬病毒;广西境内至少存在3条狂犬病毒传播链;16株狂犬病毒P基因序列推导的氨基酸序列多个位点发生变异。结论广西存在多个Ⅰ型狂犬病毒株系的流行,可能是近几年广西狂犬病持续高发的原因之一。     

CA4P脂质体的制备工艺研究

目的 研究CA4P脂质体的处方及制备工艺.方法 以包封率为主要评价指标考察制备方法;用透射电镜和粒径测定仪表征脂质体的形态和粒径;用HPLC法测定脂质体中CA4P的包封率和载药量;以正交设计筛选优化最佳处方工艺.结果 脂质体的平均粒径为167 nm,Zeta电位为-24.3 mV,最佳工艺处方的药-脂比为1:12,磷脂-胆固醇为8:1,有机相-水相体积为4:1,水合介质为0.9%NaCl;制备3批脂质体的平均包封率为58%、载药量为4.8%.结论 逆相蒸发-探头超声法可制备具有较高包封率的CA4P脂质体.     

含ω-3多不饱和脂肪酸早期肠内营养对老年重症肺炎患者机械通气时间与炎性因子及免疫功能的影响

目的探讨含ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)早期肠内营养对老年重症肺炎患者机械通气时间、炎性因子及免疫功能的影响。方法选取2017年10月至2020年3月梧州市红十字会医院收治的100例老年重症肺炎患者为对象,按照随机数字表法分为对照组(n=50)和观察组(n=50),对照组给予早期肠内营养支持,观察组营养液中富含ω-3多不饱和脂肪酸,比较两组机械通气时间、ICU住院时间、脱机成功率、多脏器功能障碍(MODS)发生率、营养指标[血红蛋白(HGB)、白蛋白(ALB)、前清蛋白(PAB)]、炎性因子[白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)]、免疫功能及不良反应发生率。结果观察组机械通气时间和ICU住院时间短于对照组(P<0.05),两组脱机成功率和MODS发生率差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组HGB、ALB、PAB水平均高于对照组(P<0.05),观察组血清IL-6、IL-1、TNF-α及CRP水平均低于对照组(P<0.05),观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著高于对照组,CD8+低于对照组(P<0.05);两组均无不良反应发生(P>0.05)。结论ω-3PUFA早期肠内营养可缩短老年重症肺炎患者机械通气时间,减低炎性因子,提高细胞免疫功能。     

绿原酸-β-环糊精包合物的制备及验证

目的:制备绿原酸-β-环糊精包合物并验证。方法:采用研磨法制备包合物,并通过均匀设计实验得到最佳制备条件;用紫外扫描和差示扫描量热法对包合物进行验证。结果:以包合率和载药量为指标筛选出最佳包合条件:即摩尔比绿原酸∶β-环糊精=1∶1,温度25℃,研磨60 min;确定包合物已经形成。结论:利用研磨法制备绿原酸-β-环糊精包合物,是可行的。     

湖南省安仁县1990～2000年儿童先天性疝气发病率分析

目的 了解1990～2000年湖南省安仁县先天性疝气发病率的动态变化趋势及流行病学特征。方法 对1990～2000年出生的围产儿进行监测登记，资料用Visual Foxpro建立数据库，并用SPSS(10．0)统计软件包对先天性疝气的发病情况进行X^2检验等统计学分析。结果1990～2000年湖南省安仁县先天性疝气的发病率变化明显(X^2=47．74，P＜0．05)，2000年发病率最高为21．62％，1998年发病率最低为4．54‰，年平均发病率为8．58‰；全县21个乡镇中，安平发病率最高为14．95‰，洋际发病率最低为3．20‰，不同乡镇间发病率差异无显著性(X^2=1．282，P＞0．05)；男性发病率为13．96900，女性发病率为1．46900，两者之间差异显著(X^2=217．81，P＜0．05)。结论 湖南省安仁县1990～2000年出生儿童先天性疝气的发病率较高，且有上升趋势，各乡镇间发病率差异无显著性，男女发病率差异显著。