用PCR—RFLP和16SrDNA指纹图法分析幽门螺杆菌基因型

本文建立了PCR－RFLP和16srDNA指纹图法．对19株幽门螺杆菌（HP）进行基因型分析：HP尿素酶C基因的PCR扩增产物．分别用HindⅢ、HaeⅢ、AluⅠ酶切，结果显示：每个酶均将19株HP分为3种RFLP图谱．综合HindⅢ，HaeⅢ和AluⅠ酶切结果，19株HP分为10个酶切带型；PCR扩增HP标准株16SrRNA基因，地高辛标记制备550bp探针，19株HPDNA分别经HaeⅢ和EcoRⅠ酶切、电泳后，通过Southern杂交获16SrDNA指纹图，结果显示：HaeⅢ酶切分为14个杂交带型，EcoRⅠ酶切19株HP杂交带型均不同。本实验表明：上述两种方法重复性好，分群力高，可准确有效地对HP作出鉴定并将其分型。19株HP株间存在基因型差异。     

应用噬菌体随机肽库技术筛选幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的抗原表位

目的 筛选和鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白(neutrophil-activating protein,NAP)的有效抗原表位,为Hp疫苗的研制提供基础.方法 以抗NAP的单克隆抗体作为固相筛选分子,经3轮吸附-洗脱-扩增免疫,筛选噬菌体随机7肽库,随机挑选噬菌体克隆,经噬菌体酶联免疫吸附试验(ELISA)、交叉反应试验及竞争抑制试验鉴定阳性克隆,测定阳性克隆所携带DNA序列并进行计算机辅助分析.以制备的阳性噬菌体克隆短肽液免疫小鼠,免疫血清与NAP经Western blot分析,以验证NAP的模拟表位.结果 经3轮免疫筛选后挑选到45个阳性克隆,经ELISA鉴定有12个阳性克隆,测序结果显示5种表位,其中P17噬菌体展示肽FAHLATQ与NAP氨基酸序列(137～143)高度同源,位于NAP高抗原区域(118～140),免疫血清可识别NAP.结论 用噬菌体随机7肽库成功筛选到了NAP的模拟表位,为基于NAP的诊断和疫苗的研制提供了基础.     

头孢克肟致药品不良反应分析

目的:探讨头孢克肟致药品不良反应(ADR)发生的特点及规律。方法:收集国内医药期刊有关头孢克肟致ADR个案报道10例并汇总3家医院2000-2010年上报的头孢克肟致ADR报告79例,共89例,进行分析、评价。结果:ADR临床表现方面,以皮肤及其附件损害居首位(占41.57%),其次为神经系统损害(占19.10%)及消化系统损害(占15.73%);以≤10岁儿童(48.31%)和序贯用药(46.07%)报道率最高;约38.20%的ADR发生在用药48h后。结论:临床应重视头孢克肟引起的ADR,用药时应加强对患者的观察,以减少严重ADR的发生。     

新城疫病毒对TSCCa细胞survivin表达及细胞周期的影响

目的 研究新城疫病毒(NDV)对人舌鳞癌TSCCa细胞survivin表达及细胞周期的影响.方法 通过NDV体外感染人舌鳞癌TSCCa细胞,MTT方法 检测TSCCa细胞的生长情况;采用RT-PCR和Western bloting检测survivin表达变化;流式细胞术分析检测NDV感染后TSCCa细胞分裂周期各时相的变化及细胞凋亡情况.结果 NDV感染后TSCCa细胞降低survivin表达,细胞凋亡率增加,S和G2/M期细胞减少,增殖指数(PI)降低,与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01).结论 NDV感染可抑制TSCCa细胞survivin的表达,影响细胞周期,诱导细胞凋亡.     

33911例新生儿听力联合耳聋基因筛查及随访结果的分析

目的通过分析新生儿听力联合耳聋基因筛查的结果,以及对阳性病例的随访和管理,提高遗传性耳聋的检出率。方法收集33911例新生儿听力联合耳聋基因筛查的结果,应用Sanger测序对听力未通过或基因筛查提示阳性的患儿进行验证。结果听力初筛通过率为93.32%,复筛为87.01%。耳聋基因筛查阳性率为4.18%。GJB2、SLC26A4、GJB3和12SrRNA基因变异的检出率分别为1.98%、1.58%、0.37%和0.25%。共检出126例迟发性耳聋,84例药物性耳聋,4例GJB2纯合/复合杂合变异,5例SLC26A4纯合/复合杂合变异。联合筛查发现GJB2、SLC26A4、GJB3和12SrRNA单杂合变异者听力初筛和复筛未通过的比例分别为6.75%和2.61%、3.3%和1.2%、0.72%和0.14%、0.36%和0%。纯合/单基因复合杂合变异、单基因杂合变异、多基因复合杂合以及GJB3纯合变异组听力筛查未通过率明显高于阴性组,差异具有统计学意义。结论基因检测是对新生儿听力筛查很好的补充。对阳性患儿的追踪管理能够有效提高耳聋的诊断率,但基因筛查不能等同于诊断,应综合分析基因检测、听力筛查和影像学的结果,Sanger/二代测序可作为重要的补充检查手段。     

Vimentin基因敲除HIV-1 gp120转基因小鼠模型的构建

目的 构建波形蛋白（VIM）基因敲除和gp120转基因（gp120 Tg）小鼠模型。方法 将VIM基因敲除小鼠（VIM-/-）和gp120 Tg小鼠杂交（F0代）,然后在产生的子代（F1）中,取分组为VIM+/-/gp120Tg的小鼠一公一母杂交,得到基因型分别为VIM+/+、 VIM+/-、VIM-/-和VIM+/+/gp120 Tg、VIM+/-/gp120 Tg、VIM-/-/gp120 Tg的6组小鼠。其中VIM+/+、VIM-/-、VIM+/+/gp120Tg和VIM-/-/ gp120这4组小鼠互为对照。用PCR法鉴定这上述6组小鼠的基因型,免疫印迹法检测小鼠脑组织中VIM和gp120的表达情况。结果 4组基因型VIM+/+、VIM-/-、VIM+/+/gp120Tg和VIM-/-/gp120Tg小鼠的PCR结果符合预期,免疫印迹结果显示VIM-/-/ gp120Tg小鼠VIM无表达,gp120过表达（P<0.001）,符合预期结果。结论 成功构建了VIM基因敲除gp120转基因小鼠模型,为深入研究波形蛋白在gp120神经毒性作用中的作用机制提供了坚实的研究基础。     

心理干预对更年期妇女初次复杂活动义齿修复效果的影响

目的研究修复诊疗过程中心理干预对初次佩戴复杂活动义齿的更年期妇女修复效果的影响。方法选择初次进行复杂活动义齿修复的更年期妇女98例,随机选取49例为试验组,修复过程中进行心理干预;其余49例为对照组,常规修复。修复后1个月和3个月后分别调查患者对义齿美观、语音、咀嚼、固位效果和舒适性的满意度,并比较2组修复后的调改次数。结果修复后1个月和3个月,试验组患者对义齿语音、咀嚼效果和舒适性的满意度均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。试验组调改次数少于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在更年期妇女初次行复杂活动义齿修复时,根据其心理特点进行心理干预可以有效提高其对义齿的适应性及满意度。     

益生菌抑制大肠埃希菌K1株黏附与侵袭的实验研究

目的评价三联活菌片中的益生菌对大肠埃希菌K1株在肠上皮黏附和侵袭的抑制作用。方法将大肠埃希菌K1株与Lovo细胞共孵育,采用黏附性抑制和竞争性排除方法,检测大肠埃希菌K1株黏附侵袭于Lovo细胞的数量,并采用流式细胞术分析益生菌对大肠埃希菌K1株诱导的细胞凋亡的抑制作用。将Sprague Dawley乳鼠随机分为实验组（益生菌和致病菌）与对照组（致病菌）。应用活菌计数法,对各组乳鼠肠道和血液中大肠埃希菌K1株进行定量检测,观察益生菌对大肠埃希菌K1株血行转移的拮抗作用。结果益生菌在体外能显著抑制大肠埃希菌K1株黏附侵袭于Lovo细胞（P〈0.01）,其抑制作用呈剂量依赖性;益生菌能显著降低大肠埃希菌K1株诱导的细胞凋亡（P〈0.01）;益生菌能显著抑制大肠埃希菌K1株的生长与血行转移,患菌血症的乳鼠数量显著降低（P〈0.01）。结论三联活菌片中益生菌能显著抑制大肠埃希菌K1株对肠上皮的黏附损伤和血行转移。     

同期颅骨修补术及脑室-腹腔分流术治疗大骨瓣减压后慢性脑积水

目的评价同期颅骨修补术及脑室-腹腔分流术治疗大骨瓣减压后慢性脑积水的临床效果。方法选取2009年2月至2013年7月收治的颅脑损伤行大骨瓣减压后慢性脑积水患者52例,按随机数字表法分组,分别采用同期颅骨修补术及脑室-腹腔分流术（VPS）（观察组30例）及传统的先行VPS再行颅骨修补治疗（对照组22例）,统计2组患者术后GCS、GOS评分及并发症发生情况。结果观察组患者的昏迷指数显著降低（P〈0.05）;对于GOS评分而言,虽2组患者总体预后状况比较差异无统计学意义,但观察组预后良好率较对照组显著升高（P〈0.05）;观察组患者的并发症以分流管堵塞、硬膜下积液/血肿最为常见,并发症发生率为33.3%,而对照组出现并发症多以分流过度、感染为主,并发症发生率为40.9%,组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论同期行VPS及颅骨修补术,可及早恢复大脑的解剖形态,促进脑正常生理功能的恢复,对于去骨瓣减压术后脑积水的治疗具有良好的疗效。     

围绝经期妇女慢性牙周炎与骨密度改变的相关关系

目的探讨围绝经期妇女慢性牙周炎与全身骨密度(bone mineral density,BMD)之间的相关关系。方法 2012-07~2014-03在深圳市妇幼保健院口腔疾病防治中心及妇女健康中心随机选择围绝经期慢性牙周炎妇女和牙周健康对照妇女各100例。采用双能X线骨密度测量仪测量正位腰椎和左侧股骨颈的骨密度值;拍摄下颌骨数字曲面断层片,测量下颌骨骨高度、测定牙槽骨骨密度;比较两组患者骨密度之间的差异。牙周检查包括牙周附着丧失(clinical attachment loss,CAL)和牙周探诊深度(periodontal probing depth,PPD)。分析各骨密度测量值与牙周临床指标的相关性。结果病例组与对照组分别有98例和96例完成了全部检查,两组妇女在平均年龄、平均体重指数、基础疾病情况、烟酒史、绝经情况等方面差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。牙周炎组妇女股骨颈、牙槽骨BMD测定值,下颌骨高度均明显低于对照组妇女,且差异有统计学意义(P<0.001)。围绝经期慢性牙周炎妇女的腰椎、股骨颈、牙槽骨BMD与下颌骨高度均呈正相关关系(P<0.001),牙槽骨BMD与PPD均呈负相关关系(P=0.006),股骨颈、牙槽骨BMD与CAL呈负相关关系(P<0.001)。结论围绝经期妇女全身骨密度降低可能会增加慢性牙周炎的发病风险,而定期进行口腔检查并拍摄X线片是发现骨质疏松及口腔疾病有效手段之一。