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1.
目的研究晚期糖基化终产物修饰蛋白对内皮细胞细胞骨架肌动蛋白的形态学影响及特异的糖基化终产物受体和氧化应激在此病理过程中的作用。方法用不同浓度的糖基化终产物修饰人血清白蛋白与人脐静脉内皮细胞株ECV304在体外共同培养不同时间,并设立对照组进行比较,采用免疫荧光染色法显示细胞骨架的形态学改变。结果与对照组相比,糖基化终产物修饰人血清白蛋白以时间和剂量依赖的方式影响内皮细胞骨架肌动蛋白聚合丝状和可溶性单体(或球状)形态的改变。随着糖基化终产物修饰人血清白蛋白作用浓度和时间的增加,丝状肌动蛋白所形成的外周致密带边缘出现锯齿样断裂,趋于变细崩解消散,最终形成由非极性单行排列的肌动蛋白丝组成的应力纤维。可溶性单体表现为向细胞浆和胞膜移位,胞浆区出现点状和丝状染色,细胞间距离明显增大。可溶性糖基化终产物受体的抗体和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐氧化酶抑制剂均可阻断糖基化终产物对细胞骨架的影响。结论糖基化终产物修饰蛋白对细胞骨架的影响是通过与内皮细胞上的糖基化终产物受体结合并引起细胞内的氧化应激所介导的,这一作用可能与糖基化终产物所致血管通透性升高有关。 相似文献
2.
本文介绍用红细胞膜碎片封闭网状内皮系统并出血性休克的方法,制成大鼠创伤后多系统器官衰竭(MSOF)模型。在36例渡过休克的大鼠中,MSOF的发生率为75.0%。肺衰的发生率最高,依次为肝、胃肠道和肾。 相似文献
3.
黄巧冰 《中国病理生理杂志》2008,24(8)
国际休克学会联盟(IFSS)6月28日至7月2日在德国科隆市召开第6届国际休克大会,有31个国家700多位学者参加大会。会上由IFSS及各成员国的休克学会共同发表一份“休克科隆宣言”。宣言希望各国政府、卫生组织、及公众认识到休克是整个世界引起器官衰竭和死亡的主要原因之一,带来生命损失、长期致残、家庭精神和经济负担、社会生产下降等一系列严重后果。宣言中各成员国组织承诺共同开展一项5点行动,力争五年内使休克的病死率下降25%。宣言起草后曾5次修改,最后由各成员国休克学会主席和IFSS主席签字定稿,在会议最后一天向到会的学者和国际媒体发布了这一宣言。 相似文献
4.
基础医学实验教学的改革随着医学教育的发展势在必行。本文报导了在校属新建的机能实验室开展军医本科病生实验教学。通过更新观念、提高认识 ;周密组织、明确分工 ;能者为师、互相学习 ;取长补短、团结协作等方法进行 ,取得了一定的实践效果 相似文献
5.
蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)是一种钙或/和磷脂依赖性蛋白磷酸化酶,广泛存在于人体的各种组织细胞中.它能被细胞外生物活性因素(生长因素、神经递质、细胞因子等)激活,完成靶细胞蛋白的磷酸化,通过蛋白磷酸化后生物活性的改变而完成细胞外源性信号的应答,构成细胞内重要的信号转导系统.许多实验证明蛋白激酶C的激活在血管内皮细胞屏障功能和血管通透性的变化调节中起着重要的作用.本实验从组织、细胞和分子水平对PKC在血管通透性调节中的作用进行了系统的研究.目的和方法1.采用游离灌注的猪冠状微静脉模型,在严格控制生理环境的条件下,通过荧光倒置显微镜,利用荧光比率测定技术,测定了游离猪冠状微静脉的通透性,并观察蛋白激酶C的激活与抑制对微静脉通透性的影响.2.培养单层脐静脉内皮细胞株ECV-304,用同位素标记和液体闪烁计数法检测细胞浆和细胞膜的PKC活性,观察PKC在热损伤刺激后激活和移位的情况.3.应用免疫荧光技术,观察PKC激活和热损伤刺激对人脐静脉内皮细胞株ECV304的F-actin的细胞定位和结构变化的影响,从形态学的角度证明PKC对内皮细胞的作用.结果1.利用PKC的特异性激动剂佛波酯醇(PMA)激活PKC可显著增加血管通透性约至300%.PKC的特异选择性抑制剂bisindolylmaleimide(BIM)阻断了PMA增加通透性的作用;在单纯PMA刺激下,Pa值是对照组的290.94%±78.13%(n=7,血管平均口径D=63.86±3.14μm),而在BIM的影响下,PMA只使Pa值升高到对照的139.97%±20.82%(n=7,D=43.25±3.08μm).2.用PKC特异性激动剂PMA和热损伤刺激都可以导致ECV-304细胞浆中的PKC的激活和向胞膜移位.未受刺激的ECV-304细胞,胞浆中的PKC活性是43.47fmol·mg 相似文献
6.
烧伤刺激介导内皮细胞蛋白激酶C的激活转位 总被引:6,自引:1,他引:5
目的:探讨烧伤刺激对血管内皮细胞蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法:用10%烧伤血清分别刺激细胞0、5、10、30和60分钟后,通过细胞降解和离心获得细胞浆和细胞膜蛋白粗提液。用同位素标记和液体闪烁计数法检测细胞浆和细胞膜的PKC活性。PKC的激动剂佛波酯醇(PMA)100nmol/L刺激细胞作为阳性对照组。选用PKC特异性抑制剂PKC(19-36)预处理细胞后,分别观察烧伤血清和PMA介导的内皮细胞PKC活性的变化。结果:烧伤血清和PKC的激动剂PMA都可以激活内皮细胞的PKC,并使其发生由胞浆至胞膜的转位;用PKC的特异性抑制剂预处理细胞可以分别抑制这种变化。结论:烧伤血清可以介导内皮细胞PKC的激活和转位;烧伤可以通过激活内皮细胞的PKC而导致内皮细胞功能如通透性的变化。 相似文献
7.
目的探讨糖基化蛋白终产物(AGEs)刺激对小鼠肝脏膜突蛋白(moesin)表达及其磷酸化水平的影响。方法 24只C57 BL/6雌性小鼠,随机分为对照组、AGE组、SB203580+AGE组和Y27632+AGE组,各6只。制备模型后,取小鼠肝脏组织进行石蜡包埋、切片,通过免疫组化法对各组肝脏moesin及其磷酸化moesin进行观察并行半定量分析。结果四组moesin均主要表达在肝窦和微血管的内皮细胞,肝细胞或胆管上皮细胞无表达;对照组磷酸化moesin几乎观察不到;AGE组肝窦和微血管内皮细胞中558位苏氨酸磷酸化moesin的表达明显增加;SB203580+AGE组和Y27632+AGE组肝脏内皮细胞磷酸化moesin染色深度明显低于AGE组并高于对照组。对照组、AGE组、SB203580+AGE组、Y27632+AGE组moesin灰度值分别为84.7±0.35、86.2±0.57、85.5±0.69、84.9±0.67,各组moesin相比,P均〉0.05;其磷酸化moesin灰度值分别为34.6±0.36、82.2±0.92、35.7±0.51、35.9±1.67;AGE组的磷酸化moesin与其余三组相比,P均〈0.05。结论 moesin在肝脏主要表达在肝窦和微血管的内皮细胞,AGEs处理或抑制p38 MAPK、ROCK活性后再给予AGEs均不影响肝脏moesin蛋白的表达;AGEs可导致肝脏内皮细胞moesin磷酸化,p38 MAPK和ROCK两条信号途径参与了moesin磷酸化的过程。 相似文献
8.
舌诊是中医诊断疾病的重要方法,最早在《内经》就有记载,在祖国医学诊断学中属于望诊的范畴。中医认为,人体五脏六腑均与胃气相通,并通过胃气上蒸于舌,附着于舌之表面者表现为苔,故苔为胃气所生,舌即为外候器官。舌诊在中医理论体系及临床诊疗实践中占有举足轻重的地位,因而中医舌诊客观化研究具有十分重要的意义。现就近年来舌诊客观化研究概况作一综述。 相似文献
9.
目的 观察烧伤大鼠血清刺激人脐静脉内皮细胞株ECV-304引起的纤维状肌动蛋白在细胞内分布变化的时间效应以及肌球蛋白轻链激酶在其中的作用。方法 用烧伤大鼠血清分别孵育细胞30min、1h、2h、4h和6h。或在烧伤血清作用30min之前或之后使用5μmol/L的ML-7作用30min。使用罗丹明标记的鬼笔环肽探针特异性结合并显示细胞内的纤维状肌动蛋白.并在Nikon TE-300荧光显微镜下观察照相。结果 正常情况下,纤维状肌动蛋白主要分布在内皮细胞内的外周膜部位。使用烧伤大鼠血清进行30min~12h的刺激后,内皮细胞内可观察到明显的应力纤维形成,并且随着刺激时间的延长而增强。可以通过使用肌球蛋白轻链激酶特异性抑制剂ML-7预处理细胞30min来抑制这种效应。此外,ML-7还能够改善烧伤大鼠血清引起的内皮细胞内肌动蛋白重排。结论 本研究表明,大鼠烧伤血清能够通过激活肌球蛋白轻链激酶引起明显的细胞内肌动蛋白排列的改变。在烧伤血清刺激细胞后.抑制肌球蛋白轻链激酶可以改善烧伤大鼠血清引起的内皮细胞骨架重排。 相似文献
10.
虎杖4号与多巴胺、654-2治疗大鼠失血性休克疗效比较 总被引:7,自引:2,他引:7
使用大鼠复制重度失血性休克模型后,分别用盐水、多巴胺、654-2及虎杖4号结晶给予治疗。结果:虎杖4号治疗组大鼠的平均存活时间明显长于其余三组,存活率亦有提高,给药后,三级动脉、静脉的口径恢复正常。提示:虎杖4号可以改善微循环;治疗大鼠失血性休克的疗效优于多巴胺及654-2。 相似文献