病毒性心肌炎(病)患者中IFNγ和IL10的表达及药物干预的研究

本研究采用ELISA法检测心肌炎 (病 )患者外周血Th1/Th2相关细胞因子IFN γ及IL 10浓度 ,以RT PCR检测柯萨奇B病毒 (CVB )表达情况 ,并观察“抗柯”注射液给药后的效果。结果表明 ,(1)急性期者 ,CVB RNA阳性者居多 ,Th1均增高 ,Th2类细胞因子IL 10正常或偏低 ;(2 )恢复期者 ,CVB RNA阴性者居多 ,IL 10均增高 ,IFN γ正常或偏低 ;(3)慢性期者 (包括扩张型心肌病 )Th1/Th2均降低 ,内含CVB RNA持续阳性者。表明心肌炎的炎症主要是Th1细胞所介导 ,而Th2类细胞因子对其有抑制作用 ,抗柯注射液提高Th2活性 ,抑制Th1活性。     

定量RT-PCR法对"苦参"在心肌炎模型中药效学研究

目的用定量RT-PCR法检测“苦参”中抗柯萨奇B病毒有效成份“抗柯注射液”,在Balb/c小鼠病毒性心肌炎模型病毒血症时,对抗“柯萨奇B病毒”的药效。 方法取48只雄性18-22g 8周龄的Balb/c小鼠,随机分成A-H共8组,每组6只。1.各治疗组(A-F组),每只小鼠从腹腔接种0.1ml l04TCID50 CVB3m病毒2h后,每天从尾静脉分别注射抗柯注射液,5、10、15、20、25、30mg/kg,2次/d,连续用药3d。2.病毒组(G组),注射病毒同上法,2h后从尾静脉注入0.3ml无菌生理盐水,2次/d,连续3d。3.空白对照组(H组),腹腔内注射无小牛血清的RPMI-1640培养液,2h后从尾静脉注入0.3ml无菌生理盐水,2次/d,连续3d。 结果 空白组CVB-RNA(-)对接种CVB3m感染后用不同剂量“抗柯注射液”治疗的各小组血液中CVB3m-RNA含量与病毒组相比明显下降,其抑制率(％)与所用抗柯注射液的剂量呈正比,即“抗柯”剂量增加,CVB3m-RNA含量下降的幅度亦增加,每天5-30mg,/kg中的各剂量都有明显抑制病毒增殖的作用。 结论用定量RT-PCR法检测到“抗柯注射液”对Balb/c小鼠病毒性心肌炎病毒血症时效果明显,最小有效剂量为5mg·kg-1·d-1。     

槐果碱体外抗柯萨奇病毒B3m的作用

目的 以HeLa细胞为模型,观察从苦参中提取的槐果碱在体外抗柯萨奇病毒B3m(CVB3m)的作用.方法 ①用微量细胞培养法观察槐果碱对HeLa细胞的毒性.②用细胞病变效应(CPE)抑制法观察槐果碱体外抗CVB3m作用.③用MTT法和结晶紫染色法观察槐果碱对CVB3m感染的HeLa细胞的保护作用:在96孔板上种植HeLa细胞并予CVB3m吸附1 h,加入不同浓度的槐果碱,并设立病毒、细胞、槐果碱对照,培养15 h后以MTT法和结晶紫染色法测定比较各组细胞能量代谢率和细胞存活数.结果 ①槐果碱稀释到＜391 μg/mL,对HeLa细胞无毒性;≥783 μg/mL引起HeLa细胞CPE.②槐果碱6.25 ～ 50 μg/mL有直接抗病毒作用,减轻CPE;＞100 μg/mL反而会加重、加快CPE.③槐果碱1.56 ～ 25 μg/mL对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用,用MTT法和结晶紫染色法测得细胞能量合成代谢、细胞存活数较病毒对照组增加(P＜0.05);槐果碱在50、100 μg/mL时反而加重病毒对细胞的抑制,使细胞存活数、细胞代谢率较病毒对照组下降(P＜0.05).结论 一定浓度的槐果碱在体外有抗CVB3m作用,对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用.     

抗柯注射液治疗柯萨奇B病毒性心肌炎及其机理研究

目的：探讨抗柯注射液治疗萨奇Ｂ病毒性心炎作用机理。方法：以苦参中抗柯萨奇病毒的有效成分制成纯度为９９．４３％的抗柯注射液（下称ＲＳＦ）治疗７６例血中柯萨奇Ｂ病毒核酸（ＣＢＶ－ＲＮＡ）持续阳性的病毒性心肌炎患者（Ａ组），并与用葡萄糖加胰岛素加氯化钾治疗的５０例患者（Ｂ组）进行对照。结果：ＲＳＦ对血中ＣＢＶ－ＲＮＡ的清除率与所用药物剂量及血中药物浓度有相关性；患者心悸、胸闷气短的总有效率（９６．０％）     

抗柯注射液对柯萨奇B病毒性心肌炎和扩张型心肌病持续感染干预的实验研究

目的 :研究柯萨奇B病毒性心肌炎 (VMC)、扩张型心肌病 (DCM )中病毒持续感染与中药干预作用。方法 :①通过急慢性VMC动物模型 ,用定量多聚酶链反应测脾脏白细胞 (WBC)中以及心肌匀浆中的柯萨奇B病毒核糖核酸 (CBV RNA) ,观察其病毒持续状态 ,以明确病毒持续感染与DCM的意义 ;②观察苦参中抗柯萨奇B病毒的有效成分 (SFA)干预价值。结果 :在急性VMC模型中 ,10mg·kg-1·d-1、15mg·kg-1·d-1、2 0mg·kg-1·d-1SFA分别能清除CBV RNA达 6 7.5 8%、77.0 0 %及 92 .88%。在慢性 (2 70d)VMC动物模型脾脏WBC及心肌匀浆中定量检测的结果均证明有持续感染的存在。用 2 0mg·kg-1·d-1SFA治疗后 ,在心肌匀浆中CBV RNA的清除率为 92 .77% ,脾脏中CBV RNA的清除率为 89.0 4 %。结论 :DCM与病毒持续感染有关 ,SFA能清除CBV RNA ,其清除率与剂量有关 ,并见明显减少病变心肌的病理变化。     

抗柯注射液对柯萨奇B3病毒感染小鼠自然杀伤细胞活性的影响

目的 :检测 BAL B/ c小鼠在感染柯萨奇 (cox) B3病毒后自然杀伤 (NK)细胞活性的动态变化以及抗柯注射液 (RSF)对其影响。方法 :将小鼠分为正常对照组、病毒对照组、10 m g/ kg RSF组、2 0 mg/ kg RSF组和 30m g/ kg RSF组 ,每组 17只 ,分别在病毒感染后第 3天、8天、12天用乳酸脱氢酶释放法 ,检测各组小鼠外周血的NK细胞活性 ,并将心脏行组织病理检查。结果 :病毒感染后第 3天 NK细胞活性显著升高 (6 7.11± 2 .5 2 ) % ,之后进行性下降 ,第 12天时低于正常 [(42 .2 6± 1.6 1) %∶ (47.79± 4.0 3) % ];RSF对 cox B3病毒感染小鼠的 NK细胞活性有双向调节作用。大剂量 (2 0 mg/ kg和 30 mg/ kg) RSF在第 3天时对增高的 NK细胞活性有抑制作用 ,第 12天时可使降低的 NK细胞活性恢复至正常水平 ;小剂量 (10 mg/ kg) RSF在第 3天时对增高的 NK活性无抑制作用 ,但第 12天时也能使降低的 NK活性恢复至正常。病毒感染第 8天时心肌病变最重 ,小剂量 RSF组心肌病变改善较少 ,大剂量 RSF组改善明显。结论 :RSF调节 cox B3病毒感染后机体的 NK细胞活性可能是其防治病毒性心肌炎的重要机制之一。     

玉屏风散及生脉饮对柯萨奇B病毒性心肌炎的疗效观察

本文报道用乳酸脱氢酶释放法对30例柯萨奇 B 病毒性心肌炎患者作自然杀伤(NK)细胞活性的检测,并与20例健康志愿者对照。结果发现,80%的患者有 NK 细胞活性降低,其中24例(80%)患者低于14%,15例(50%)患者低于10%。用玉屏风散和生脉饮治疗2～3个月后复查,NK 细胞活性由治前的12.26±1.31(%,M±SD,下同)升高至31.99±4.23(P<0.001),同时患者的临床症状好转,心电图明显改善。提示玉屏风散和生脉饮可用于治疗柯萨奇 B 病毒性心肌炎。     

定量RT-PCR检测肝细胞P450酶基因与苦参的关系

目的明确肝脏微粒体中细胞色素P450酶活性与苦参中对抗CVB病毒的有效成分抗柯注射液药物剂量及用药时间的关系.方法用定量RT-PCR法,在Begale犬长毒试验的不同时期(45、90、135 d),用不同剂量抗柯注射液(7.5、15、30 mg/kg)检测肝脏微粒体中细胞色素P450酶基因(β-actin/P450)的特异mRNA.结果 P450酶基因(β-actin/P450)特异信使核糖核酸mRNA随所用抗柯注射液剂量及用药时间而增加(P＜0.01).结论 P450的比值随药物剂量及时间延长而上升,可视为机体抵抗中毒而作出的一种适应性反应,可用于有关药物的毒理研究.     

定量RT-PCR检测肝细胞P450酶基因与苦参的关系

目的明确肝脏微粒体中细胞色素P450酶活性与苦参中对抗CVB病毒的有效成分抗柯注射液药物剂量及用药时间的关系.方法用定量RT-PCR法,在Begale犬长毒试验的不同时期(45、90、135 d),用不同剂量抗柯注射液(7.5、15、30 mg/kg)检测肝脏微粒体中细胞色素P450酶基因(β-actin/P450)的特异mRNA.结果 P450酶基因(β-actin/P450)特异信使核糖核酸mRNA随所用抗柯注射液剂量及用药时间而增加(P＜0.01).结论 P450的比值随药物剂量及时间延长而上升,可视为机体抵抗中毒而作出的一种适应性反应,可用于有关药物的毒理研究.