用电融合技术建立抗甲组虫媒病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的研究

1980年Zimmermann报告了电场诱导细胞融合的新技术。它主要包括两个电过程:一是以电介质电泳使细胞形成“串珠”,达到细胞紧密接触;二是以瞬间直流高压电脉冲使细胞发生可逆电穿孔,相邻细胞的细胞质沟通,达到细胞融合。由于这一技术具有可使差异较大的细胞发生融合,在显微镜下能观察融合过程,物理刺激对细胞无毒性,融合率较PEG法高等优点。引起了许多学者的兴趣。现已在植物细胞,动物细胞,菌细胞,以及脂质体、质粒与细胞的融合等方面进行了广泛的应用研究。我们用这一技术建立鼠B淋巴细胞杂     

热疗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤158例

[目的]观察热化疗治疗晚期恶性肿瘤的近期疗效及安全性.[方法]对158例晚期恶性肿瘤患者,根据病种不同,选用相应化疗方案治疗,同时采用NRL-001型内生场深部肿瘤热疗系统对病灶局部进行加温,加温至41℃～43℃,加温时间为60～90分钟,每例患者热疗5～20次,平均9次.[结果]158例中,CR9例(5.7%),PR77例(48.7%),SD 47例(29.7%),PD25例(15.8%),CR PR为54.4%.毒副反应主要为化疗所致的血象异常和消化道反应,热疗所致的反应少见.[结论]热疗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤有较好效果,毒副作用轻,值得临床推广应用.     

非小细胞肺癌患者外周血与组织中K-ras基因突变的研究

目的检测非小细胞肺癌患者外周血与肿瘤组织K-ras基因突变率及两者的一致性,探讨外周血K-ras基因突变的临床应用价值。方法应用实时荧光定量PCR方法检测257例非小细胞肺癌组织,318例非小细胞肺癌外周血,其中185例外周血标本和组织标本配对,检测其中K-ras基因突变,比较外周血和组织标本突变一致性,分析K-ras基因突变和患者临床特征相关性。结果外周血标本中检测出37例突变(11.64%),组织标本中29例突变(11.28%),两种标本一致性为76.19%,差异有统计学意义(Kappa=0.671,P=0.000)。结论非小细胞肺癌患者外周血与组织K-ras基因突变一致性较高,在无法获得组织学标本时可以检测外周血K-ras基因状态,为非小细胞肺癌的临床诊疗提供帮助。     

逆转录—多聚酶链反应扩增黄病毒核酸的研究

黄病毒基因组为单链，正股ＲＮＡ，全长约１１Ｋｂ。在其ＮＳ１基因序列设计了一对通用引物，ＤＪＳ（＋）和ＤＪＡ（一）均为１７个硷基，扩增序列长度为４１３ｂＰ．应用逆转录一一多聚酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）成功地扩增了登革病毒（ＤＥＮ）１，２，３，４型和乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）基因部分片段，其扩增片段的大小与设计相符。采用该引物检测国内分离株ＤＥＮ１／（ＧＺ）、ＤＥＮ２（ＨＮ９１）和ＪＥＶ（Ａ２）株同样出现一条明显的扩增带（约４１３ｂＰ），说明该引物也适合于我国分离株。应用通用引物扩增黄病毒中的ＰＯＷ和ＬＧＴ均出现一条特异带。甲病毒属的辛德毕斯和基孔肯稚病毒应用该引物扩增后无特异性条带；扩增Ｃ６／３６细胞也无特异带。表明该通用引物特异性良好，对于今后黄病毒感染的临床快速诊断和进一步的分子病毒学研究均有重要意义。     

老年消化系统恶性肿瘤对骨密度的影响

目的探讨消化系统恶性肿瘤与老年人骨量减少的关系。方法对患消化系统恶性肿瘤的老年人以双能X线骨密度仪测定其股骨及腰椎骨密度(BMD),并与无恶性肿瘤的对照组比较。结果消化系统恶性肿瘤老年患者各部位的BMD均低于对照组,P<0.05。结论消化系统恶性肿瘤可引起老年人骨量减少,提示在治疗消化系统恶性肿瘤同时,应关注骨质疏松的防治。     

白纹伊蚊户内孳生习性与登革热流行关系分析

白纹伊蚊是我国常见的蚊种,又是登革热和乙脑的重要传播媒介。我们在近几年的登革热流行病学调查中,发现白纹伊蚊有户内孳生习性,为弄清户内孳生在登革热传播中的作用,我们于1996～1998年的7～8月,在原登革热流行区设点进行调查,并以非流行区做对照比较。现将调查结果报告如下。1　材料与方法11　调查对象　在流行过登革热的广州、番禹、潮州、乐昌4市各选一个管理区作为调查点,并选一个与之相近,但从未发生过登革热的管理区作为对照点。12　调查方法　调查点和对照点,均采用系统抽样法,按门牌号顺序随机抽取50～100户居民,分户内(包括距屋5…     

海南岛不明发热病人血虫媒病毒分离鉴定及抗体检测

目的从海南岛不明发热病人血中分离和鉴定虫媒病毒,并在当地人群进行抗体检测,以了解南方地区虫媒病毒的感染情况。方法采用微量法细胞培养对205份发热原因不明患者血标本进行病毒分离,应用生物学性状检测、间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制试验(HI)等技术对分离病毒进行鉴定。采用IFA检测从当地人群血清中分离出的病毒的抗体水平。结果从发热早期患者血标本中分离出2株病毒,鉴定为甲病毒,命名为HF 7和HC 6。这2株病毒与8种甲病毒免疫腹水中的SIN的免疫腹水呈现最高的血凝抑制滴度(分别为1∶160和1∶320),与SIN免疫腹水的交叉荧光效价最高(分别为1∶320和1∶640),但HF 7和HC 6病毒的免疫腹水与8种甲病毒的血凝抑制试验和交叉免疫荧光试验无反应,表明HF 7和HC 6病毒虽与SIN病毒的免疫腹水血抑效价及荧光效价高,但HF 7和HC 6的免疫腹水与SIN病毒无抑制效价和免疫荧光效价。当地人群对这两株病毒感染的抗体阳性率分别为3.3%(15/451)和8.4%(38/451)。结论HF7和HC6为甲病毒的一个新种。海南岛人群存在甲病毒感染。     

广东流行的三株登革1型病毒包膜蛋白基因的序列测定与分析

目的通过对广东省不同地区、不同流行期间分离的三株登革1型病毒(DVI)的结构蛋白E基因进行序列测定及分析．了解各流行株之间的遗传差异，追踪其可能的传染来源：方法应用RT-PCR技术扩增病毒的结构蛋白E基因，克隆到PMD18-T载体．转化JM109宿主菌，挑取阳性克隆进行鉴定及序列测定，应用计算机软件与国内外参考及流行株进行同源性分析．并绘制基因系统发生树：结果3株DVI病毒E基因序列长度均为l485bp，编码495个氨基酸，核苷酸序列同源性在91％～98％之间、推测的氨基酸序列同源性在94％～99％之间：GD23／95与A88核苷酸(氨基酸)同源性为95％(98％)，与其他株的同源性相对较低，2株属同一基因型；GD14／97和GD05／99与Cambodia共享序列非常接近．3株同属另一基因型。结论广东省1997、1999和1995年流行的登革热可能来自境外不同的疫源地。     

登革4型病毒广东流行株NS2a-NS2b基因序列分析

目的分析登革4型病毒(DV4)广东株的基因序列，比较其同源性，追查DV4的地理来源。方法RT—PCR扩增DV4 NS2a—NS2b基因片段，克隆至PGEM T载体，分析其序列。结果1990年分离的4个毒株在所分析的区段具有相同的序列，与DV4H241、814669株、1978年广东株(GD785682)和1993年广东株(GZB5)的核苷酸(氨基酸)同源性分别是97％(98％)、94％(96％)、93％(98％)和99％(98％)。GD785682株与DV4H241、814669株和1993年广东株(GZB5)的核苷酸(氨基酸)同源性分别是93％(98％)、96％(97％)和98％(93％)。结论1990年引起广东省登革热流行的毒株很可能只有1个，1990年的毒株与1978年的毒株可能来自不同的疫源地。     

海南省琼中地区家畜体表寄生蜱的调查分析

目的了解家畜体表寄生蜱物种多样性及群落结构特点，并分析其与疾病的关系。方法采用逆毛式检蜱法，定义家畜体表寄生蜱为一个群落，运用生态学中相对优势度（组成比率）、优势指数、多样性指数和均匀度等方法进行测定。结果从放养的5群东山羊（20头）、4群黄牛（10头）和水牛（5头）中共检获蜱2614只，分属4个种属（血红扇头蜱、微小牛蜱、粒形硬蜱和钝刺血蜱），前两者为优势种；其中东山羊的优势度指数、多样性指数和均匀度等均高于黄牛和水牛。结论海南琼中地区家畜体表寄生蜱有4种，优势种为血红扇头蜱和微小牛蜱；其中东山羊的群落结构最丰富。应警惕斑点热群立克次体自然疫源性疾病的流行。