藤梨根提取物对食管癌EC109细胞抑制作用

目的 观察藤梨根乙酸乙酯提取物对食管癌EC109细胞生长、凋亡影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养食管癌EC109细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测用药后EC109细胞凋亡率变化,免疫组化法检测用药后EC109细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl -2)、Bcl -2相关X蛋白(Bax)蛋白表达变化,激光共聚焦显微技术测定用药后EC109细胞胞内[Ca2+]i变化.结果 细胞培养24、48、72 h后,对照组细胞凋亡率分别为(1.67±0.76)％、(2.32±0.45)％、(2.98±0.89)％,Bcl -2蛋白表达率分别为(50.12±3.41)％、(49.78±5.65)％、(51.25±6.34)％,Bax蛋白表达率分别为(17.98±2.85)％、(18.27±3.12)％、(17.76±3.64)％,而各干预组细胞凋亡率为7.05％ ～51.11％,均明显增加(t=5.419～17.826,P＜0.05),存在时-效和量-效趋势,同时其细胞Bcl -2蛋白表达降低,为43.32％ ～ 10.46％,Bax蛋白表达上调,为24.54％～ 63.47％,均存在时-效和量-效趋势,当作用时间≥48 h或浓度≥100 μg/mL时,干预组上述变化与对照组比较,差异有统计学意义(Bcl-2∶t=3.58～10.14;Bax∶t =5.047 ～ 11.065,P＜0.05);用药后细胞内[Ca2+]i明显升高,12h达高峰,此后缓慢减低,至48 h仍明显高于对照组.结论 藤梨根乙酸乙酯提取物可以明显抑制食管癌EC109细胞增殖,并诱导细胞发生凋亡,可能与降低其Bcl -2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,升高细胞内[Ca2+]i有关.     

藤梨根提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其作用机制。方法建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,观察藤梨根乙酸乙酯提取物的作用,设置对照组、治疗组(低剂量组、高剂量组)。通过测量移植瘤体积变化绘制生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,采用TUNEL法检测移植瘤凋亡指数,采用免疫组化法检测移植瘤Survivin蛋白表达、增殖指数,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测移植瘤Survivin mRNA变化。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。各治疗组移植瘤组织凋亡指数则明显高于对照组,而Survivin mRNA及蛋白表达较对照组明显减少,高剂量组尤其明显,各组间上述指标比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论藤梨根乙酸乙酯提取物在体内对肺癌A549细胞生长有抑制作用,可以诱导移植瘤细胞发生凋亡,促进癌细胞凋亡并下调瘤细胞Survivin蛋白和mRNA表达。     

藤梨根提取物抑制肺癌A549细胞增殖作用机制研究

目的观察藤梨根乙酸乙酯提取物（RAE）对肺癌A549细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的RAE进行干预,流式细胞术检测用药后A549细胞凋亡率变化,免疫组化SP法检侧细胞Bcl-2、Bax蛋白表达变化,RT—PCR法检测细胞Bcl-2、Bax mRNA表达,激光共聚焦显微技术测定细胞胞内Ca^2＋浓度变化。结果各治疗组给予RAE作用后细胞凋亡率明显增加,并存在时相性和量效依赖性;用药后A549细胞Bcl-2蛋白和mRNA表达降低,而Bax蛋白和mRNA表达上调,细胞内Ca^2＋浓度明显升高,与对照组比较均有显著统计学差异（P均〈0．01）,亦存在时相性和量效依赖性。结论RAE可明显诱导肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与降低其Bcl-2蛋白和mRNA表达、上调Bax蛋白和mRNA表达、升高细胞内Ca^2＋浓度有关。     

内支架缓解食管狭窄的临床研究

目的研究应用镍钛记忆合金网状及带膜内支架,"Z”型不锈钢丝带膜内支架缓解食管狭窄的疗效.方法食管狭窄70例分别在X线透视下,食管镜下和手术中置入内支架.结果70例中,随访45例,早期置放网状内支架2例食管腔内黏液堵塞,带膜支架术后吞咽困难缓解,能进半流质,平均存活8个月.结论带膜内支架可明显提高食管狭窄患者的存活质量,但不能显著延长食管癌患者带瘤存活时间.     

肿瘤转移相关基因MTA1过度表达与老年人肺癌临床病理特征的关系

目的探讨肿瘤转移相关基因MTA1与老年人肺癌发生、发展的关系。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化Wax Envision多聚复合物酶标法检测66例老年人非小细胞肺癌（NSCLC）中MTA1 mRNA和蛋白的表达,同时结合临床病理特征进行分析。结果老年人肺癌组织中MTA1 mRNA表达和蛋白阳性表达率均明显高于正常肺组织和癌旁组织（P〈0.05）;MTA1蛋白阳性表达率在不同年龄、性别、是否吸烟、肿瘤大小、组织学类型间差异无统计学意义（P〉0.05）,在不同分化程度（48.6%与82.8%,χ^2=8.643,P〈0.05）、TNM分期（51.0%与100.0%,χ^2=18.616,P〈0.01）、淋巴结转移与否（33.3%与75.0%,χ^2=9.821,P〈0.05）组间差异有统计学意义。结论MTA1在老年人肺癌中呈高表达,且与肺癌的浸润、转移密切相关;MTA1表达可能作为判断老年人肺癌生物学行为的参考指标。     

藤梨根提取物对肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响

目的 观察藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞生长增殖、细胞周期及凋亡的影响.方法 体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,台盼蓝计数活细胞绘制不同浓度药物作用后细胞的生长曲线;四甲基耦氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度药物作用不同时间对A549细胞生长的抑制率;采用流式细胞术(FCM)测定肺癌细胞周期、凋亡率变化;采用透射电镜观察药物作用后细胞的超微结构变化.结果 台盼蓝计数活细胞及MTT实验结果 均显示当药物浓度在20～160 μg/ml之间时,体外藤梨根提取物可明显抑制肺癌A549细胞的生长,呈现出明显的时间和剂量依赖性.FCM检测显示药物作用后,Go/G1期细胞数目增多,S期和G2/M期细胞数目相应减少,细胞发生G0/G1期阻滞,细胞凋亡率亦明显增加,随药物浓度增加、作用时间延长,其细胞周期阻滞作用及凋亡诱导作用逐渐增强.药物处理48 h后各组A549细胞透射电镜下均可见不同阶段典型的凋亡细胞形态学变化.结论 藤梨根提取物对人肺癌A549细胞生长有明显的抑制作用,呈现时效-量效关系,其作用与使细胞周期发生阻滞和诱导细胞凋亡有关.     

c-FLIP反义寡核苷酸对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤抑制作用

目的 研究细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白反义寡核苷酸(c-FLIP-ASODN)对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 采用肺癌A549细胞株建立裸鼠移植瘤模型,将其分为ASODN组及空白对照组、脂质体转染组、无义寡核苷酸(SODN)组,通过移植瘤生长曲线、终末瘤重免疫组化法检测c-FLIP蛋白表达、增殖指数,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测移植瘤c-FLIP mRNA变化,TUNEL检测凋亡指数.结果 ASODN干预后移植瘤生长缓慢,22 d时瘤体积达到最大,此后呈缩小趋势,终末瘤体积及瘤重分别为(376.9±45.8)mm3、(512.4±33.6)mg,明显低于其他各组(P＜0.01),抑瘤率为64.31%;ASODN组移植瘤组织增殖指数为(25.71±5.42),c-FLIP mRNA表达量为(0.30±O.05),c-FL.IP蛋白表达阳性率为(19.54±6.36),均明显低于各对照组;凋亡指数为(39.68±6.28),明显高于其他各组(P＜0.01).结论 c-FLIP-ASODN对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,其机制与降低c-FLIP mRNA和蛋白表达、抑制移植瘤细胞的增殖活性和促进肿瘤细胞凋亡有关.     

核因子κB抑制因子基因多态性与非小细胞肺癌的关系

目的探讨核因子κB抑制因子（I-κB）HaeⅢ基因多态性与非小细胞肺癌（NSCLC）的关系。方法选取110例NSCLC患者和110例年龄、性别相匹配的健康对照者,采用聚合酶链反应—限制性酶切长度多态性（PCR-RFLP）分析方法检测I-κB的HaeⅢ基因多态性分布,分析HaeⅢ基因多态性与罹患NSCLC癌危险性的关系。结果NSCLC组和正常对照组I-κB基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,两组的HaeⅢ基因型分布比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;G等位基因频率NSCLC组为61.8%,对照组为47.7%;A等位基因频率NSCLC组为38.2%,对照组为52.3%,差异也有统计学意义（P〈0.05）;等位基因频率与NSCLC相对风险度分析显示G等位基因者患NSCLC是携带A等位基因者的1.773倍（OR=1.773,95%CI=1.225～2.474）。结论I-κB基因的HaeⅢ基因多态性影响罹患NSCLC的危险性,G等位基因是NSCLC的危险因素,携带等位基因G可能比携带等位基因A的人群更容易患病。     

淋巴结转移对早期食管癌预后的影响

国内、外大量临床研究表明，淋巴结转移程度是影响早期食管癌预后最重要的因素之一，可根据早期食管癌患者的淋巴结转移程度，对潜在的高危人群给予术后辅助化疗，以降低复发率，改善预后。大量研究表明，在判断进展期食管癌预后时以阳性淋巴结个数为标准的方法要优于以转移淋巴结解剖位置为标准的分期法。     

老年食管癌患者术后胃排空障碍的发生与治疗

胃排空障碍(DGE)是食管癌切除术后的少见并发症,文献报道发生率为0.8%～3.9%[1].其主要表现为术后进食时出现胸闷、气短、上腹胞胀及恶心、呕吐,呕出物为胃内容物.本文针对老年食管癌患者术后 DGE 发生的相关因素及对策进行分析.