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1.
目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人表皮细胞癌A431细胞内核转录因子(NF-κB)表达的表观遗传修饰效应,探讨联合5-氨基酮戊酸介导光动力疗法(ALA-PDT)的增敏作用。方法:低氧诱导培养A431细胞,用MTT比色法检测不同浓度EGCG对A431细胞增殖的影响,MS(methylation specific)-PCR检测p16INK4ɑ基因甲基化变化,免疫印迹检测NF-κBp65,DNMT1,HDAC1,CyclinD1,HIF-1α,VEGF,p16INK4ɑ表达,并用免疫细胞化学染色观察A431细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin);用流式细胞仪检测EGCG联合ALA-PDT诱导的A431细胞凋亡。结果:EGCG具有抑制A431细胞增殖并诱导凋亡的作用,抑制效应呈浓度依赖性;p16INK4ɑ基因甲基化水平减低显著;免疫印迹显示NF-κBp65,DNMT1,HDAC1,CyclinD1,HIF-1α,VEGF表达下调,p16INK4ɑ表达上调;E-cadherin表达上调显著,呈浓度依赖性。EGCG联合ALA-PDT治疗组促凋亡作用显著。结论:EGCG对A431细胞具有抑制增殖、血管生成、侵袭的作用,通过影响NF-κB表观遗传修饰诱导细胞凋亡。EGCG联合ALA-PDT的促凋亡作用,增强了A431细胞对ALA-PDT的敏感性。  相似文献   
2.
细胞原癌基因 (protooncogene)是存在于正常细胞基因组中具有高度保守性的基因 ,它们的表达受到严格的时空控制 ,在调控细胞正常的生长、增殖、分化和发育中起着至关重要的作用。但在细胞生长过程中 ,原癌基因可以通过基因扩增、染色体移位、插入及点突变等途径被激活转变成癌基因(oncogene) ,使细胞获得不死性和恶性增生的能力 ,这对肿瘤的发生起重要的作用。急性髓细胞性白血病 (Acutemyelogenousleukemia ,AML)是由于髓性造血细胞在发育的不同阶段发生恶性转化 ,引起细胞的恶性无限制增…  相似文献   
3.
目的检测纳米脂质体槲皮素对人食管癌癌干样细胞凋亡的诱导作用,并探讨其机制。方法以氯仿-DMSO预溶的脂质体槲皮素经负压旋转蒸发、超声破碎及80nm过滤制备纳米脂质体槲皮素。将其作用于人食管癌细胞系Eca109/9706细胞的生长抑制率(MTT法),及作用后食管癌细胞中羟自由基(OH^-)、NO、PTEN、NF-κB及Caspase-3的表达(免疫组化法)及凋亡率(采用TUNEL法)。检测Eca109/9706细胞中CD133、MDR1的髟双免疫酶标及单、双荧光标记的复合率。结果纳米脂质体槲皮素处理的Eca109/9706细胞的生长抑制率、OH^-、NO、PTEN、NF-KB及Caspase-3表达和凋亡率均显著高于对照组(P〈0.01)。Eca109/9706细胞的的单免疫荧光/单免疫酶标率各为80%及70%,双免疫荧光/双免疫酶标的复合率为30%-43%。结论纳米脂质体槲皮素可诱导Eca109/9706细胞产生氧化应激反应并激活PTEN、NF-κB的转导途径,最终通过Caspase-3诱导细胞凋亡;CD^+133、MDR1^+可作为癌干样细胞的标志。  相似文献   
4.
目的 研究高温对老年小鼠腹腔巨噬细胞热休克蛋白 (HSP) 70、诱导性一氧化氮合酶 (i NOS)及其基因 (i NOS m RNA)表达的影响 ,探讨提高老年机体对缺血、缺氧及其它有害刺激的预适应能力及免疫调节能力的途径。方法 将小鼠分为实验组和对照组。采用免疫组化、组织化学、原位杂交及完整细胞斑点印迹技术检测 HSP70、i NOS及 i NOS m RNA的表达 ,对所有斑点印迹信号作薄层扫描 ,并用 t检验对扫描值进行统计学处理。结果  HSP70、i NOS及 i NOS m RNA的表达实验组为 5.97± 2 .1 1、1 1 .0± 1 .2及 2 1 .4± 1 .8;对照组为 2 .1 4± 0 .76、7.3± 0 .7及 1 4 .4±1 .8;两组相比有显著差异 (P<0 .0 1 )。结论 高温对老年机体免疫调节及对有害刺激的预保护能力有促进作用。  相似文献   
5.
目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase 1,TGase1)酶的活性.方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE).应用辣根过氧化物酶(HRP)-单丹酰尸胺结合物对鳞屑铺片标本检测TCase 1酶活性.结果:健康人指甲和鳞屑的SDS-PAGE图谱皆呈现4条主带:63 ku、54 ku、48 ku及38 ku,银屑病患者指甲及鳞屑的SDS-PAGE图谱也呈现此4条主带,但多数主带扫描数值的水平较高,P<0.01.健康人的鳞屑铺片标本TGase 1酶活性呈现为棕黄色细颗粒定位于角质深层角质形成细胞(KC)的周缘;相比之下银屑病患者的TGase 1酶活性缺乏.结论:指甲及鳞屑的SDS-PAGE主带相似,前者图谱更清晰可能与其蛋白较稳定有关.银屑病患者比健康人的SDS-PAGE图谱主带表达水平升高,提示其KC可能呈增生状态,表达产物较多;患者TGase 1酶活性的缺如提示其表皮屏障功能有缺陷,可能与其参与代偿性增生有关.  相似文献   
6.
7.
目的研究针刺对小鼠腹腔巨噬细胞的热休克蛋白(HSP)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)及其mR-NA表达的效应。方法将24只昆明小鼠腹腔注射无菌石蜡油后,随机分为3组:电针(EA)组、对照1(C1)组和对照2(C2)组。将3组收集的腹腔巨噬细胞制备成玻片和硝酸纤维素膜(NCM)两种标本,应用原位杂交、免疫细胞化学、细胞化学及斑点印迹技术检测HSP70、iNOS及iNOSmRNA。结果HSP70定位于巨噬细胞的胞质和胞核;iNOSmRNA及iNOS均定位于巨噬细胞的胞质;3组的iNOSmRNA、iNOS、HSP70的斑点印迹的扫描数值均为EA组>C2组>C1组(P<0.01)。结论电针可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的HSP70、iNOS及iNOSmR-NA表达。  相似文献   
8.
用改良的NBT还原法观察了亮氨酸脑啡肽(LEK).甲硫酸脑啡肽(MEK)和P物质(SP)对正常人周缘血多形核白细胞(PMN)细胞吞噬杀伤作用的影响。结果表明:低浓度(10~(-10)mol/L)的三种神经免疫肽可使PMN的NBT阳性率分别提高到57.9%、49.8%和73.6%;而对照的阳性率为11.2%。表明三种神经免疫肽均能不同程度地增强正常人PMN的吞噬杀伤能力。不同神经免疫肽增强效应的差异可能是由于PMN的兴奋性和抑制性受体同时被激活后不同的净结果所致。  相似文献   
9.
目的:探讨板层状鱼鳞病(LI)患者外周血白细胞有关生长、分化的基因的表达情况.方法:LI患者与健康人各8例,分离外周血白细胞,采用原位杂交和RNA斑点印迹方法,检测c-fos、ras、c-myc、EGFR、iNOS 基因的表达;应用免疫细胞化学染色和蛋白质斑点印迹方法,检测MAPK、CyelinD1、Filaggrin、Involucrin及K10蛋白的表达.结果:LI组外周血白细胞c-fos、ras、c-myc、EGFR、iNOS基因和MAPK、Filaggrin、Involucrin、K10蛋白的表达较健康对照组降低(P<0.01),而CyelinD1的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论:LI患者外周血白细胞有关生长、分化的基因多旱现表达下调.  相似文献   
10.
目的 探讨槲皮素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的作用.方法 将Eca-109细胞随机分为两组①槲皮素(Q)组;②不加药物对照(C)组,同时培养48h,分别进行Bcl-2、Bax和XRCC1免疫组化和免疫斑点印迹检测.以TUNEL法检测各组细胞凋亡率.结果 细胞凋亡率,C组为4%,Q组为35%(P<0.001);Q组的Bcl-2和XRCC1的免疫反应性(IR)皆低于C组(P<0.001),Bax高于C组(P<0.001);Bcl-2与XRCC1呈显著正相关,与Bax呈显著负相关.结论 槲皮素可诱导Eca-109细胞凋亡,同时下调Bcl-2和XRCC1的表达,上调Bax表达.  相似文献   
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