脑胶质瘤干细胞衍生的外泌体lncRNA HOXA-AS2促进脑胶质瘤的增殖、迁移、侵袭和干细胞特性

背景与目的：外泌体是介导肿瘤微环境中肿瘤细胞与受体细胞间相互作用的重要信使。然而，细胞外泌体长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在脑胶质瘤干细胞（glioma stem cell，GSC）和脑胶质瘤细胞的细胞间通信中的作用尚不清楚。本研究探究外泌体衍生的lncRNA对脑胶质瘤增殖、迁移、侵袭和干细胞特性的影响。方法：从中国脑胶质瘤基因组图谱（the Chinese Glioma Genome Atlas，CGGA）和癌症基因组图谱（the Cancer Genome Atlas，TCGA）数据库下载包含低级别脑胶质瘤（low-grade glioma，LGG）和高级别脑胶质瘤（high-grade glioma，HGG）lncRNA表达数据的数据集，识别LGG和HGG组织之间的差异表达lncRNA（differentially expressed lncRNA，DelncRNA），并分析HOXA-AS2水平与胶质瘤患者总生存期（overall survival，OS）之间的关系。从人胶质瘤细胞系SHG44中分离GSC，用流式细胞术检测CD133⁺富集的细胞，再用蛋白质印迹法（Western blot）检测干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平。提取和识别SHG44-GSC衍生的外泌体，并用PKH26细胞膜染料进行荧光标记；再将转染了Cy3标记HOXA-AS2的SHG44-GSC与SHG44细胞进行间接共培养；后用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）检测SHG44-GSC和SHG44-GSC衍生外泌体中HOXA-AS2的水平。使用pLVX-IRES-PURO HOXA-AS2慢病毒质粒和含靶向HOXA-AS2质粒的慢病毒shRNA进行慢病毒转染。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）和transwell实验检测SHG44-GSC衍生的外泌体HOXA-AS2对SHG44细胞增殖和侵袭能力的影响。结果：HOXA-AS2在胶质瘤中呈现高表达，且与患者较差的OS相关（P<0.01）。SHG44-GSC中CD133⁺细胞比例明显高于SHG44细胞（P<0.000 1），SHG44-GSC中干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平明显高于亲代SHG44细胞（P<0.000 1），并且SHG44-GSC中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.000 1）。PKH26标记的外泌体被SHG44细胞吸收，且SHG44细胞中可观察到Cy3标记的HOXA-AS2；HOXA-AS2 OE转染的SHG44-GSC细胞（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE）和SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE衍生的外泌体（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo）中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01），在与SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE细胞共培养的SHG44细胞中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01）。SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo可显著促进SHG44细胞增殖、迁移和侵袭。结论：来自SHG44-GSC的外泌体HOXA-AS2能显著促进胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和干细胞特性，提示HOXA-AS2可能是脑胶质瘤潜在的治疗靶点。     

儿童急性呼吸道感染综合治疗效果分析

目的探究儿童急性呼吸道感染综合治疗方法与效果。方法将90例急性呼吸道感染患儿平均分成对照组和试验组（n=45）,2组均给予止咳、退热、解痉、化痰等常规治疗,在此基础上,对照组采用利巴韦林注射液联合氯化钠注射液给予静脉滴注,感染患者在上述基础上采用头孢唑林钠联合氯化钠注射液或者氯化钠注射液给予静脉滴注。试验组在对照组基础上采用清肺泄热饮根据患者症状给予临床治疗,对比观察2组的临床疗效。结果对照组和试验组的总有效率分别为82.22%、95.56%,试验组的疗效显著优于对照组（P〈0.05）。结论在常规治疗的基础上,使用中西医综合疗法对儿童急性呼吸道感染疾病进行治疗,临床疗效好,值得临床应用。     

刺血疗法对椎动脉型颈椎病增效作用及对椎动脉血流的影响

目的:观察刺血疗法对椎动脉型颈椎病增效作用及对椎动脉血流的影响。方法:将80例椎动脉型颈椎病患者随机分为治疗组和对照组各40例,治疗组选用刺血疗法+普通针刺+拔罐治疗,对照组选用普通针刺+拔罐治疗,比较两组患者症状体征并评定疗效。结果:治疗组左右侧椎动脉收缩期、舒张期血流速度改善程度均优于对照组(P0.05);治疗组患者愈显率优于对照组(P0.05)。结论:在针刺结合拔罐基础上加上刺血疗法对椎动脉型颈椎病具有增效作用;针刺加拔罐能增加患者双侧椎动脉的供血。     

MTSS1在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖凋亡的作用研究

目的 探讨肿瘤转移抑制候选基因(MTSS1)在胃癌组织中的表达水平及对胃癌细胞增殖凋亡的作用.方法 Western Blot检测胃癌组织及对应的癌旁组织中MTSS1蛋白表达水平.通过细胞转染的方法 将过表达载体pEGFP-N1-MTSS1、空载体pEGFP-N1转染至胃癌细胞中,MTT法检测转染48 h的细胞增殖情况,流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡情况,Western Blot检测转染48 h细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平.胃癌细胞与NOTCH信号通路抑制剂S2188作用48 h后,检测细胞凋亡及细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平.结果 胃癌组织中MTSS1蛋白水平明显低于癌旁组织(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞存活率明显低于pEGFP-N1组(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞凋亡率明显高于pEGFP-N1组(P=0.000);pEGFP-N1-MTSS1组细胞中Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2表达水平与pEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义(P=0.000);NOTCH信号通路抑制剂S2188作用胃癌细胞48 h后,抑制剂组的细胞凋亡率明显高于对照组(P=0.000),两组的Cleaved Caspase-3、HES1、NICD1、NICD2蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P=0.000).结论 MTSS1在胃癌组织中表达下调.MTSS1能促进胃癌细胞凋亡,抑制胃癌细胞增殖,作用机制与NOTCH信号通路有关.     

T肽增强顺铂肿瘤杀伤作用的研究及机制探讨

背景与目的 T肽是Tuftsin的衍生物,其基本功能是刺激巨噬细胞,提高巨噬细胞吞噬及分泌能力,通过增强效应细胞的细胞杀伤作用而被广泛用于多种恶性肿瘤术后抗肿瘤治疗.本研究旨在探讨T肽与化疗药物顺铂的联合能否提高铂类药物的抗肿瘤疗效及机制.方法 应用酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)T肽和/或顺铂处理人巨噬细胞株U937后肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)分泌水平的变化;应用裸鼠荷瘤动物模型,分析T肽和/或顺铂处理小鼠肿瘤变化情况以及小鼠用药期间外周血中巨噬细胞变化情况.结果 ①应用ELISA检测发现在T肽组和T肽联合顺铂组中,U937细胞培养液中TNF-α水平明显高于对照组和顺铂组;T肽联合顺铂组中IFN-γ水平明显高于对照组、顺铂组和T肽组;②在小鼠荷瘤模型中,T肽联合顺铂组的肿瘤体积明显小于对照组、顺铂组和T肽组,并且小鼠没有明显的体重下降;③在小鼠外周血的检测分析中发现,T肽联合顺铂组中活化巨噬细胞数呈现增长趋势.免疫组化分析各组中肿瘤组织Ki67显示T肽联合顺铂组抑制肿瘤细胞增殖.结论 T肽能够促进巨噬细胞增殖和促进其分泌肿瘤细胞杀伤因子(TNF-α、IFN-γ);在体内动物模型中,T肽能够提高化疗药物如顺铂的疗效,使联合组具有更强的肿瘤抑制作用,同时能够减轻化疗药物的毒副作用.     

初诊2型糖尿病患者亚临床动脉粥样硬化的超声检查及危险因素分析

目的探讨初诊2型糖尿病(2型DM)患者亚临床动脉粥样硬化(AS)的发生情况、危险因素及老年患者的临床特点.方法采用无创性高分辨超声血管成像技术筛查255例、病程≤1年2型DM患者的颈总动脉、髂总动脉及股动脉内中膜厚度(IMT)及AS斑块.分别比较老年组与中青年组、老年组有无亚临床AS者在性别、体重指数、腰臀比、血压、血脂谱、糖化血红蛋白水平、胰岛素抵抗等方面的差异.采用Logistic回归分析方法分析初诊2型DM患者亚临床AS发生的危险因素.结果老年组亚临床AS 14例(17.3%),中青年组16例(9.2%,P<0.01).股动脉亚临床AS检出率高于颈总动脉及髂总动脉(分别为8.6% 、 4.7% 和0.4%,P＜0.001).与中青年组收缩压水平[(120±22)mm Hg]比较,老年组较高[(126±19)mm Hg,P＜0.05];老年组无AS与亚临床AS比较,舒张压水平较高(P＜0.001).Logistic回归分析显示亚临床AS发生的危险因素为老龄化、胰岛素抵抗、舒张压水平增高及低水平的高密度脂蛋白胆固醇(P＜0.05).结论初诊2型DM患者部分存在亚临床AS,老年患者罹患率更高;不同部位亚临床AS的发生率存在差异;初诊2型DM伴亚临床AS的老年患者舒张压水平增高,其危险因素为老龄化、胰岛素抵抗、舒张压水平增高及低水平的高密度脂蛋白胆固醇.     

超声血流定量新技术的进展

评估器官或组织的灌注水平可反映其病理生理变化,是临床诊断和治疗的基础。作为一种新颖的定量血流灌注方法,超声动态评估组织灌注(DTPM)技术显示出良好的应用前景。本文就DTPM技术进行综述。     

声触诊组织量化成像评价注射A型肉毒毒素治疗脑卒中后前臂旋前肌痉挛肌肉硬度改变

目的 探讨声触诊组织量化成像（VTIQ）评价注射A型肉毒毒素治疗脑卒中后前臂旋前肌痉挛肌肉硬度改变的价值。方法 收集31例脑卒中后前臂旋前肌痉挛患者,在其松弛状态下,于超声引导注射A型肉毒毒素,并于治疗前和治疗后1个月对双侧旋前圆肌、旋前方肌行VTIQ检查,测量剪切波速度（SWV）,对比治疗前后以及患侧与健侧SWV差异。于治疗前后对患侧上肢肌力进行改良Ashworth量表（MAS）评分并比较其差异,评价其与SWV的相关性。结果 治疗前患侧旋前圆肌SWV值高于健侧（P=0.005）;治疗后1个月,患侧旋前圆肌、旋前方肌SWV值与健侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。治疗后患侧旋前圆肌、旋前方肌SWV值均小于治疗前（P均<0.05）,治疗前后患侧上肢MAS评分差异有统计学意义（Z=-2.252,P=0.024）。治疗前后患侧上肢肌张力MAS评分与治疗前后患侧旋前圆肌的SWV值呈正相关（r_s=0.629、0.653,P均<0.001）。结论 VTIQ可用于动态观察脑卒中后前臂旋前肌痉挛患者旋前圆肌、旋前方肌的肌肉硬度,由此定量评估注射A型肉毒毒素治疗脑卒中后前臂旋前肌痉挛的疗效。     

磁共振弥散加权成像与增强CT在宫颈癌分期和诊断中的价值

目的:探索磁共振弥散加权成像(DWI)与增强CT扫描在宫颈癌分期以及诊断中的应用价值。方法:回顾性收集我院2017年3月-2018年6月收治的110例宫颈癌患者的临床资料,均在术前接受DWI和增强CT扫描,观察两种方法的诊断结果。结果:DWI对宫颈癌的诊断符合率97.27%显著高于CT的诊断符合率82.73%,P0.05;在宫颈癌分期准确率对比上:Ⅰ期、Ⅱa期和Ⅱb期的分期准确率,DWI均高于CT,P0.05;Ⅲ期Ⅳ期分期准确率,DWI与CT差异无统计学意义,P0.05;肿瘤征象检出率,DWI在侵犯宫颈旁组织、侵犯阴道、侵犯子宫体的检出率均高于CT,P0.05;在淋巴结转移征象检出率:DWI与CT无统计学意义,P0.05。结论:磁共振弥散加权成像在宫颈癌诊断、分期中应用价值高,其能更准确诊断和分期,判断肿瘤旁浸润程度、淋巴结转移情况等,为临床医师治疗方案制定提供可靠准确的信息,值得推广。