国产和进口荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的比对分析

目的分析国产和进口实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)试剂检测乙型肝炎病毒(HBV)-DNA的相关性,探讨国产和进口试剂在临床应用中的差异。方法使用国产和进口试剂平行检测262例乙型肝炎(乙肝)患者血浆当中的HBV-DNA水平,国产试剂采用手工提取标本,罗氏LightCycler480Ⅱ(LC480Ⅱ)进行核酸扩增;进口试剂则采用罗氏COBAS AmpliPrep(CAP)和COBAS Taqman48(CTM)进行标本提取和扩增;对HBV-DNA病毒载量数据进行对数转换(log10),并将两组数据进行相关分析。结果国产和进口试剂检测结果,经线性拟合,R2=0.814 3。HBV-DNA浓度在10~103 IU/mL的标本,R2=0.300 6;浓度在104~105 IU/mL的标本,R2=0.411 8;浓度在106~108 IU/mL的标本,R2=0.801 7。进口试剂阳性检出率为75.57%(198/262),明显高于国产试剂阳性检出率[65.65%(172/262)]。结论国产试剂和进口试剂相比,相关性良好。HBV-DNA浓度在106~108IU/mL时,相关性最高;浓度在104~105 IU/mL时,相关性一般;浓度在10~103 IU/mL时相关性较差,国产试剂与进口试剂有明显差异,灵敏度有待进一步提高。     

山东省立医院2011—2013年门诊及住院患者乙型肝炎病毒感染状况分析

目的分析山东省立医院门诊及住院患者乙肝五项定量检测结果,了解患者的乙肝感染状况,为乙肝的防治提供理论依据。方法采用电化学发光免疫分析法对2011—2013年226 193例门诊及住院患者进行乙肝五项定量检测,分别按年份、性别、年龄和乙肝五项模式进行分组,应用SPSS 21.0统计软件进行统计分析。结果共检出HBs Ag阳性14 069例,HBs Ag阳性率为6.22%(14 069/226 193)。2011—2013年HBs Ag阳性检出率分别为6.64%(4974/74 959)、6.18%(4410/71 399)、5.87%(4685/79 835),呈逐年下降趋势。男性HBs Ag阳性检出率为7.43%(8855/119 181),明显高于女性的4.87%(5214/107 012)。0~19岁年龄组HBs Ag阳性率最低,为1.28%(364/28 355);30~39岁年龄组HBs Ag阳性率最高,为8.21%(2694/30 129)。共检出12种乙型肝炎病毒感染模式,"乙肝小三阳"检出率最高,为60.63%(8530/14 069);其次为"乙肝大三阳",检出率为26.05%(3665/14 069);再次为1、3、4、5阳,1、5阳,1、2、4、5阳,1、2、3、5阳,检出率分别为5.52%(777/14 069)、2.84%(400/14 069)、2.04%(287/14 069)、1.26%(177/14 069);还检出了6种罕见模式:1阳,1、2、3、4、5阳,1、3阳,1、2、5阳,1、2阳,1、2、3阳,检出率均低于1%,分别为0.80%(113/14 069)、0.46%(65/14 069)、0.23%(33/14 069)、0.08%(11/14 069)、0.07%(10/14 069)、0.01%(1/14 069)。结论山东地区乙肝感染具有性别差异、年龄差异,且呈逐年下降趋势,感染模式以小三阳和大三阳为主,多种感染模式并存。     

PCT、WBCN%、CRP、ESR、血培养、痰培养联合检测在儿科重症肺炎中的应用

目的探讨PCT、WBCN%、CRP、ESR、血培养、痰培养联合检测在儿科重症肺炎中应用价值,以减少对重症肺炎患儿的误诊和漏诊并可以得到及时的治疗。方法选取山东大学附属省立医院2016年收治的196例儿科肺炎患儿为研究对象,其中90例为重症肺炎,106例为轻度肺炎;根据血培养或痰培养结果分为细菌性肺炎55例、病毒性肺炎65例和其他肺炎76例,采集患儿的血液分别检测降钙素原(PCT)、白细胞计数百分比(WBCN%)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR),观察各组患儿的PCT、WBCN%、CRP、ESR水平以及PCT、WBCN%、CRP、ESR检测的灵敏度、特异性等指标。结果重症肺炎患儿的PCT、WBCN%、CRP、ESR水平明显高于轻度肺炎患儿,差异有统计学意义(P0.05);细菌性肺炎患儿的PCT、WBCN%、CRP、ESR水平明显高于病毒性肺炎患儿和其他肺炎患儿,差异有统计学意义(P0.05)。PCT检测的灵敏度、特异性等指标明显高于WBCN%、CRP、ESR,差异有统计学意义(P0.05)。结论 PCT、WBCN%、CRP、ESR、血培养、痰培养联合检测可以准确地判断儿科重症肺炎的发病情况,而且PCT检测的灵敏度、特异性比其他更可靠。     

SLE患者外周血单个核细胞IFN-γ及IL-10mRNA表达与疾病活动性的相关性

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者疾病活动性的相关因素.方法选择70例SLE患者(SLE组)和63例健康查体者(对照组),采用PCR法检测外周血单个核细胞IFN-γmRNA和IL-10mRNA表达情况;采用凝胶图像扫描系统对PCR产物的电泳条带进行密度扫描.结果SLE组IL-10 mRNA表达量高于对照组(P＜0.01),IFN-γ表达低于对照组,但无统计学差异.SLE组SLE疾病活动指数(SLEDAI)＞10分者IFN-γ mRNA表达显著高于≤10分者,IL-10 mRNA表达在两者间无统计学差异.结论SLE时存在Th1细胞向Th2细胞漂移现象;IFN-γ表达增高与SEE疾病活动性密切相关.     

山东地区汉族人群KIR基因多态性分析

目的 分析山东地区汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多态性及基因型和单倍型多态性,为进一步研究KIRs与疾病的关系奠定基础.方法 采用序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)对412例山东地区无血缘关系的汉族健康志愿者进行KIR基因频率检测及基因型和单倍型分析.结果 ①KIR基因频率:可检测到目前已知的18种KIR基因;所有个体均检测到3个框架基因(2D14、3DL2、3D13)以及KIRZ,其基因频率均为100%.3DP1、2DL3、2DL1、3DL1和2DS4基因较为常见,频率分别为99.03%、98.79%、98.79%、98.79%、96.84%;而2DL2、2DS2、3DP1v基因频率较低.②KIR基因型频率:共检出基因型28种,以AJ(2,2)、AF(1,2)型最常见,其次为AH(5,2)、G(4,5)、M(1,5);另外有11种基因型在自人中尚未见报道.③KIR基因单倍型频率:共检出单倍型16种,最常见的是单倍型2,频率为46.36%;其次为单倍型1,频率为25.61%.结论 山东地区汉族人群有其独特的KIRs基因频率、基因型频率和单倍型频率分布;本研究可为进一步研究KIRs与疾病的相关性提供依据.     

结核病的分子生物学诊断技术研究进展

近10余年来,结核病发病呈全球持续恶化,2007年死于结核病的患者约177万。结核杆菌是结核病的主要致病菌,可在人群中传播,对外界环境的抵抗力强,易产生耐药菌株。传统的病原学检查简便易行,但特异性、灵敏度较差,     

多指标联合检测在丙型肝炎诊断中的应用

本研究拟探讨在丙型肝炎诊断中丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）联合丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）、HCV核心抗原（HCV-cAg）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测的临床应用价值。     

扩张型心肌病与Th1／Th2细胞因子失衡的研究

目的探讨Th1／Th2细胞因子失衡与扩张型心肌病（DCM）之间的关系。方法用RT—PCR方法检测DCM患者与健康对照者外周血单个核细胞中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10mRNA的表达水平，比较DCM患者与健康对照者之间IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-10mRNA的表达变化之间的关系。结果DCM组Th1／Th2比值明显低于对照组（P均〈0．05），IL-4和IL-10表达较对照组明显增高，而IFN-γ和IL-2较对照组表达明显降低。结论DCM组存在Th1细胞向Th2细胞漂移现象，Th2细胞介导的体液免疫应答在DCM发病机理中起优势作用。     

人类白细胞抗原配型对移植肾失功患者群体反应性抗体产生的影响

目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)配型对移植肾失功患者群体反应性抗体(PRA)产生的影响. 方法对24例术前PRA阴性的初次肾移植病例行供受者HLA分型,移植.肾失功后检测受者PRA并确定抗体特异性.PRA定性、定量及确定抗体特异性用莱姆德混合抗原板(LATM)及莱姆德抗原板1240(LAT1240)检测.HLAI类及Ⅱ类抗原分型用顺序特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术.观察PRA产生情况,比较致敏与非致敏病例的HLA配型情况,并分析HLA错配与PRA产生的关系.结果 24例中PRA阳性17例,阴性7例.17例致敏患者中Ⅰ类抗体阳性8例,Ⅱ类抗体阳性15例,Ⅰ类及Ⅱ类抗体同时阳性6例.A1(3例)、A24(2例)、DR7(6例)、DR9(4例)、DRl2(3例)及DRl3(4例)抗体多见,供者特异性抗体(DSA)中A1(2例)、DR7(4例)及DR9(3例)多见.按6抗原配型标准比较Ⅰ类抗原错配数,Ⅰ类抗体阳性组(8例)与阴性组(16例)问比较差异无统计学意义(P＞0.05),按交叉反应组(CREG)配型标准阳性组错配数多于阴性组(P＜0.01);比较Ⅱ类抗原错配数,Ⅱ类抗体阳性组(15例)错配数多于阴性组(9例)(按6抗原配型标准P＜0.05,按CREG配型标准P＜0.01).供者HLA频率及错配频率最高的A2及A30未发现相应抗体产生,供者A1-受者A2、DR7及DR9错配易导致DSA产生.结论 HLA错配是移植肾失功患者致敏的重要原因.供者抗原出现频率及错配频率与PRA及DSA出现频率不完全一致,某些抗原错配更易导致PRA及DSA产生.初次肾移植良好的HLA配型可减少等待再次肾移植患者的致敏发生率.     

肺结核患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性分析

目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)基因多态性与肺结核(TB)的关系。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR),分析109例肺结核患者(TB组)和30例健康者(对照组)中14个KIR基因多态性。TB组又分为30例痰涂片抗酸杆菌阳性(SP组)和79例涂片阴性患者(SN组)。结果与对照组比较,SP组KIR2DL5(P=0.007)、2DS1(P=0.038)、2DS3(P=0.010)、3DS1(P=0.002)阳性率增高,KIR2DS5频率降低(P=0.038);SN组KIR2DL5(P=0.018)、2DS1(P=0.000)、2DS5(P=0.000)、3DS1(P=0.001)阳性率增高;KIR2DS4(P=0.004)和KIR2DS5(P=0.000)频率SP组较SN组升高;患者携带两个及以上活化KIR的频率较对照组明显升高(P=0.013);患者组基因型AJ的频率较对照组显著降低。结论 KIR基因多态性可能与肺结核的易感性有关。