NFκB在白血病细胞株中持续激活状态的检测及其意义

目的 检测NFκB在白血病细胞株中的激活状态。方法 提取15种白血病细胞株的细胞核蛋白，与γ-^32p标记NFxB寡核苷酸共浴后垂直电泳，4～8h后放射自显影。结果 NFκB在15种白血病细胞株中均处于激活状态。结论 NFκB的激活可能与白血病的发病机制有关。     

染料木素对人子宫内膜癌细胞系HEC-1B体内外增殖抑制作用的研究

目的研究染料木素(genistein,GEN)对人子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞体内外增殖的抑制作用,探讨其抗癌作用的机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色分析(MTT)、病理组织切片HE染色等方法,分别检测体内外GEN对人子宫内膜癌细胞系HEC-1B增殖的抑制效果。结果体外实验:GEN浓度为0~25μmol/L时,对HEC-1B细胞有明显促进增殖作用(P<0.05),随着GEN浓度升高至50μmol/L时,对HEC-1B细胞则呈现抑制作用,当GEN浓度为100μmol/L时,则显示了明显的生长抑制作用(P<0.05),其抑制率达到55%。体内实验:人子宫内膜癌裸鼠模型经100μmol/L染料木素处理后体内平均瘤质量明显减小(P<0.05),抑瘤率可达39%,且处理后肿瘤组织微血管数量减少,部分区域坏死明显。结论染料木素能够明显抑制人子宫内膜癌细胞及其移植瘤的生长,其机理可能为通过和雌激素竞争结合雌激素受体,减轻雌激素促细胞增殖作用和抑制肿瘤血管生成导致肿瘤细胞坏死,从而发挥抗肿瘤作用。     

怀槐异黄酮抗妊娠小鼠肝损伤的作用

目的观察怀槐异黄酮对雌激素诱导小鼠肝损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法选择BALB/c孕鼠随机分为正常组、溶剂组、肝损伤模型组和大、中、小剂量异黄酮给药组,每组10只,给药组从受孕第7天开始分别灌胃异黄酮,每天1次,共7 d。除正常组外,各组从妊娠10 d起连续4 d皮下注射17-α-乙炔雌二醇1.0μg/g体重。常规检测孕鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性水平和肝脏组织病理。结果给异黄酮的孕鼠血清ALT、AST活性水平显著下降,与肝损伤模型孕鼠比较差异有统计学意义(P<0.05),其肝脏组织病理学结果也证实给药孕鼠肝脏病理明显改善。结论怀槐异黄酮对雌激素诱导的小鼠肝损伤有显著保护作用。     

人子宫肌瘤SCID鼠皮下移植瘤的建立及其生物学研究

目的建立人子宫肌瘤SC ID鼠皮下移植瘤模型,为研究人子宫肌瘤的实验研究提供合适的动物模型。方法将2例子宫肌瘤患者手术切除标本移植于SC ID鼠皮下,观察移植瘤的及SC ID鼠生长情况。待移植瘤存活后作病理学及雌激素受体、孕激素受体(ER,PR)检查。结果成功建立6只人子宫肌瘤SC ID鼠皮下移植瘤模型,移植成功率为100%,荷瘤鼠的生存期未见缩短,状态良好。病理组织学证实:移植物保持了原子宫肌瘤生物学特征,ER、PR均有不同程度的表达。结论成功建立了人子宫肌瘤SC ID鼠皮下移植瘤模型,移植瘤保持了原子宫肌瘤生物学特征,是研究人子宫肌瘤较理想的动物模型。     

体外成熟的卵母细胞胞质成熟的评价指标

卵母细胞的体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)是辅助生殖技术的重要过程之一.优质的IVM的卵母细胞必须是细胞核和细胞质同步成熟,以保证成功受精、胚胎正常发育乃至健康子代的出生.目前,细胞核成熟的评价标准已得到共识,而细胞质的成熟却表现复杂,尚缺乏有效的观察评价指标.近年来研究发现,卵母细胞成熟时其超微结构、一些信号分子和细胞因子均发生某些变化,这为评价细胞质成熟提供了依据.     

新生鼠卵巢中卵泡膜干细胞的分离培养及鉴定

目的分离、培养、鉴定小鼠卵巢组织中的卵泡膜干细胞。方法取2～4 d新生鼠卵巢组织,胶原酶、胰蛋白酶联合消化获得单个细胞悬液,GSM-K无血清培养基培养细胞观察细胞球形成;RT-PCR法检测膜基因Ptch1和透明带基因Zp1、Zp2、Zp3的表达,免疫荧光法检测干细胞标记物碱性磷酸酶(AKP)、Oct4、膜细胞标记物Gli3与颗粒细胞标记物FSHR的表达;体外诱导分化,RT-PCR法检测分化标记物Gli2,油红O染色后观察。结果 GSM-K中培养2 d形成细胞球;Ptch1、AKP、Oct4和Gli3表达阳性,不表达Zp1、Zp2、Zp3和FSHR;诱导分化后,Gli2表达,油红O染色阳性。结论新生鼠卵巢组织中存在卵泡膜干细胞,且具有分化潜能。     

组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性

  目的  探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β₂表达及宫颈病变发生发展的关系。  方法  收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）Ⅱ~Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma,SCC）组织,分别采用免疫组织化学和Western Blot方法检测AcH3、RAR-β₂和Involucrin的表达;分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β₂表达及宫颈病变程度的关系。  结果  随着宫颈病变的进展,AcH3、RAR-β₂和Involucrin的表达逐渐降低,甚至缺失,组间差异有统计学意义（P＜0.05）;组蛋白乙酰化水平与RAR-β₂表达呈正相关（r=0.797,P＜0.05）,AcH3和RAR-β₂的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0.547_（AcH3）,r=-0.585_{（RAR-β2）},P＜0.05]。  结论  组蛋白乙酰化修饰与RAR-β₂表达调控有关,并可能参与宫颈癌的发生。      

小鼠同种异体移植卵巢组织的功能及形态学差异

目的:研究同种异体移植卵巢组织在昆明种小鼠(KM小鼠)和重症免疫缺陷鼠(SCID鼠)体内存活、卵泡发育及内分泌功能。方法:分别将同种异体卵巢组织移植到两种去势小鼠肾被膜下,通过阴道脱落细胞涂片观察小鼠动情周期变化;移植后1、2个月取移植物和子宫进行形态学观察,并测定血清中雌、孕激素水平。结果:两种小鼠在卵巢移植后均恢复了动情周期,血清中雌、孕激素水平明显高于去势组。术后2个月内,SCID鼠体内移植物存活良好,可见各级卵泡和黄体,但Oct-4阳性细胞逐渐减少;KM小鼠体内移植物则渐进性炎症细胞浸润,最终发生坏死或纤维化。结论:免疫排斥影响移植卵巢的卵泡发育和内分泌功能的发挥;同种异体卵巢在SCID鼠体内存活良好,具有内分泌功能、卵泡发育并可能排卵。