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目的:构建艰难梭菌(CD)谷氨酸脱氢酶(GDH)的原核表达载体,表达重组蛋白并鉴定其抗原活性。方法以 CD 的 ATCC43255菌株基因组 DNA 为模板,通过 PCR 法扩增 GDH 全长基因片段,构建原核表达载体并转化到大肠杆菌中,IPTG 诱导表达 GDH 蛋白,并用 Ni 柱进行纯化。利用 CD 抗原检测试剂盒对 GDH 抗原区段的抗原性进行鉴定。结果构建的原核表达载体 pET-28a/GDH 可在大肠杆菌中成功表达,获得的 GDH 抗原能与相应抗体产生特异性反应。结论原核表达的 CD 的 GDH 抗原具有很好的抗原活性,为进一步制备相应抗体并建立CD 的 GDH 抗原的免疫检测方法奠定了基础。 相似文献
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艰难梭菌是一种革兰阳性的专性厌氧产芽孢杆菌。核糖体027型高毒力株在发达国家的多次暴发使得艰难梭菌越来越引起重视,近年来艰难梭菌感染的发生频率已在全世界范围内呈显著上升趋势。目前该菌的分子流行病学研究进展较快,常用的分子分型方法包括限制性酶切分型、PCR核糖体分型、脉冲场凝胶电泳、多位点序列分析、重复序列PCR分型、多位点可变数目串联重复序列分析、毒素分型和全基因组测序分析等。同时,仍有不断改进的新型分子分型方法应用于此,以期更准确、快速和有效地对艰难梭菌感染暴发进行识别与调查,为艰难梭菌的感染防控提供可靠的分子流行病学数据。 相似文献
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α-N-末端乙酰化修饰(α-N-terminal acetylation)是一种蛋白质 N-末端的修饰形式,是真核生物中最为普遍的蛋白质修饰方式之一。虽然α-N-末端乙酰化修饰早在20世纪70年代就被科学家所发现,但是到目前为止,其广泛存在的意义仍未有定论。近年来,研究人员发现了α-N-末端乙酰化修饰发生的规律,总结出了(X)PX 法则,探明了α-N-末端乙酰化修饰对多种蛋白质起着特异性的重要作用,使得人们更加清楚地了解细胞内一些生化反应发生的原理以及不同细胞通路的调节方式。此外,α-N-末端乙酰化蛋白质的序列检测方法也是近年来研究的热点之一。本文简要综述α-N-末端乙酰化修饰的研究进展。 相似文献
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7-氯苄基四氢巴马汀的抗心律失常作用 总被引:2,自引:0,他引:2
7-氯苄基四氢巴马汀5mg·kg-1可明显拮抗乌头碱,哇巴因,氰仿所致的心律失常以及提高猫心电致颤阈,10mg·kg-1时,还可抗CaCl2所致的大鼠室颤,其提高猫心电致颤阈的作用比奎尼丁稍强。7-氟节基四氢巴马汀可浓度依赖性地降低蟾蜍坐骨神经动作电位的振幅和零相最大上升速率,延长传导延迟。在豚鼠心乳头状肌动作电住实验中,7-氯苄基四氨巴马汀亦能浓度依赖性地延长动作电位时程及有效不应期并能降低动作电位的振幅和零相最大上升速率。 相似文献
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在大鼠肛尾肌标本,7-氯苄基四氢巴马汀(7-chlor-BTHP)10μmol·L-1能竞争性地抑制苯福林致肛尾肌收缩的量效曲线,使量效曲线右移,最大效应不变,其pA2值为5.9,但对可乐定抑制电场刺激所致的大鼠输精管收缩的量效曲线无影。在毁脊髓大鼠,7-chlor-BTHP5mg·kg-1在不同刺激频率下可使心率减慢,但对电刺激所致的血压升高无影响。7-chlor-BTHP恒速灌注,能剂量依赖性地延长心电图P-R间期及减慢心率,直至动物死亡也未见过速性心律失常发生。 相似文献
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