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1.
甲基化特异性PCR技术的质量控制及改进 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:改进甲基化特异性PCR(MSP)技术并控制实验质量.方法:采用改进的MSP法检测正常胃粘膜及胃癌组织中eaveolin-1基因的甲基化状况.运用饱和酚-氯仿抽提法提取DNA,其中石蜡包埋组织连续切片厚度为8μm;采用热启动PCR:反应体系为25μL、变性温度设定为95.5℃、循环数设定为30.结果:新鲜组织较石蜡包埋组织更适于MSP实验,但福尔马林固定石蜡包埋组织同样可用于MSP实验,并且8μm厚的石蜡包埋组织能获得较完整的DNA链.热启动PCR效果良好:25μL体系敏感性优于50μL体系,95.5℃可以使含CpG岛的DNA链解链更完全,30个循环足以扩增小于150 bp的目的片段.结论:采用改进的MSP技术,可获得较好的DNA模板,提高实验的灵敏度和成功率,更适于甲基化的研究. 相似文献
2.
背景:肿瘤干细胞已成为生命科学研究领域的热点问题,EpCAMhigh/CD44+结直肠癌干细胞的发现使对肿瘤干细胞形态特征及分布的观察成为可能。
目的:观察结直肠癌干细胞数量、位置、分布方式及苏木精-伊红染色形态。
设计、时间及地点:观察性实验,于2008-03/08在解放军兰州军区兰州总医院病理科完成。
材料:67例结直肠癌石蜡包埋标本取自解放军兰州军区总医院病理2005/2007外检档案。所有标本术前均未行放化疗。患者中男27例,女40例,年龄29~90岁。
方法:根据结直肠癌干细胞特异性表面标记EpCAM和CD44,标记石蜡包埋结直肠癌标本中的肿瘤干细胞,应用常规苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色及免疫组织化学双重染色方法,定位EpCAM和CD44双阳性细胞,并在苏木精-伊红染色切片的对应位置上观察其形态特征。
主要观察指标:EpCAM和CD44双阳性细胞的数量、位置、分布方式及苏木精-伊红染色形态。
结果:双阳性细胞的数量占肿瘤细胞的0.1%~30.0%,它们沿腺管样结构的基底侧呈局灶状或散在分布;细胞呈卵圆形或立方状,胞浆稀少,胞核大小较一致,均质深染,呈卵圆形或高柱状;且其数量与结直肠癌的分化程度呈负相关,分化越低,数量越多。
结论:肿瘤干细胞是肿瘤发生发展、转移、复发及耐药的根源,观察结直肠癌干细胞的数量、位置、分布方式、苏木精-伊红染色形态,并分析其与结直肠癌病理参数的关系,可为结直肠癌的病理诊断和分期、预后评估及临床治疗提供参考。 相似文献
3.
我们利用CMIAS—007真彩色图像分析仪对150例良、恶性肿瘤细胞DNA含量进行了测定和分析。结合病理检查结果,旨在为临床肿瘤患者的治疗提供帮助,尤其针对恶性肿瘤细胞增殖不同周期的化疗药物的选择提供依据。本文同时还对影响测定DNA含量的因素进行了分... 相似文献
4.
目的:探讨腹壁恶性肿瘤的诊断和治疗。方法:回顾12例腹壁恶性肿瘤的临床诊治经过。结果:原发性纤维肉瘤5例,腹壁种植转移瘤7例,其中5例伴腹腔内转换。2例活检未切除,10例肿瘤切除并辅以放疗和/或化疗。4例局部复发或合并远处转移,均再手术。2例活检后1个月死亡,1例术后34个月死亡。其余9例随访8个月~8年(平均39.1个月)存活。结论:继发性恶性肿瘤术后诊断率高于原发性恶性肿瘤。原发性纤维肉瘤应用 相似文献
5.
目的:探讨KAI1和P53蛋白在滋养细胞疾病中的表达及与滋养细胞肿瘤侵袭的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测正常早孕绒毛组织及滋养细胞肿瘤组织中KAI1和P53蛋白的表达情况。结果:①KAI1在恶性葡萄胎及绒癌中的表达与正常早孕绒毛及葡萄胎比较明显下降(P〈0.05),KAI1的表达与滋养细胞肿瘤患者的年龄和浸润情况相关(P〈0.05);②P53在恶性葡萄胎及绒癌中的表达与正常早孕绒毛及葡萄胎比较明显升高(P〈0.05);③P53和KAI1表达之间无明显相关(P〉0.05,rs=-0.8)。结论:P53、KAI1对预测滋养细胞的恶变,判断预后有一定的参考价值。 相似文献
6.
胰岛β细胞功能异常及胰岛素抵抗(IR)是2型糖尿病(T2DM)发病的基本环节。老年T2DM患者的人数占DM总数的50%以上,老年组患者存在明显IR和胰岛素分泌缺陷。临床和实验研究发现消渴灵方有良好的降糖和改善糖尿病并发症作用心,但目前作用机制不明。我们研究消渴灵方对老年T2DM患者胰岛β细胞功能和IR的影响以探讨具体的作用机制。 相似文献
7.
急性硒中毒后小鼠肝细胞线粒体损伤的体视学研究 总被引:6,自引:2,他引:4
目的:对急性二氧化硒中毒所致肝细胞线粒体损伤进行定量研究,以利于临床合理使用硒制剂。方法:雄性 B A L B/ C 小鼠110 只,随机分11 组,每组10 只。其中10 组用于测定口服 L D50 ,用改良寇氏法进行统计处理,求得小鼠口服 L D50 。剩余一组10 只小鼠,再随机分为正常对照组与染毒组,每组5 只。染毒组用二氧化硒( Se O2) ,以小鼠口服 L D50 腹腔注射。两组均在1 h 后处死。应用体视学方法对肝细胞的体密度( Vv) 、比表面(δ) 、面密度( Sv) 、平均体积( V) 和数密度( Nv) 进行测算。结果: B A L B/ C小鼠的口服 L D50 为2 .04 mg/kg 。体视学结果显示:硒中毒后小鼠肝细胞线粒体与对照组相比,其比表面减小、平均体积增大及数密度降低( P< 0 .05) ;而体密度和面密度则无显著性差异( P> 0 .05) 。结论:硒中毒可直接导致肝细胞线粒体的损伤,表现为线粒体体积增大,数量减少,从而导致其功能降低。为以后更好地认识和预防硒中毒提供了基础病理资料。 相似文献
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送检时间对脱落细胞形态影响的定量研究 总被引:5,自引:0,他引:5
离体的脱落细胞 ,随着离体时间的增加而逐渐自溶 ,其细胞形态发生较大改变而影响观察 ,但离体时间对脱落细胞形态的影响至今缺乏科学定量分析 ,本实验应用CMIAS 0 0 7真彩色图象分析仪 ,对不同时间离体脱落细胞标本进行定量分析 ,以发现最佳的送检时间 ,为临床合格地送检脱落细胞标本提供科学的依据。1 材料与方法1.1 图像分析和切片的制备 2 0例胸腔积液穿刺标本 ,均为我院 1999年 2月~ 6月住院患者 ,并直接在穿刺后取得标本。把标本等量分为 5份 ,分别在 15min、30min、6 0min、90min和 12 0min以 30 0 0r/mi… 相似文献
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目的 探讨髌骨软骨母细胞瘤(CB)的临床特点、病理形态、免疫表型、影像学及预后.方法 报告1例髌骨软骨母细胞瘤,复习近38年国内外有关文献报道,分析髌CB瘤的临床、病理和影像的诊断与鉴别诊断及预后资料.结果 患者男性,21岁.左膝部疼痛伴左下肢无力半年.X线片可见髌骨内溶骨性破坏.镜下肿瘤由圆形或多角形软骨母细胞、多核巨细胞、局灶样类软骨组织及小的钙化灶等成分组成,瘤组织S-100(+).结论 软骨母细胞瘤发生在髌骨甚为罕见,其发生率约占软骨母细胞瘤的2%,因其在组织学上表现的多样性应临床、病理学、影像学检查三结合进行诊断. 相似文献
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恶性肿瘤给患者及亲属都带来了极大的心理压力和负担。研究表明 :情绪有互相感染、互相转化的特点[1] 。鼓励引导患者亲属始终以乐观的精神状态去感染患者 ,对于提高患者的心理素质及生命活力 ,充分发挥身心潜力 ,达到最佳的治疗效果是非常重要的。我们采用以病人为中心的整体化护理 ,主动与患者亲属交谈沟通 ,帮助引导他们以积极的心态面对患者 ,取得了较为理想的效果。现将我科 83例恶性肿瘤亲属的心理类型及采取的不同护理方法报告如下。1 资料与方法1.1 选自我科 1996 - 0 1~ 1999- 11住院的恶性肿瘤 83例 ,其中胃癌 2 8例 ,结肠癌 1… 相似文献